Uszkodzenie glikokaliksu śródbłonka w ostrym uszkodzeniu nerek

Projekt badania: Prospektywne badanie kohortowe.

Badacze zrekrutują 70 pacjentów planowych poddawanych operacji CABG z lub bez krążenia pozaustrojowego (CPB), z pobieraniem krwi i moczu oraz oceną perfuzji mikrokrążenia metodą IDF w okresie przedoperacyjnym i pooperacyjnym, za świadomą pisemną zgodą. Badacze ukończyli studium wykonalności z pomyślną rekrutacją i gromadzeniem danych we wszystkich punktach czasowych, a obecny protokół i materiał pacjenta zostały sprawdzone przez przedstawiciela pacjentów.

Próbki krwi i moczu zostaną przeanalizowane w celu uwzględnienia markerów degradacji glikokaliksu śródbłonka (w tym syndekanu-1 (SDC1)), aktywacji śródbłonka (w tym trombomoduliny (TM)) oraz markerów obciążenia kanalików nerkowych (NephroCheck).

Perfuzja mikrokrążenia podjęzykowego oceniana za pomocą obrazowania IDF jest bezbolesna i obarczona niskim ryzykiem, a akceptacja uczestników została potwierdzona podczas studium wykonalności. Proces polega na delikatnym naciśnięciu małej ręcznej sondy na spód języka i trwa 3-10 minut. Od każdego uczestnika zostaną pobrane cztery klipy wideo po 10 sekund z różnych miejsc w obszarze podjęzykowym. Filmy zostaną wyeksportowane jako pliki pseudonimizowane do analizy. Zbieranie i analiza obrazów zostaną przeprowadzone zgodnie z zaleceniami konsensusu międzynarodowego, przy użyciu wideomikroskopu CytoCam (Braedius Medical B.V., Huizen, Holandia). Obrazy będą analizowane za pomocą dedykowanego oprogramowania (Automated Vascular Analysis V.3.02, Microvision Medical, Holandia). Wygenerowane dane będą obejmować pomiary mikrokrążenia oparte na przepływie i gęstości, w tym gęstość naczyń perfundowanych (PVD) i wskaźnik przepływu mikrokrążenia (MFI).

Okołooperacyjne pobieranie próbek i obrazowanie będą miały miejsce w określonych wcześniej chirurgicznych punktach czasowych, zgodnie z wcześniejszymi badaniami i na podstawie studium wykonalności. Punkty czasowe wybrano w oczekiwaniu na najbardziej pouczające wyniki, w tym punkt szczytowej „reperfuzji” po ostatecznym zespoleniu chirurgicznym, oraz w celu zminimalizowania niedogodności dla uczestnika (zostanie wykorzystany istniejący przewód tętniczy i cewnik moczowy) oraz w celu uniknięcia zakłóceń i opóźnień zabiegu chirurgicznego ( IDF jest szybszy podczas znieczulenia, a poprzednie badania wykazały znikomą różnicę między wartością wyjściową a oceną bezpośrednio po znieczuleniu przed operacją).

Czynniki zakłócające: Czynniki wpływające na rozwój AKI obejmują historię medyczną (przewlekła choroba nerek, nadciśnienie tętnicze, cukrzyca), czynniki chirurgiczne (operacja, CPB i czas trwania zakleszczenia aorty, stosowanie produktów krwiopochodnych), wolną hemoglobinę (fHb) i parametry makronaczyniowe (ciśnienie krwi , mleczan, pojemność minutowa serca, hematokryt) zostaną zarejestrowane i przeprowadzone zostaną korekty analiz statystycznych.

Kontynuacja: Do siedmiu dni po operacji lub wypisie ze szpitala, w zależności od tego, co nastąpi wcześniej.

