Cytotoksyczne limfocyty T w profilaktyce wirusa cytomegalii po allogenicznym przeszczepie komórek macierzystych (VICTA)

Jeśli pacjent i jego dawca kwalifikują się, pobierzemy od dawcy 100-120 ml (20-24 łyżeczek do herbaty) krwi na 3-4 tygodnie przed przeszczepem. Pobierzemy tylko tyle krwi, ile jest bezpieczne dla pacjenta i jego dawcy.

Użyjemy tej krwi do wyhodowania limfocytów T. Najpierw zainfekujemy jednojądrzaste komórki krwi obwodowej specjalnie wyprodukowanym ludzkim wirusem adenowirusowym, który przenosi część genu CMV do monocytów, co będzie stymulować limfocyty T. Ta stymulacja nauczy limfocyty T zabijania komórek z pp65 z wirusa CMV na ich powierzchni. Jeśli to podejście okaże się niewystarczające do stymulacji limfocytów T, które zabiją pp65 z wirusa CMV, wtedy wyhodujemy specjalny rodzaj komórek zwanych komórkami dendrytycznymi, które będą stymulować limfocyty T i umieścimy specjalnie wyprodukowanego ludzkiego wirusa (adenowirusa), który przenosi części genu CMV (nazywanego pp65) do komórek dendrytycznych. Te komórki dendrytyczne zostaną następnie poddane działaniu promieniowania, aby nie mogły rosnąć. Zostaną one następnie wykorzystane do stymulacji limfocytów T. Ta stymulacja nauczy limfocyty T zabijania komórek z pp65 z wirusa CMV na ich powierzchni.

Następnie będziemy hodować te CTL specyficzne dla CMV przez większą stymulację komórkami zakażonymi EBV (które zrobimy z krwi dawcy poprzez zakażenie ich EBV w laboratorium). Umieścimy również adenowirusa, który przenosi gen CMV pp65, do tych komórek zakażonych EBV, tak aby one również miały CMVpp65. Te zakażone EBV komórki zostaną poddane działaniu promieniowania, aby nie mogły rosnąć. Po uzyskaniu wystarczającej liczby komórek T przetestujemy je, aby upewnić się, że zabijają komórki z CMVpp65 na ich powierzchni. Aby upewnić się, że te komórki nie zaatakują tkanek pacjentów, testujemy je na limfoblastach, które hodujemy w laboratorium. Zostaną one użyte do sprawdzenia, czy CMV CTL może je zaatakować. Alternatywnie, moglibyśmy pobrać od pacjenta mały kawałek skóry, aby wyhodować komórki skóry, które można również wykorzystać do sprawdzenia, czy CMV CTL może je zaatakować. Biopsja skóry może być wykonana w tym samym czasie co inna procedura, taka jak szpik kostny.

Komórki CMV CTL dawcy zostaną rozmrożone i wstrzyknięte do linii dożylnej pacjenta przez okres 10 minut po otrzymaniu przez pacjenta Benadrylu i Tylenolu. Pacjent otrzyma dawkę komórek CMV CTL w 30. dniu po przeszczepie lub później, jeśli wyrazi na to zgodę i będzie się czuł wystarczająco dobrze. Podczas tego badania nie będziemy podawać leków przeciwwirusowych, ale będziemy monitorować poziomy CMV co tydzień przez co najmniej 30 dni po przeszczepie. Jeśli po początkowej dawce komórek CMV CTL u pacjenta rozwinie się infekcja wirusowa, wówczas może kwalifikować się do otrzymania jednego dodatkowego wstrzyknięcia CTL w tej samej dawce co w pierwszym wstrzyknięciu. Jeśli poziom CMV we krwi będzie nadal wzrastał po podaniu dawki limfocytów T, pacjent otrzyma leczenie gancyklowirem, foskarnetem lub cydofuwirem.

Po wstrzyknięciu pacjent będzie nadal obserwowany w klinice BMT. Będą przyjmowani w klinice, w szpitalu lub kontaktowani przez pielęgniarkę badawczą i będą poddawani badaniom krwi (w celu monitorowania morfologii krwi, czynności nerek i wątroby oraz monitorowania obecności wirusów) co tydzień przez pierwsze 60 dni po infuzji CTL, następnie w wieku 3, 6, 9 i 12 miesięcy. Aby dowiedzieć się więcej o działaniu limfocytów T w organizmie, należy pobrać dodatkowo 20-40 ml (4-8 łyżeczek) krwi przed infuzją, a następnie 24 godziny po infuzji (opcjonalnie w zależności od preferencji pacjenta) , a następnie 1, 2, 4 i 6 tygodni po infuzji. Następnie krew będzie pobierana co 3 miesiące przez 1 rok. Ilość krwi pobranej w ciągu pierwszych 12 miesięcy wyniesie 260-460 ml (1-2 filiżanki). Całkowity czas uczestnictwa w tym badaniu wyniesie 1 rok.