Ocena holotranskobalaminy jako wskaźnika wchłaniania witaminy B12

Część I Badanie przesiewowe: Osoby, które spełniają wstępne kryteria przesiewowe, zostaną zaplanowane na pobranie próbek krwi na czczo w Ogólnym Centrum Badań Klinicznych (GCRC). Wszyscy uczestnicy podpiszą formularze świadomej zgody zatwierdzone przez Instytucjonalną Komisję Rewizyjną UF przed rozpoczęciem tej części badania. Zostaną zmierzone wzrosty i wagi badanych, a osoby zostaną poproszone o wypełnienie kwestionariusza historii medycznej. Analizy krwi będą obejmować witaminę B12 w surowicy, chemię krwi i wskaźniki hematologiczne. Kobiety otrzymają test ciążowy. Osoby kwalifikujące się do części II badania (interwencja) będą miały stężenie witaminy B12 w surowicy ≥444 pmol/l; nie będzie anemiczny; i będzie miał normalne ogólne wyniki biochemiczne krwi (wszystkie wartości w zakresie normalnym lub zbliżonym do niego) oraz brak historii chorób przewlekłych (np. niedokrwistość złośliwa, rak, cukrzyca, choroba nerek, nadciśnienie, nieprawidłowości neurologiczne, zaburzenia żołądkowo-jelitowe). Każdy pacjent z niedoborem (<148 pmol/l) stężenia witaminy B12 w surowicy [18] nie będzie kwalifikował się do udziału i zostanie poinstruowany, aby zgłosić się do osobistego lekarza w celu pełnej obserwacji i leczenia.

Część II Interwencja: Ocenione zostaną zmiany wskaźników oceny statusu witaminy B12 w odpowiedzi na suplementację witaminy B12.

Badani przyjdą do GCRC w noc poprzedzającą (Dzień 1) protokół interwencji. Następnego ranka (Dzień 1) po całonocnym poście zostanie wprowadzony założony na stałe cewnik, z którego będą pobierane powtarzane próbki krwi przez cały Dzień 1. Zostanie pobrana wyjściowa próbka krwi na czczo (nr 1). Następnie badani zjedzą lekkie śniadanie (zawierające 1 kawałek chleba i 8 uncji soku pomarańczowego) i przyjmą dawkę 9 ug witaminy B12 (dawka 1). 30 minut po zakończeniu posiłku i spożyciu suplementu witaminy B12 zostanie pobrana druga próbka krwi (nr 2). Co godzinę zostanie pobranych pięć kolejnych próbek krwi (nr 3-7). Po siódmej próbce krwi badani spożyją jeden kawałek chleba i 8 uncji soku pomarańczowego i przyjmą drugą dawkę 9 μg witaminy B12 (dawka 2) i pobiorą próbkę krwi (nr 8) 30 minut po spożyciu posiłku i dawkę B12. Co godzinę zostanie pobranych pięć kolejnych próbek krwi (nr 9-13). Następnie badani spożyją jeden kawałek chleba i 8 uncji soku pomarańczowego i przyjmą dawkę 9 μg witaminy B12 (dawka 3). Kolejna próbka krwi (nr 14) zostanie pobrana 30 minut po posiłku i dawce witaminy B12. Godzinę później zostanie pobrana ostateczna (Dzień 1) próbka krwi (nr 15), a następnie usunie się cewnik. Oprócz chleba i soku spożywanego z każdym suplementem witaminy B12, badani otrzymają przedpołudniową przekąskę 2 godziny po przyjęciu 1. dawki suplementu B12, obiad 3,5 godziny po przyjęciu 1. dawki suplementu B12, kolację 4 godziny po przyjęciu 2. dawki suplement witaminy B12 i wieczorna przekąska 3 godziny po dawce 3. Pokarmy o niskiej zawartości witaminy B12 będą dostarczane w GCRC. Woda i napoje bezkofeinowe i bezkaloryczne będą dozwolone ad libitum.

Pacjenci pozostaną w GCRC przez noc, a rano drugiego dnia zostanie pobrana próbka krwi na czczo (nr 16). W drugim dniu uczestnicy otrzymają śniadanie po pobraniu krwi, po czym będą mogli opuścić GCRC . Pacjenci otrzymają posiłki i przekąski na wynos (obiad, kolacja, przekąski) składające się z żywności o niskiej zawartości witaminy B12.

Pacjenci zostaną poinstruowani, aby wrócili rano dnia 3, kiedy to zostaną pobrani jedna próbka krwi na czczo (nr 17) i otrzymają śniadanie przed opuszczeniem GCRC. Wszystkie posty nocne będą obowiązywać od godziny 22:00 poprzedniej nocy. Następujące wskaźniki B12 będą mierzone przy każdym pobraniu krwi (a) holo-TC; (b) całkowity TC; (c) holo-HC i całkowity HC; (d) surowica B12; oraz (e) albumina osocza. Dodatkowe wskaźniki stanu B12 (np. homocysteina, kwas metylomalonowy, RBC B12) będą mierzone w wybranych odstępach czasu podczas pobierania krwi. Zostanie przeprowadzona wyjściowa analiza kwasu foliowego.