Leczenie szczepionką HBIG+GM-CSF+HBV u pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu B z serokonwersją HBeAg

Odporność gospodarza została ogólnie uznana za główny czynnik decydujący o wyniku zakażenia wirusem przewlekłego zapalenia wątroby typu B (HBV). Wcześniejsze badania wykazały, że funkcje limfocytów T i B specyficznych dla HBV są wyczerpane u pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu B (CHB). Co ciekawe, te upośledzone funkcje limfocytów T i B można częściowo przywrócić za pomocą leczenia przeciwwirusowego, ale wydaje się, że powrót do zdrowia nie został zakończony, nawet w przypadku długotrwałej supresji HBV i serokonwersji HBeAg. Ostatnio pojawiło się kilka dowodów wskazujących, że odpowiedzi immunologiczne specyficzne dla HBV można prawie odzyskać po serokonwersji antygenu powierzchniowego wirusa zapalenia wątroby typu B (HBsAg). Zjawisko to sugeruje, że HBsAg może odgrywać kluczową rolę w tolerancji immunologicznej lub wyczerpaniu immunologicznym. Rzeczywiście, nasze ostatnie badania wykazały, że pacjenci z serokonwersją HBsAg wykazują odpowiedzi komórek T i B specyficzne dla HBV. Zatem ilość HBsAg może służyć jako możliwy mechanizm unikania odpowiedzi immunologicznej gospodarza, podczas gdy przeciwciała anty-HBs i odpowiedzi limfocytów T specyficzne dla HBV zapewniają odporność ochronną.

HBsAg było odkryciem nagrodzonym Nagrodą Nobla, które zidentyfikowało HBV około 40 lat temu; do dziś HBsAg pozostaje cechą charakterystyczną jawnego zakażenia HBV. Synteza HBsAg podczas cyklu życiowego wirusa HBV jest złożona i zazwyczaj zachodzi w retikulum endoplazmatycznym. Otwarta ramka odczytu otoczki (ORF) zawiera domeny pre-powierzchnia 1 (preS1), pre-powierzchnia 2 (preS2) i ORF-S, a białka otoczki są generowane z dwóch transkryptów informacyjnego kwasu rybonukleinowego (mRNA) HBV, z następczą translacją w małych (ORF-S), średnich (pres2 + ORF-S) i dużych białkach otoczki powierzchniowej (preS1 + preS2 + ORF-S). Są one również znane jako odpowiednio duże (L), średnie (M) i małe (S) białka powierzchniowe. Jednak produkcja HBsAg znacznie przekracza tę wymaganą do składania wirionów, a nadmiar białek otoczki powierzchniowej jest wydzielany jako niezakaźne włókniste lub kuliste cząstki subwirusowe, które przekraczają wiriony o zmienny współczynnik 102-105 i mogą gromadzić się do stężeń kilkuset mikrogramów na mililitr surowicy. Dane te sugerują, że sAg pochodzi głównie z cząstek subwirusowych, a spadek HBsAg w surowicy oznacza redukcję transkrypcji kowalencyjnie zamkniętego kolistego DNA (cccDNA) i translacji mRNA, ale nie replikacji HBV. Ostatnio kilka badań sugeruje nową potencjalną rolę ilościowego oznaczenia HBsAg w surowicy w przewidywaniu odpowiedzi wirusologicznej na terapię przeciwwirusową, przynajmniej u pacjentów leczonych pegylowanym interferonem (Peg-IFN). W naturalnym przebiegu przewlekłego zakażenia HBV poziomy HBsAg różnią się istotnie podczas 4 faz zakażenia HBV i stopniowo zmniejszają się od tolerancji immunologicznej (IT) (5 log IU/ml) do niskiej replikacji (LC) (3 log IU/ml), podczas gdy Stosunki HBsAg/HBV-DNA są istotnie wyższe w LC w porównaniu do wszystkich pozostałych pacjentów. Dane te sugerują, że ilościowe oznaczanie HBsAg może być obiecującym markerem prognostycznym podczas naturalnej historii zakażenia HBV oraz podczas terapii przeciwwirusowej. Zatem utrata HBsAg i rozwój przeciwciał anty-HBs (serokonwersja HBsAg) jest ostatecznym celem terapii anty-HBV.

