Misurazione dell'attività nervosa nelle biopsie dell'intestino tenue nell'IBS (sindrome dell'intestino irritabile)

Verranno prelevate biopsie rettali da pazienti con IBS o soggetti sani.

Le biopsie saranno utilizzate per:

1. l'isolamento del plesso sottomucoso per eseguire: 1.1 registrazioni nervose dal vivo e imaging del calcio; 1.2 immunoistochimica; 1.3 isolamento di mRNA (acidi ribonucleici messaggeri) e real time PCR (reazione a catena della polimerasi);
2. coltura di biopsie

Sulla base di queste osservazioni, l'obiettivo generale dello studio è quello di compiere un significativo passo avanti nelle attuali conoscenze sull'ENS (sistema nervoso enterico) umano nell'IBS stabilendo un metodo di imaging dal vivo per registrare l'attività dei nervi enterici nelle biopsie dell'intestino tenue da umani. Questo sviluppo è unico nel suo genere in quanto nessun altro gruppo di ricerca ha riportato registrazioni dal vivo di successo con l'imaging del calcio in questa preparazione.

In particolare, gli investigatori mirano a:

1. sviluppare e convalidare la tecnica per misurare l'attività nei nervi enterici umani nel plesso sottomucoso isolato da biopsie rettali da soggetti sani e pazienti con IBS;
2. caratterizzare questa attività nervosa in soggetti sani e pazienti con IBS utilizzando sia l'imaging del calcio per valutare l'effetto di diversi neuromodulatori, immunoistochimica e rtPCR per determinare i livelli di espressione del recettore e identificare i neuroni e le cellule gliali nei gangli sottomucosi;
3. indagare se le biopsie dei pazienti con IBS secernono più modulatori/citochine rispetto ai soggetti sani e il loro potenziale per attivare i neuroni.
4. valutare l'influenza di diversi costituenti alimentari (latte vaccino, frumento, lievito, glutine e soia) sulla reazione locale della mucosa rettale e valutare l'attivazione/degranulazione dei mastociti in biopsie di pazienti con IBS rispetto a soggetti sani.
5. Valutare la quantità di mediatori/metaboliti dell'infiammazione nei campioni di urina di pazienti con IBS e volontari sani mediante l'uso del profilo metabolico