Szybkość tworzenia płytki nazębnej i pasta do zębów (PFR)

Cele i cel badania Celem tego badania jest ocena skuteczności klinicznej nowego środka do czyszczenia zębów, zawierającego nanokryształy węglanu/hydroksyapatytu (BioRepair®, Kurt Wolff, Bielefeld, Niemcy), u osób cierpiących na ciężkie zapalenie dziąseł i/lub łagodną do umiarkowanej przewlekłą zapalenie przyzębia i poddanie się niechirurgicznej terapii periodontologicznej. Skuteczność kliniczna zostanie oceniona pod kątem parametrów klinicznych i mikrobiologicznych oraz porównana z użyciem środka do czyszczenia zębów zawierającego fluorek cynku (Meridol®, GABA, Lörrach, Niemcy) służącego jako kontrola pozytywna.

Pytania badawcze

To trzymiesięczne badanie kliniczne ma na celu udzielenie odpowiedzi na następujące pytania badawcze:

Podstawowe pytanie

1. Czy istnieje różnica w powstawaniu płytki nazębnej de novo mierzonej za pomocą wskaźnika tworzenia płytki nazębnej (Axelsson 1991) między osobami stosującymi nowy nanokrystaliczny środek do czyszczenia zębów z węglanem/hydroksyapatytem a osobami stosującymi sprawdzony środek do czyszczenia zębów zawierający fluorek cynku? Pytania drugorzędne
2. Czy istnieją różnice pomiędzy osobami stosującymi oba pasty do zębów w zakresie subiektywnego postrzegania terapii?
3. Czy istnieją różnice między tymi dwoma środkami do czyszczenia zębów w odniesieniu do następujących pomiarów periodontologicznych: zmiana oceny płytki nazębnej w całej jamie ustnej (O'Leary Plaque Control Record, O'Leary 1972), wskaźnik dziąseł (Löe 1967), zmiana głębokości sondowania kieszonek (PPD's) , a odsetek miejsc z przyrostem przyczepu ≥ 2 mm?
4. Czy występują zmiany jakościowe i ilościowe dotyczące składu mikroflory jamy ustnej?

Projekt badania Badanie zostało zaprojektowane jako badanie z podwójnie ślepą próbą, w grupach równoległych i randomizowane, trwające 3 miesiące (główny punkt końcowy). Dodatkowe punkty końcowe nie są zaplanowane. Siedemdziesiąt pięć osób zostanie włączonych do tego czterowizytowego badania; dla każdego przedmiotu wymagane są wizyty 1-4. Osoby z grupy badanej i kontrolnej będą leczone zgodnie z identycznymi protokołami terapii, z wyjątkiem środka do czyszczenia zębów. Uczestniczącymi ośrodkami badawczymi będą Katedra Periodontologii Uniwersytetu w Münster oraz Katedra Periodontologii Uniwersytetu w Würzburgu.

Rejestracja i randomizacja uczestników Pacjenci, którzy spełniają wszystkie kryteria włączenia, nie spełniają żadnych kryteriów wykluczenia i podpisali świadomą zgodę, zostaną zarejestrowani do badania przez ośrodki w Münster lub Würzburg (wizyta 1). Podczas wizyty 2 osoby badane zostaną losowo przydzielone do grupy testowej stosującej środek do czyszczenia zębów nanokrystaliczny węglan/hydroksyapatyt lub do grupy kontrolnej stosującej środek do czyszczenia zębów zawierający fluorek cynku. Randomizacja pacjentów jest uzasadniona przy użyciu listy randomizacji (randomizacja blokowa z 4 pacjentami na blok). Oznaczenie osoby badanej jako palącej/niepalącej będzie oparte na odnotowaniu stężenia tlenku węgla w wydychanym powietrzu (osoba niepaląca: mniej niż 3 ppm CO w wydychanym powietrzu; osoba paląca: równa lub większa niż 3 ppm).

Leczenie uczestników Podczas wizyty 1 („Screening/Recruitment”) wszyscy badani są informowani o planowanej próbie. Jeśli pacjenci są chętni do udziału, przechodzą okresowe badanie przesiewowe (PSI) i pytają o historię medyczną. Podczas wizyty 2 („linia bazowa”, składająca się z dwóch wizyt w odstępach 24-godzinnych) w ramach pierwszej wizyty, pacjenci są randomizowani i badane są parametry przyzębia. Badanym wydawane są zaślepione opakowania różnych środków do czyszczenia zębów. Na koniec pacjenci otrzymują rutynowe skaling naddziąsłowy skalerami sonicznymi oraz polerowanie aparatem z proszkiem pneumatycznym (proszek glicynowy). Pacjentom zaleca się powstrzymanie się od higieny jamy ustnej przez następne 24 godziny. Na koniec badani wypełniają dwa kwestionariusze. Podczas drugiego spotkania bada się szybkość tworzenia się płytki nazębnej i instruuje się pacjentów, aby szczotkowali zęby już używaną szczoteczką do zębów przez 2 minuty co najmniej dwa razy dziennie w domu.