Proponowana wielkość próby: 70 (badanie jednoośrodkowe)

Obliczenia mocy: Badanie kohortowe ma moc określenia głównego wyniku: szczytowego stężenia SDC1 w osoczu między tymi, u których rozwija się CSA-AKI i u których nie rozwija się. Retrospektywna analiza badaczy wykazała, że ​​częstość występowania CSA-AKI po CABG w ich szpitalu wynosiła 19%. Najbardziej odpowiednim opublikowanym badaniem oferującym statystyki testowe do wyliczenia mocy jest badanie AKI w kohorcie pacjentów z ostrą zdekompensowaną niewydolnością serca. Różnica w średnim SDC1 między osobami z i bez AKI (wielkość efektu) została obliczona na podstawie przedstawionych danych jako 153,2 ± 123,8 ng/ml. Zakładając moc 80% i poziom istotności 5%, obliczenie z wykorzystaniem statystyki T daje próbkę 36: 7 z CSA-AKI i 29 bez. Badacze powtórzyli następnie obliczenia, korzystając z niepublikowanych danych dotyczących pacjentów z urazowym wstrząsem krwotocznym, gdzie różnica w średnim SDC1 między pacjentami z AKI i bez AKI wynosiła 175,2 ± 185,5 ng/ml. Przy tych samych założeniach, co poprzednio, obliczenia dają próbkę 61: 12 z CSA-AKI i 49 bez. Badacze zastosują bardziej konserwatywne z tych obliczeń, dopuszczą 10% odsetek rezygnacji i będą dążyć do rekrutacji 70 pacjentów.

Utrata działań następczych: Ponieważ całe pobieranie próbek i gromadzenie danych będzie miało miejsce w bardzo krótkim okresie, nie powinno być strat w działaniach następczych, jak w studium wykonalności. Jeśli uczestnicy wycofają zgodę, dalsze próbki ani obrazy nie będą pobierane.

Błąd systematyczny: Uczestnicy będą rekrutowani przez kolejne próby dogodne. Jest mało prawdopodobne, aby istniały jakiekolwiek różnice między tymi, do których się zwrócono, a tymi, do których się nie zwrócono, i jest mało prawdopodobne, aby wystąpił błąd selekcji. Stronniczość informacji jest również mało prawdopodobna, ponieważ wszystkie pomiary i gromadzone dane są obiektywne. Badacze będą chronić przed stronniczością podczas analizy wyników poprzez pseudonimizację próbek i filmów IDF. Czynniki zakłócające zostaną uwzględnione podczas analizy, jak powyżej.

Analiza statystyczna: Pacjenci zostaną podzieleni na dwie grupy w oparciu o obecność lub brak CSA-AKI. Różnica między pikiem SDC1 między grupami zostanie oceniona za pomocą testów t. Wielokrotna regresja logistyczna z AKI jako wynikiem i szczytowym SDC1 jako niezależnym predyktorem zostanie wykorzystana do rozważenia parametrów zakłócających, w tym fHb. Wartości P <0,05 będą uważane za istotne statystycznie. Analiza zostanie powtórzona dla różnicy między wartością szczytową SDC1 a wartością wyjściową dla każdego uczestnika, aby wziąć pod uwagę możliwe istniejące wcześniej uszkodzenie glikokielichowca. Korelacja między SDC1 a TM i PVD / MFI zostanie obliczona przy użyciu odpowiednio zmiennych ciągłych lub grup jakościowych. Aby określić wartość predykcyjną SDC1 i zmiennych mikrokrążenia w CSA-AKI, dla każdej zmiennej zostaną skonstruowane krzywe charakterystyki działania odbiornika (ROC), wykreślając czułość w funkcji (1-swoistość) dla serii wartości progowych i obliczając pole powierzchni pod krzywą ( AUC) dla każdego. Zostaną one porównane z wynikami NephroCheck, Cleveland Clinic Score, fHb, mleczanów i makroangiopatii.

Dostęp do danych: Dane zebrane podczas tego badania będą dostępne wyłącznie dla zespołu badawczego i dla Sponsora w celach regulacyjnych.

Przechowywanie danych i próbek: Wszystkie dane będą przechowywane zgodnie z zasadami Caldicott.