Terapia de transferência de genes para o tratamento de crianças e adultos com distrofia muscular de cinturas tipo 2D (LGMD2D)

O objetivo principal deste estudo é a avaliação da segurança da administração intramuscular a indivíduos com deficiência de alfa-sarcoglicano do sorotipo 1 do vírus adeno-associado recombinante (rAAV1)-vetor do gene alfa-sarcoglicano humano (hαSG) sob controle de uma creatina quinase do músculo esquelético promotor. O objetivo secundário é determinar a dose de rAAV1.tMCK.hαSG vetor necessário para atingir um nível detectável de alfa-sarcoglicano no músculo de indivíduos com esse distúrbio.

Um vetor de vírus recombinante construído a partir de AAV1 foi alterado para transportar o gene humano alfa-sarcoglicano expresso a partir de um promotor tMCK. Foi demonstrado que a construção inicia a produção de uma proteína alfa-sarcoglicana funcional em animais de laboratório. Esta construção pode reverter o fenótipo distrófico no camundongo knockout alfa-sarcoglicano, um modelo animal de laboratório para o distúrbio clínico. A injeção intramuscular de rAAV1 restaura a histologia muscular ao normal e aumenta a força muscular a níveis que excedem os camundongos nocauteados de controle, mas não no mesmo grau que os camundongos de tipo selvagem.

O ensaio clínico humano proposto é um protocolo randomizado duplo-cego de fase I com injeção de rAAV1.tMCK.hαSG vetor de gene no músculo. Duas coortes de indivíduos com LGMD2D (deficiência de alfa-sarcoglicano), cada uma com mutações comprovadas, serão submetidas à transferência de genes. Um mínimo de três indivíduos serão inscritos em cada coorte. A primeira coorte receberá um volume total de 1,5 ml de agente de estudo em duas a seis injeções separadas no músculo selecionado (extensor curto dos dedos) ou outro músculo se for mais apropriado considerando o paciente individual) com uma dose de 3,25 X 10 para o 11 vg em 1,5 ml. O ponto anatômico da linha média do músculo será identificado na pele e 2 a 6 injeções vetoriais serão distribuídas na direção de um X. A segunda coorte receberá a mesma dose entregue ao músculo de acordo com o mesmo paradigma. Em cada coorte, apenas uma extremidade receberá vetor com transgene, enquanto a extremidade oposta receberá placebo. No dia da infusão do vetor, 4 horas antes da transferência do gene, os pacientes receberão 2,0 mg/kg de metilprednisolona intravenosa (não exceder 1 g no total), com doses repetidas em duas manhãs consecutivas. A metilprednisolona é administrada especificamente para diminuir a inflamação imediata da injeção da agulha, que é conhecida por desencadear uma reação inflamatória e pode contribuir para trazer as células apresentadoras de antígeno para o local de entrega do vetor. Nós demonstramos anteriormente que este tratamento aumenta a expressão do gene em pelo menos 2 vezes (incluído como parte do BB-IND-12936 para transferência do gene da minidistrofina).

Os pontos finais de segurança a serem avaliados incluem reação inflamatória ao vetor, avaliada por biópsia muscular e alterações na hematologia, química sérica, exame de urina, respostas imunológicas ao rAAV1 e alfa-sarcoglicano e histórico relatado e observações de sintomas. O paciente terá 10 a 12 consultas de acompanhamento nos próximos 2 anos após a infusão inicial.