Badanie postu – odkrywanie mechanistycznych skutków przedłużonego postu u ludzi.

Uzasadnienie: Podwyższony poziom trójglicerydów w osoczu jest coraz częściej uznawany za ważny przyczynowy czynnik ryzyka chorób sercowo-naczyniowych i związanych z nimi patologii. Obniżenie poziomu trójglicerydów w osoczu może zatem być celem terapeutycznym zmniejszającym ryzyko chorób sercowo-naczyniowych. Lipaza lipoproteinowa (LPL) jest enzymem, który katalizuje hydrolizę trójglicerydów osocza do kwasów tłuszczowych na śródbłonku naczyń włosowatych, obniżając w ten sposób poziom trójglicerydów w osoczu i stymulując wychwyt tych kwasów tłuszczowych do komórek. Angiopoetyno-podobny 4 (ANGPTL4) jest wytwarzany przez komórki tłuszczowe i promuje rozwijanie i inaktywację LPL, prowadząc do zmniejszenia hydrolizy triglicerydów w osoczu. Rola ANGPTL4 w regulacji LPL jest szczególnie ważna podczas postu. Ponieważ jednak większość badań przeprowadza się na modelach zwierzęcych, niewiele wiadomo na temat wpływu postu na metabolizm tkanki tłuszczowej u ludzi, a konkretnie na ANGPTL4 i jego związek z LPL.

Cele: Głównym celem tego badania jest określenie wpływu przedłużonego postu na ekspresję genu i białka ANGPTL4 w podskórnej tkance tłuszczowej, kluczowym narządzie biorącym udział w metabolizmie lipidów. Dodatkowo zbadany zostanie wpływ przedłużonego postu na ekspresję genu LPL, ekspresję białka LPL oraz aktywność LPL w podskórnej tkance tłuszczowej. Aby zbadać ogólnoustrojowe skutki przedłużonego postu, badacze zmierzą również poziomy ANGPTL4 w osoczu oraz ekspresję genów ANGPTL4 i LPL w krążących komórkach odpornościowych (PBMC). Drugorzędnym celem tego badania jest uzyskanie bardziej holistycznego spojrzenia na zmiany zachodzące po przedłużonym poście, poprzez zbadanie wpływu postu na ekspresję całego genomu, zmiany potranskrypcyjne i na markery stanu metabolicznego. Połączone wyniki wszystkich pomiarów ostatecznie doprowadzą do lepszego zrozumienia mechanistycznych skutków przedłużonego postu i funkcjonowania metabolicznego u ludzi.

Projekt badania: Badanie na czczo to jednoramienne badanie interwencyjne u zdrowych mężczyzn i kobiet. Badacze zbadają wpływ stanu po posiłku, który następuje 2 godziny po ostatnim spożyciu posiłku, w porównaniu z przedłużonym stanem na czczo, który następuje 26 godzin po ostatnim spożyciu posiłku. Biopsje tkanki tłuszczowej i próbki krwi będą pobierane 2 godziny po ostatnim posiłku i 26 godzin po ostatnim posiłku. 24 godziny między punktami poboru próbek są wybierane tak, aby zapobiec wpływowi rytmu okołodobowego.

Badana populacja: Badana populacja będzie składać się z 24, 40-70-letnich mężczyzn i kobiet o BMI 22-30 kg/m2, wybranych z okolic Wageningen za pośrednictwem listy mailingowej dla potencjalnych tematów badań działu Human Odżywianie i zdrowie Uniwersytetu Wageningen. W razie potrzeby dodatkowa rekrutacja osób do badań odbywać się będzie poprzez ulotki i plakaty lub ogłoszenia w prasie lokalnej.

Interwencja: Wszyscy badani rozpoczną od spożycia wystandaryzowanego posiłku (ad libitum). Bezpośrednio po tym rozpoczyna się interwencja, czyli dwudziestosześciogodzinny okres postu, podczas którego badanym nie wolno nic jeść ani pić poza wodą, którą badani mogą spożywać ad libitum. Badacze pobiorą pierwsze próbki krwi i biopsje tkanki tłuszczowej dwie godziny po spożyciu wystandaryzowanego posiłku. Jest to stan po posiłku: moment, w którym organizm jest fizjologicznie odżywiony, w oparciu o średni czas spadku wolnych kwasów tłuszczowych w osoczu. Dwadzieścia cztery godziny po „stanie po posiłku” badani znajdują się na przedłużonej głodówce, a badacze pobiorą ostateczne próbki krwi i biopsje tkanki tłuszczowej. Wybrano dwudziestoczterogodzinny okres między punktami pobierania próbek, aby zapobiec wpływowi zmian związanych z rytmem dobowym na nasze pomiary wyników.