Mikrobiom skóry w chorobie przeszczep przeciwko gospodarzowi

pacjentów z GVHD po allo-HSCT

Badanie mikroflory skóry u pacjentów z GVHD po allo-HSCT poprzez pobieranie wymazów ze skóry i biopsję punktową przed zabiegiem kondycjonowania oraz dodatkowe biopsje skóry z miejsc dotkniętych i zdrowych w przypadku GVHD

Test diagnostyczny: Wymazy ze skóry

Wstępnie zwilżone wymazy ze skóry zostaną pobrane przed rozpoczęciem przez pacjenta schematów kondycjonowania (przed kondycjonowaniem; początek HSCT = dzień 0, w dniu przeszczepu i powtórzenie w 4, 12, 24, 36 i 52 tygodniu po allo-HSCT . Pierwszy wymaz służy jako punkt odniesienia (najlepiej pobrany najwcześniej tydzień po ogólnoustrojowym leczeniu antybiotykami). Wymazy zostaną pobrane z szyi, pleców, prawego biodra, policzkowej jamy ustnej i błon śluzowych narządów płciowych. U pacjentów, u których rozwinęła się ostra lub przewlekła choroba GVHD skóry, dodatkowe wymazy zostaną pobrane z dotkniętej chorobą skóry w momencie diagnozy, a następnie ponownie zgodnie z harmonogramem wymazów ze skóry nieuszkodzonej.

Test diagnostyczny: Biopsje skórne

Podczas pierwszej wizyty zostanie pobrana pojedyncza biopsja skórna w celu określenia stanu skóry i mikrobiomu przed allo-HSCT. Dalsze biopsje będą pobierane tylko w przypadku ostrej lub przewlekłej skórnej GVHD. Biopsja punktowa 4-6 mm zostanie pobrana z dotkniętego obszaru skóry, a druga z pobliskiej nienaruszonej części skóry. Przed biopsją zostanie przeprowadzona dezynfekcja skóry, aby uniknąć zanieczyszczenia bakteriami powierzchniowymi.

Test diagnostyczny: dodatkowe pobieranie krwi

dodatkowa probówka krwi (2,7 ml) oraz dodatkowa probówka surowicy (6 ml) zostaną pobrane i zamrożone podczas wizyt 1, 2, 3 i 7 w trakcie pobierania krwi, aby móc przeprowadzić ewentualne późniejsze badania laboratoryjne testy, które mogą okazać się przydatne w zależności od przebiegu studiów.

pacjenci bez GVHD po allo-HSCT

Badanie mikroflory skóry u pacjentów bez GVHD po allo-HSCT poprzez pobieranie wymazów ze skóry i biopsję skóry przed zabiegiem kondycjonowania

Test diagnostyczny: Wymazy ze skóry

Wstępnie zwilżone wymazy ze skóry zostaną pobrane przed rozpoczęciem przez pacjenta schematów kondycjonowania (przed kondycjonowaniem; początek HSCT = dzień 0, w dniu przeszczepu i powtórzenie w 4, 12, 24, 36 i 52 tygodniu po allo-HSCT . Pierwszy wymaz służy jako punkt odniesienia (najlepiej pobrany najwcześniej tydzień po ogólnoustrojowym leczeniu antybiotykami). Wymazy zostaną pobrane z szyi, pleców, prawego biodra, policzkowej jamy ustnej i błon śluzowych narządów płciowych. U pacjentów, u których rozwinęła się ostra lub przewlekła choroba GVHD skóry, dodatkowe wymazy zostaną pobrane z dotkniętej chorobą skóry w momencie diagnozy, a następnie ponownie zgodnie z harmonogramem wymazów ze skóry nieuszkodzonej.

Test diagnostyczny: Biopsje skórne

Podczas pierwszej wizyty zostanie pobrana pojedyncza biopsja skórna w celu określenia stanu skóry i mikrobiomu przed allo-HSCT. Dalsze biopsje będą pobierane tylko w przypadku ostrej lub przewlekłej skórnej GVHD. Biopsja punktowa 4-6 mm zostanie pobrana z dotkniętego obszaru skóry, a druga z pobliskiej nienaruszonej części skóry. Przed biopsją zostanie przeprowadzona dezynfekcja skóry, aby uniknąć zanieczyszczenia bakteriami powierzchniowymi.