Cztery tygodnie po „Linii podstawowej” podczas wizyty 3 („Leczenie”, składającej się z dwóch wizyt w odstępach 24-godzinnych) badane są parametry przyzębia i wszyscy pacjenci otrzymują pełne oczyszczenie nad- i poddziąsłowe w dwóch sesjach w ciągu dwóch kolejnych dni. Oczyszczanie przeprowadza się skalerami dźwiękowymi z mikrokońcówkami w znieczuleniu miejscowym, a polerowanie aparatem do pudru powietrznego. Pacjentom zaleca się powstrzymanie się od higieny jamy ustnej przez następne 24 godziny. Podczas drugiej wizyty bada się tempo tworzenia się płytki nazębnej, wszyscy badani otrzymują pełne oczyszczenie jamy ustnej nad- i poddziąsłowej oraz są poinstruowani, aby szczotkować zęby już używaną szczoteczką do zębów przez 2 minuty co najmniej dwa razy dziennie w domu. Dwa miesiące po „Leczeniu” na wizycie 4 („Ponowna ocena”, składająca się z dwóch wizyt w odstępach 24 godzinnych) badane są parametry przyzębia i wszyscy badani otrzymują pełne oczyszczenie naddziąsłowe podczas jednej sesji. Pacjentom zaleca się powstrzymanie się od higieny jamy ustnej przez następne 24 godziny. Podczas drugiej wizyty bada się stopień tworzenia płytki nazębnej, wszyscy pacjenci otrzymują pełne oczyszczenie jamy ustnej naddziąsłowej. Badani zwracają opakowania po środkach do czyszczenia zębów.

W trakcie badania nie podaje się żadnych leków oprócz pasty do zębów ani znieczulenia miejscowego. Podczas badania uczestnicy nie mogą przechodzić zaawansowanego leczenia periodontologicznego (tj. chirurgii periodontologicznej) lub przyjmowania leków wpływających na zdrowie przyzębia.

Badania kliniczne Po ocenie płytki nazębnej i wskaźnika dziąsłowego (O'Leary 1972, Löe 1967) wykonuje się kliniczne pomiary głębokości sondowania kieszonek w jamie ustnej (PPD), krwawienia podczas sondowania (BOP), recesji dziąsłowych (GR) i zajęcia furkacji. Wszystkie pomiary, z wyjątkiem zajęcia furkacji, są wykonywane w sześciu miejscach na ząb (policzkowo, środkowo-policzkowo, podpoliczkowo, mezjalno-językowo, środkowo-językowo i podjęzykowo). Pomiary PPD, BOP i GR są wykonywane przy użyciu standardowej rękojeści Florida Probe® (Florida Probe Corp., Gainsville, Floryda, USA). Pomiary kliniczne wykonuje się na początku badania, po 4 tygodniach i po 3 miesiącach (wizyty 2a, 3a i 4a). Nawyki związane z paleniem są określane przez obiektywny pomiar stężenia tlenku węgla w wydychanym powietrzu przeprowadzany w fotelu (Bedfont-Smokerlyzer®, Bedfont, Wielka Brytania) podczas wizyt od 1 do 4. Zdjęcia i zdjęcia rentgenowskie wewnątrzustne są wykonywane na początku badania.

Specyfikacja Oceny Psychologicznej Na wizytach 2a i 4a pacjenci proszeni są o wypełnienie Profilu Wpływu na Zdrowie Jamy Ustnej – wersja niemiecka (OHIP-G 49) oraz niemiecka wersja Kwestionariusza Satysfakcji Klienta (ZUF-8) jako standaryzowanego narzędzia do pomiaru stanu zdrowia wynik.

