Pomiar aktywności nerwów w biopsjach jelita cienkiego człowieka w IBS (zespół jelita drażliwego)

Zostaną pobrane biopsje odbytnicy od pacjentów z IBS lub osób zdrowych.

Biopsje będą wykorzystywane do:

1. izolację splotu podśluzówkowego w celu wykonania: 1.1 rejestracji żywych nerwów i obrazowania wapnia; 1.2 immunohistochemia; 1.3 izolacja mRNA (kwasy rybonukleinowe posłańców) i PCR w czasie rzeczywistym (reakcja łańcuchowa polimerazy);
2. hodowanie biopsji

Opierając się na tych obserwacjach, ogólnym celem badania jest poczynienie znaczącego kroku naprzód w obecnej wiedzy na temat ENS (jelitowego układu nerwowego) u ludzi w IBS poprzez ustanowienie metody obrazowania na żywo w celu rejestrowania aktywności nerwów jelitowych w biopsjach jelita cienkiego z ludzie. To osiągnięcie jest wyjątkowe w swoim rodzaju, ponieważ żadne inne grupy badawcze nie zgłosiły udanych nagrań na żywo z obrazowaniem wapnia w tym preparacie.

W szczególności śledczy mają na celu:

1. opracowanie i walidacja techniki pomiaru aktywności nerwów jelitowych człowieka w splocie podśluzówkowym wyizolowanym z biopsji odbytnicy zdrowych osób i pacjentów z IBS;
2. scharakteryzowanie tej aktywności nerwów u osób zdrowych i pacjentów z IBS przy użyciu zarówno obrazowania wapnia w celu oceny wpływu różnych neuromodulatorów, immunohistochemii i rtPCR w celu określenia poziomów ekspresji receptora i identyfikacji neuronów i komórek glejowych w zwojach podśluzówkowych;
3. w celu zbadania, czy biopsje pacjentów z IBS wydzielają więcej modulatorów/cytokin w porównaniu ze zdrowymi osobnikami oraz ich potencjał do aktywacji neuronów.
4. ocena wpływu różnych składników żywności (mleka krowiego, pszenicy, drożdży, glutenu i soi) na miejscowy odczyn błony śluzowej odbytnicy oraz ocena aktywacji/degranulacji mastocytów w biopsjach chorych na IBS w porównaniu z osobami zdrowymi.
5. Ocena ilości mediatorów/metabolitów stanu zapalnego w próbkach moczu pacjentów z IBS i zdrowych ochotników za pomocą profilowania metabolicznego