Pacjenci z przewlekłym zapaleniem wątroby typu B uzyskaliby zahamowanie replikacji DNA HBV, normalizację transaminazy glutaminowo-pirogronowej (ALT) i serokonwersję antygenu wirusa zapalenia wątroby typu B e (HBeAg) po leczeniu terapią przeciwwirusową. Ponadto podczas tego procesu poprawiłaby się odporność przeciwwirusowa. Jednak tym pacjentom trudno jest usunąć HBsAg i dotrzeć do terminala idei. Głównymi przyczynami są obecność HBsAg i upośledzona odporność swoista dla HBV. Z tego powodu immunoterapia byłaby pomocna w wzmocnieniu odporności anty-HBV i uzyskaniu wyższego współczynnika serokonwersji HBsAg. Celem tego badania jest zbadanie, czy iw jaki sposób immunoterapia tj. Szczepionka HBIG+GM-CSF+HBV poprawia szybkość serokonwersji HBsAg. To badanie skupi się również na tolerancji i bezpieczeństwie tego leczenia u pacjentów z CHB.

Uczestnicy tego badania zostaną losowo przydzieleni do jednej z dwóch grup terapeutycznych:

Ramię A: Uczestnicy otrzymają przez 48 tygodni leczenie analogami nukleozydów (NA) w połączeniu z 24-tygodniowym leczeniem immunoglobiną przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B (HBIG) + czynnikiem stymulującym tworzenie kolonii granulocytów i makrofagów (GM-CSF) + szczepionką HBV.

Ramię B: Uczestnicy otrzymają 48-tygodniowe leczenie NA połączone z 24-tygodniowym leczeniem placebo z solą fizjologiczną.

Wszyscy pacjenci będą nieprzerwanie leczeni NA przez 48 tygodni w połączeniu ze szczepionką HBIg+GM-CSF+HBV lub placebo z solą fizjologiczną przez pierwsze 24 tygodnie, a następnie przez kolejne 24 tygodnie. W okresie leczenia (24 tygodnie) leczenie szczepionką HBIg+GM-CSF+HBV zostanie podane cztery razy w tygodniu 0, 4, 12 i 24. W każdym momencie leczenia pacjenci będą hospitalizowani i leczeni 800 jednostkami HBIG domięśniowo w dniach 0, 1, 2, 3 i 4 oraz leczeni 75 μg GM-CSF podskórnie w dniach 2, 3, 4, 5 i 6, a na koniec wstrzyknięto podskórnie 20 μg szczepionki HBV w dniu 6. Podejście to pozwala, aby początkowe wstrzyknięcie HBIG prawdopodobnie zmniejszyło HBsAg, następnie komórki prezentujące antygen są aktywowane przez traktowanie GM-CSF, a na koniec szczepionka HBV jest stosowana do przygotowania APC do wywołania odpowiedzi immunologicznych swoistych dla HBV. W grupie kontrolnej pacjenci otrzymywali za każdym razem GM-CSF jako kontrolę. Po rozpoczęciu leczenia uczestnicy zostaną poproszeni o przybycie do kliniki w 4, 12, 24, 36 i 48 tygodniu. Podczas każdej wizyty uczestnicy otrzymają wystarczającą ilość badanego leku do czasu następnej wizyty. Każda wizyta potrwa od 2 do 3 godzin. Podczas większości wizyt uczestnicy przechodzą badanie fizykalne, odpowiadają na pytania dotyczące przyjmowanych leków i samopoczucia oraz mają pobieraną krew w celu oceny bezpieczeństwa i skuteczności oraz kwantyzacji HBsAg. Część dodatkowej krwi będzie również przechowywana na potrzeby odpowiedzi limfocytów T i B swoistych dla HBV. Podczas niektórych wizyt uczestnicy będą zadawać pytania dotyczące przyjmowanych leków i historii medycznej, mieć rozszerzone źrenice, mieć badanie słuchu i elektrokardiogram (EKG). Niektóre wizyty będą wymagały od uczestników przybycia na czczo. Testy ciążowe mogą być również przeprowadzane w celu uniknięcia niektórych uczestniczek, które mogą zajść w ciążę lub jeśli istnieje podejrzenie ciąży.