Medición de la actividad nerviosa en biopsias del intestino delgado humano en el SII (síndrome del intestino irritable)

Se tomarán biopsias rectales de pacientes con SII o sujetos sanos.

Las biopsias se utilizarán para:

1. el aislamiento del plexo submucoso para realizar: 1.1 grabaciones de nervios en vivo e imágenes de calcio; 1.2 inmunohistoquímica; 1.3 aislamiento de ARNm (ácidos ribonucleicos mensajeros) y PCR en tiempo real (reacción en cadena de la polimerasa);
2. cultivo de biopsias

Sobre la base de estas observaciones, el objetivo general del estudio es avanzar significativamente en el conocimiento actual sobre el SNE (sistema nervioso entérico) humano en el SII mediante el establecimiento de un método de imagen en vivo para registrar la actividad de los nervios entéricos en biopsias de intestino delgado de humanos Este desarrollo es único en su tipo ya que ningún otro grupo de investigación ha informado grabaciones en vivo exitosas con imágenes de calcio en esta preparación.

En particular, los investigadores pretenden:

1. desarrollar y validar la técnica para medir la actividad en nervios entéricos humanos en el plexo submucoso aislado de biopsias rectales de sujetos sanos y pacientes con SII;
2. caracterizar esta actividad nerviosa en sujetos sanos y pacientes con SII utilizando imágenes de calcio para evaluar el efecto de diferentes neuromoduladores, inmunohistoquímica y rtPCR para determinar los niveles de expresión del receptor e identificar neuronas y células gliales en los ganglios submucosos;
3. investigar si las biopsias de pacientes con SII secretan más moduladores/citoquinas en comparación con sujetos sanos y su potencial para activar neuronas.
4. evaluar la influencia de diferentes constituyentes alimentarios (leche de vaca, trigo, levadura, gluten y soja) sobre la reacción local de la mucosa rectal y evaluar la activación/desgranulación de mastocitos en biopsias de pacientes con SII en comparación con sujetos sanos.
5. Evaluar la cantidad de mediadores/metabolitos inflamatorios en muestras de orina de pacientes con SII y voluntarios sanos mediante el uso de perfiles metabólicos