Określenie patofizjologicznych zmian kolagenu w cukrzycowym ścięgnie Achillesa

Cukrzyca jest problemem pandemicznym o katastrofalnych skutkach dla życia fizycznego, psychicznego i ekonomicznego pacjentów i ich rodzin, a także stanowi znaczne obciążenie dla systemu opieki zdrowotnej. Zmiany w układzie powłokowym prowadzą do powstania owrzodzeń podeszwowych stopy, które zwiększają ryzyko amputacji kończyn i zgonu. Konkretnie, ograniczenie zgięcia grzbietowego stawu skokowego (zniekształcenie końskie) zostało uznane za główną siłę deformującą w rozwoju i przewlekłości owrzodzeń podeszwowych stopy w populacji chorych na cukrzycę. Lepsze mechanistyczne zrozumienie wewnętrznych zmian w cukrzycowym ścięgnie Achillesa pomogłoby wyjaśnić i potencjalnie zapobiec rozwojowi przewlekłych owrzodzeń stopy spowodowanych deformacją końską.

W tym badaniu zostanie oceniony związek między postępem utraty kończyny a zmianami obserwowanymi w markerach metabolizmu kolagenu w cukrzycowym ścięgnie Achillesa. Zostanie to ocenione poprzez pobranie próbek ścięgna Achillesa od osób, które są na różnych etapach rozwoju owrzodzenia lub utraty kończyny, a także wykazują deformację końską. Wszystkie próbki ścięgna Achillesa zostaną pobrane w czasie zabiegu wydłużania Achillesa. Będzie pięć grup pacjentów składających się z pacjentów, u których zidentyfikowano: 1) przedwrzodową zmianę podeszwową stopy 2) owrzodzenie podeszwy bez amputacji w wywiadzie lub wymagające amputacji 3) owrzodzenie podeszwy, u których zostanie wykonana amputacja palca 4) owrzodzenie podeszwy, które będzie poddawany amputacji przezśródstopnej lub 5) owrzodzenia podeszwy, który będzie poddawany amputacji Choparta lub bardziej bliższej. Ponadto zmiany ogólnoustrojowe (waskulopatia, neuropatia obwodowa, nefropatia) będą również skorelowane z powyższym. Zmiennymi niezależnymi są: 1) markery metaboliczne kolagenu i 2) zmiany ogólnoustrojowe. Zmienną zależną jest progresja utraty kończyny oceniana kategorycznie (5 grup).

5 etapów tego badania obejmuje:

• Faza 1 - Ocena kwalifikowalności. Pacjenci z cukrzycą typu I i typu II, którzy zgłoszą się do Centrum Ratowania Kończyn Szpitala Uniwersyteckiego Georgetown, zostaną poddani ocenie pod kątem włączenia do naszego badania na podstawie kryteriów włączenia/wyłączenia.
• Faza 2 – Rozmowa kwalifikacyjna i badanie. Pacjenci przejdą kompleksową historię medyczną, badanie fizykalne i badanie krwi (zgodnie ze Standardem opieki. PI lub SI przeprowadzą badanie zakresu ruchu stawu skokowego oraz badanie żyłki pojedynczej Semmesa-Weinsteina 5.07 (zgodnie ze Standardem opieki. Zostanie zamówiony kompleksowy panel metaboliczny, w tym hemoglobina A1C, BUN i CR (zgodnie ze standardem opieki). Następnie pacjenci zostaną skierowani na oddział chirurgii naczyniowej w celu przeprowadzenia nieinwazyjnych i/lub inwazyjnych badań naczyniowych (zgodnie ze standardami opieki) i wówczas zostanie zaplanowana operacja.
• Faza 3 – Chirurgia i pobieranie tkanek. Przeprowadzony zostanie zabieg chirurgiczny, który może obejmować oczyszczenie owrzodzenia, rekonstrukcję tkanki miękkiej lub kości lub amputację (zgodnie z SOC- tylko pacjenci, u których zidentyfikowano deformację końską i zgodzili się na procedurę wydłużania ścięgna Achillesa wraz z oczyszczeniem owrzodzenia lub tkanek miękkich lub rekonstrukcja kości lub amputacja zostaną uwzględnione w tym badaniu. Wydłużenie ścięgna Achillesa jest traktowane jako zabieg wspomagający SOC w chirurgicznym leczeniu stopy cukrzycowej). Wszyscy badani będą mieli zabieg wydłużania ścięgna Achillesa wykonywany przez głównego (PK) lub badaczy pomocniczych (JS i CA). W tym czasie zostanie pobrana próbka tkanki (20 mg) ścięgna Achillesa. Ta tkanka zostanie zakonserwowana w pojemniku z suchym lodem i wysłana do Midwestern University w celu przetworzenia przez badacza pomocniczego (CC). Okazy będą oznaczane numerycznie z góry ustalonym numerem podmiotu. Na tych próbkach nie będą znajdować się żadne informacje identyfikujące pacjenta.
• Faza 4 — Przetwarzanie tkanek i danych. Na próbkach tkanek zostaną przeprowadzone testy w celu zmierzenia specyficznych markerów metabolicznych cukrzycowego ścięgna Achillesa. Stężenia kolagenu w ścięgnach zostaną określone poprzez oznaczenie ilościowe specyficznego dla kolagenu aminokwasu, hydroksyproliny, za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) i detekcji fluorometrycznej. Stopień usieciowania kolagenu zostanie określony przez pomiar ilości usieciowanej pirydyniowej hydroksylizylopirydynoliny zostanie również oceniony za pomocą HPLC. Przeprowadzony zostanie również RT-PCR w celu określenia ekspresji różnych MMP i TIMP. Markery krwi będą przetwarzane w szpitalu uniwersyteckim Georgetown. Klinika Chirurgii Naczyniowej Uniwersytetu Georgetown przeprowadzi badania nieinwazyjne i inwazyjne, a wyniki ich ustaleń zostaną przekazane badaczom.
• Faza 5 — analiza danych. Wyniki badania fizykalnego, badań laboratoryjnych, badań naczyniowych i testów tkankowych zostaną zebrane i ocenione.