Profil wpływu na zdrowie jamy ustnej — wersja niemiecka (OHIP-G 49) Oryginalna angielska wersja kwestionariusza została opracowana przez Slade'a i Spencera (1994). Niemieckie tłumaczenie i walidację narzędzia wykonali John i in. (2002). OHIP-G 49 zawiera 49 pozycji, które odnoszą się do konkretnych problemów zdrowia jamy ustnej, np. „problemy z przeżuwaniem pokarmu” lub „ból dziąseł”. Każda pozycja jest oceniana w pięciostopniowej skali (od 0: nigdy do 4: bardzo często). Suma punktów wszystkich pozycji jest obliczana jako wskaźnik aktualnego stanu zdrowia jamy ustnej. Wypełnienie kwestionariusza zajmuje około dziesięciu minut.

ZUF-8 Zadowolenie pacjentów z leczenia ocenia się za pomocą kwestionariusza Fragebogen zur Patientenzufriedenheit (ZUF-8, Schmidt i in. 1989), który jest niemiecką wersją Kwestionariusza Satysfakcji Klienta (CQS, Attkisson & Zwick 1982).

Badanie mikrobiologiczne Do analizy mikrobiologicznej pobiera się połączone próbki płytki nazębnej poddziąsłowej z czterech różnych zębów z co najmniej jednym miejscem z PPD ≥ 4 mm od każdego badanego. Połączoną próbkę płytki poddziąsłowej zbiera się do probówki transportowej zawierającej 500 µl roztworu gliceryny Ringera. Połączone próbki są natychmiast zabierane do laboratorium do analizy lub przechowywane w ciekłym azocie.

Naddziąsłową płytkę nazębną pobiera się z czterech miejsc na próbkę zęba. Z miejsc policzkowych i językowych pobiera się próbki za pomocą Periotron® dostosowanego do powierzchni zęba w celu pobrania płytki nazębnej z obszaru w pobliżu krawędzi dziąseł. Próbki płytki nazębnej z przestrzeni międzyzębowych, naddziąsłowych pobiera się, wprowadzając poziomo sterylny papierowy punkt w kierunku od policzka do języka w pobliżu brzegu dziąsła. Próbki z miejsc policzkowych/językowych iz miejsc międzyzębowych łączy się odpowiednio (po dwie połączone próbki od każdego pacjenta na wizytę 2a, 3a, 4a) w oddzielnej probówce transportowej zawierającej 500 µl roztworu gliceryny Ringera. Połączone próbki są natychmiast zabierane do laboratorium do analizy lub przechowywane w ciekłym azocie.

Próbki zębów są wybierane losowo na linii podstawowej, jak pokazano na ryc. 2, aby zapewnić równomierne rozmieszczenie w jamie ustnej i pozostać takie same w trakcie badania. Całkowita liczba bakterii jest określana ilościowo przez hodowlę podczas wizyt studyjnych 2a, 3a i 4a.

Obróbka laboratoryjna, analiza mikrobiologiczna Po pobraniu próbki płytki poddziąsłowej próbki są natychmiast pobierane do laboratorium w celu dalszej obróbki lub przechowywane w ciekłym azocie do czasu zakończenia badania. Po zakończeniu procesu zostaną przewiezieni do Münster. Do transportu są przechowywane w śniegu z dwutlenkiem węgla i ponownie w ciekłym azocie w laboratorium w Münster. Połączone próbki poddaje się sonikacji przez 10 sekund (Sonotex RK 82, Bandelin Electronic AG, Berlin, Niemcy) i rozcieńcza w krokach dziesięciokrotnych. 0,1 ml nierozcieńczonej zawiesiny i 0,1 ml porcje rozcieńczeń rozprowadza się na różnych pożywkach hodowlanych. Równolegle próbki płytki naddziąsłowej rozprowadza się na agarze CDC i przechowuje w atmosferze tlenowej w temperaturze 37 stopni powyżej zera przez noc.

W celu zliczenia ilościowego nierozcieńczone i rozcieńczone zawiesiny rozprowadza się na płytkach z nieselektywnym agarem z krwią (CDC agar) zawierających 5% odwłóknionej krwi baraniej z dodatkiem 5 mg/l heminy (Merck, Darmstadt, Niemcy), 1 mg/l witaminy K1 i 10 mg/l kwas N-acetylomuraminowy (NAM). NAM jest uzupełniany w uprawie T. forsythensis. Płytki inkubuje się w atmosferze zawierającej N2 (85%), H2 (10%) i CO2 (5%) przez 7 dni. Całkowite zliczenia nadające się do hodowli ocenia się dla każdej z próbek łysinek. Ocenę zbiorczych próbek łysinek na agarze CDC i całkowitą liczbę komórek hodowanych podawano ilościowo jako jednostki tworzące kolonie (CFU/ml). W dalszych badaniach zostanie oceniona obecność określonych patogenów przyzębia.