Determinação das alterações fisiopatológicas do colágeno no tendão de Aquiles diabético

O diabetes é um problema pandêmico com efeitos catastróficos na vida física, psicológica e econômica dos pacientes e suas famílias, além de representar um fardo significativo para o sistema de saúde. Alterações no sistema tegumentar levam a ulcerações plantares nos pés, que aumentam o risco de amputações de membros e morte. Especificamente, a limitação da dorsiflexão da articulação do tornozelo (deformidade em equino) tem sido implicada como uma importante força deformante no desenvolvimento e cronicidade das ulcerações plantares do pé na população diabética. Uma melhor compreensão mecanicista das alterações intrínsecas no tendão de Aquiles diabético ajudaria a explicar e potencialmente prevenir o desenvolvimento de ulcerações crônicas do pé devido a uma deformidade em equino.

Este estudo avaliará a relação entre a progressão da perda do membro e as alterações observadas nos marcadores metabólicos de colágeno no tendão de Aquiles diabético. Isso será avaliado pela coleta de amostras do tendão de Aquiles em indivíduos que estão em vários estágios de desenvolvimento de úlcera ou perda de membro e que também demonstram uma deformidade em equino. Todas as amostras do tendão de Aquiles serão coletadas no momento do procedimento de alongamento de Aquiles. Haverá cinco grupos de sujeitos compostos por sujeitos que foram identificados com: 1) lesão pré-ulcerativa do pé plantar 2) ulceração plantar sem história de amputação ou necessitar de amputação 3) ulceração plantar que será submetida a amputação digital 4) ulceração plantar que será submetido a uma amputação transmetatarsal ou 5) ulceração plantar que será submetido a amputação de Chopart ou mais proximal. Além disso, alterações sistêmicas (vasculopatia, neuropatia periférica, nefropatia) também serão correlacionadas com as anteriores. As variáveis ​​independentes são: 1) marcadores metabólicos de colágeno e 2) alterações sistêmicas. A variável dependente é a progressão da perda do membro avaliada categoricamente (5 grupos).

As 5 fases deste estudo incluem:

• Fase 1- Avaliação de Elegibilidade. Os pacientes diabéticos tipo I e tipo II que se apresentarem no Georgetown University Hospital Limb Salvage Center serão avaliados para inclusão em nosso estudo com base nos critérios de inclusão/exclusão.
• Fase 2- Entrevista e exame. Os participantes completarão um histórico médico abrangente, exame físico e exames de sangue (de acordo com o Padrão de Cuidados. O PI ou SI realizará um exame de amplitude de movimento da articulação do tornozelo e um exame de monofilamento Semmes-Weinstein 5.07 (de acordo com o Padrão de Cuidados. Um painel metabólico abrangente será solicitado, incluindo hemoglobina A1C, BUN e CR (por padrão de atendimento). Os pacientes serão então encaminhados ao departamento de cirurgia vascular para estudos vasculares não invasivos e/ou invasivos (de acordo com o padrão de atendimento) e o paciente será agendado para cirurgia neste momento.
• Fase 3- Cirurgia e Coleta de Tecidos. A cirurgia será realizada, podendo incluir desbridamento da úlcera, reconstrução de tecido mole ou osso ou amputação (de acordo com SOC - apenas pacientes que foram identificados como demonstrando uma deformidade em equino e concordam com um procedimento de alongamento do tendão de Aquiles junto com desbridamento da úlcera, ou tecido mole ou reconstrução óssea ou amputação serão incluídas neste estudo. O alongamento do tendão de Aquiles é considerado um procedimento SOC adjuvante no manejo cirúrgico do pé diabético). Todos os indivíduos terão um procedimento de alongamento do tendão de Aquiles realizado pelo primário (PK) ou sub-investigadores (JS e CA). Uma amostra de tecido (20mg) do tendão de Aquiles será coletada neste momento. Este tecido será preservado em um recipiente de gelo seco e enviado para a Midwestern University para processamento pelo sub-investigador (CC). Os espécimes serão rotulados numericamente com um número de assunto predeterminado. Nenhuma informação de identificação do paciente estará nessas amostras.
• Fase 4- Processamento de Tecidos e Dados. Ensaios serão realizados nas amostras de tecido para medir marcadores metabólicos específicos do tendão de Aquiles diabético. As concentrações de colágeno no tendão serão determinadas pela quantificação do aminoácido específico do colágeno, hidroxiprolina, por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e detecção fluorométrica. A extensão da reticulação de colágeno será determinada medindo a quantidade de hidroxilisilpiridinolina reticulada de piridínio também será avaliada por meio de HPLC. RT-PCR também será realizado para determinar a expressão de várias MMPs e TIMPs. Os marcadores sanguíneos serão processados ​​no Georgetown University Hospital. O Departamento de Cirurgia Vascular da Universidade de Georgetown realizará os estudos não invasivos e invasivos e os resultados de suas descobertas serão relatados aos investigadores.
• Fase 5-Análise de Dados. Os resultados do exame físico, estudos laboratoriais, estudos vasculares e ensaios de tecidos serão coletados e avaliados.