Terapia transferu genów w leczeniu dzieci i dorosłych z dystrofią mięśniową obręczy kończyny typu 2D (LGMD2D)

Podstawowym celem tego badania jest ocena bezpieczeństwa podawania domięśniowego osobnikom z niedoborem alfa-sarkoglikanu rekombinowanego wirusa związanego z adenowirusem serotypu 1 (rAAV1)-ludzkiego genu alfa-sarkoglikanu (hαSG) pod kontrolą kinazy kreatynowej mięśni szkieletowych promotor. Celem drugorzędnym jest określenie dawki rAAV1.tMCK.hαSG wektor wymagany do osiągnięcia wykrywalnego poziomu alfa-sarkoglikanu w mięśniach osobników z tym zaburzeniem.

Zrekombinowany wektor wirusowy skonstruowany z AAV1 został zmieniony tak, aby przenosił ludzki gen alfa-sarkoglikanu wyrażany z promotora tMCK. Wykazano, że konstrukt inicjuje produkcję funkcjonalnego białka alfa-sarkoglikanu u zwierząt laboratoryjnych. Ten konstrukt może odwrócić fenotyp dystroficzny u myszy z nokautem alfa-sarkoglikanu, laboratoryjnego modelu zwierzęcego dla zaburzenia klinicznego. Domięśniowe wstrzyknięcie rAAV1 przywraca normalną histologię mięśni i zwiększa siłę mięśni do poziomów przekraczających kontrolne myszy z nokautem, ale nie w takim samym stopniu jak myszy typu dzikiego.

Proponowane badanie kliniczne na ludziach to faza I, randomizowany protokół z podwójnie ślepą próbą z wstrzyknięciem rAAV1.tMCK.hαSG wektor genów do mięśnia. Dwie kohorty osób z LGMD2D (niedobór alfa-sarkoglikanu), każda z potwierdzonymi mutacjami, zostaną poddane transferowi genów. Do każdej grupy zostaną włączone co najmniej trzy przedmioty. Pierwsza kohorta otrzyma w sumie 1,5 ml badanego środka w dwóch do sześciu oddzielnych wstrzyknięciach do wybranego mięśnia (prostownika krótkiego palca) lub innego mięśnia, jeśli jest to bardziej odpowiednie ze względu na indywidualnego pacjenta) w dawce 3,25 X 10 do 11 vg w 1,5 ml. Anatomiczny punkt linii środkowej mięśnia zostanie zidentyfikowany na skórze i zostanie rozprowadzonych od 2 do 6 wstrzyknięć wektorowych w kierunku X. Druga kohorta otrzyma taką samą dawkę dostarczoną do mięśnia zgodnie z tym samym paradygmatem. W każdej kohorcie tylko jedna kończyna otrzyma wektor z transgenem, podczas gdy przeciwna kończyna otrzyma wstrzyknięcie placebo. W dniu infuzji wektora, 4 godziny przed transferem genu, pacjenci otrzymają dożylnie metyloprednizolon w dawce 2,0 mg/kg (łącznie nie więcej niż 1 g), powtarzając dawki przez dwa kolejne poranki. Metylprednizolon jest podawany specjalnie w celu zmniejszenia natychmiastowego stanu zapalnego po wstrzyknięciu igły, o którym wiadomo, że wywołuje reakcję zapalną i może przyczynić się do przeniesienia komórek prezentujących antygen do miejsca podania wektora. Wcześniej wykazaliśmy, że to leczenie zwiększa ekspresję genów co najmniej 2-krotnie (zawarte jako część BB-IND-12936 do transferu genów minidystrofiny).

Punkty końcowe bezpieczeństwa, które należy ocenić, obejmują reakcję zapalną na wektor, ocenianą za pomocą biopsji mięśnia, oraz zmiany w hematologii, chemii surowicy, analizie moczu, odpowiedzi immunologicznej na rAAV1 i alfa-sarkoglikan oraz zgłoszoną historię i obserwacje objawów. Pacjent będzie miał 10 do 12 wizyt kontrolnych przez następne 2 lata po pierwszym wlewie.