Test diagnostyczny: dodatkowe pobieranie krwi

dodatkowa probówka krwi (2,7 ml) oraz dodatkowa probówka surowicy (6 ml) zostaną pobrane i zamrożone podczas wizyt 1, 2, 3 i 7 w trakcie pobierania krwi, aby móc przeprowadzić ewentualne późniejsze badania laboratoryjne testy, które mogą okazać się przydatne w zależności od przebiegu studiów.

Określenie mikrobiomu bakteryjnego pacjentów z GVHD po allo-HSCT vs. pacjentów bez GVHD po allo-HSCT

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Określenie mikrobiomu bakteryjnego pacjentów z GVHD po allo-HSCT vs. pacjentów bez GVHD po allo-HSCT

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Określenie mikrobiomu bakteryjnego pacjentów z GVHD po allo-HSCT vs. pacjentów bez GVHD po allo-HSCT

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Określenie mikrobiomu bakteryjnego pacjentów z GVHD po allo-HSCT vs. pacjentów bez GVHD po allo-HSCT

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Określenie mikrobiomu bakteryjnego pacjentów z GVHD po allo-HSCT vs. pacjentów bez GVHD po allo-HSCT

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Zmiana mikroflory skóry w skórze uszkodzonej i nieuszkodzonej u pacjentów z GVHD

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Zmiana międzyosobniczej mikroflory skóry u pacjentów allo-HSCT

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Zmiana wewnątrzosobniczej mikroflory skóry u pacjentów allo-HSCT

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Zmiana mikroflory skóry w korelacji z częstością i rodzajem infekcji potransplantacyjnych (np. epizody bakteriemii).

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Zmiana składu mikroflory skóry w korelacji z ciężkością GVHD

Po lizie mikroflory DNA jest ekstrahowane w celu filogenetycznego sekwencjonowania genu rybosomalnego RNA 16S (standardowy protokół illumina), co jest uważane za aktualny złoty standard określania mikrobiomu bakteryjnego

Zmiana Dermatologicznego Wskaźnika Jakości Życia (DLQI)

Składa się z 10 pytań obejmujących następujące tematy: objawy, zakłopotanie, zakupy i opieka domowa, ubranie, życie towarzyskie i wypoczynek, sport, praca lub nauka, bliskie związki, seks, leczenie. Każde pytanie odnosi się do wpływu choroby skóry na życie pacjenta w ciągu poprzedniego tygodnia. Każde pytanie punktowane jest w skali od 0 do 3, co daje możliwy zakres punktacji od 0 (oznaczający brak wpływu choroby skóry na jakość życia) do 30 (oznaczający maksymalny wpływ na jakość życia).

Zmiana w numerycznej skali oceny najgorszego świądu (WINRS)

Numeryczna skala oceny pojedynczej pozycji zakotwiczona na 0 i 10, na której 0 oznacza „brak swędzenia”, a 10 oznacza „najgorsze swędzenie, jakie można sobie wyobrazić”. Pacjent wskazuje ogólne nasilenie świądu, które można przypisać jego łuszczycowemu stanowi skóry, zakreślając kółkiem liczbę, która najlepiej opisuje najgorszy poziom świądu w ciągu ostatnich 24 godzin.

Zmiana w Kwestionariuszu Eppendorf Itch (EIQ)

Kwestionariusz składa się z dwóch stron, które pacjent wypełnia samodzielnie. Formularz 1 przedstawia 80 losowych deskryptorów. Pozycje sensoryczne są zgrupowane po lewej stronie, a pozycje bardziej afektywne lub emocjonalne o różnym natężeniu znajdują się po prawej stronie. Każda pozycja jest oceniana w zakresie od 0 („nieprawda”) do 4 („dokładnie opisuje moje uczucie swędzenia”). Statystycznie ocenialne intensywności można wyprowadzić z formularza 1 dla każdego elementu. Formularz 2 dotyczy aspektów tymczasowych i topograficznych. Środki przeciw swędzeniu („łagodzące swędzenie”) są tutaj zgrupowane, a intensywność świądu ocenia się na wizualnej skali analogowej.

Zmiana w Szpitalnej Skali Lęku i Depresji (HADS)

HADS to czternastopunktowa skala generująca dane porządkowe. Siedem pozycji odnosi się do lęku, a siedem do depresji. Każda pozycja w kwestionariuszu jest oceniana w skali od 0 do 3, co oznacza, że ​​dana osoba może uzyskać od 0 do 21 punktów za lęk lub depresję. Wyniki większe lub równe 11 na obu skalach wskazują na przypadek ostateczny.