Morfologia do esperma por alta ampliação em homens férteis (FERTIFORT)

A população estudada consistiu em 50 homens de 18 a 45 anos com fertilidade espontânea comprovada. Todos os sujeitos deram seu consentimento informado para participar do estudo. Após questionamento sobre o histórico médico e andrológico completo, amostras de sêmen foram coletadas por masturbação após 2 a 5 dias de abstinência sexual e processadas para análise após liquefação por 20 minutos a 37°C. Realizamos contagem de espermatozóides, análise de motilidade, vitalidade e morfologia convencional, bem como uma análise morfométrica detalhada dos vacúolos em alta ampliação usando um software de análise de imagem. Para a análise em alta ampliação, cinquenta microlitros de esperma fresco foram lavados em 2,5 ml de solução de lavagem por centrifugação por 5 minutos a 400g. O pellet foi ressuspenso em 100 µl de solução de lavagem e os espermatozóides foram fixados pela adição de 100 µl de tampão fosfato salino-formaldeído 3,7%. Dois microlitros dessa suspensão foram colocados em um prato com fundo de vidro e examinados por microscopia de contraste de interferência Nomarski com uma câmera montada em um microscópio com uma lente objetiva de imersão x100. Para cada amostra, os vacúolos da cabeça do esperma foram analisados ​​em 100 espermatozóides que foram fotografados aleatoriamente e analisados ​​separadamente usando um software de sistema de imagem digital. As medições usando o software foram realizadas por um único operador. O módulo de Medição Interativa permite a medição das áreas da cabeça do esperma e das áreas do vacúolo, descrevendo manualmente seu contorno. A área e a posição de cada vacúolo foram registradas.