Poškození endoteliálního glykokalyxu při akutním poškození ledvin

Design studie: Prospektivní kohortová studie.

Vyšetřovatelé přijmou 70 elektivních pacientů podstupujících operaci CABG s kardiopulmonálním bypassem (CPB) a bez něj, s odběrem krve a moči a hodnocením mikrocirkulační perfuze pomocí IDF v předoperačním a pooperačním období, s informovaným písemným souhlasem. Vyšetřovatelé dokončili studii proveditelnosti s úspěšným náborem a sběrem dat ve všech časových bodech a aktuální protokol a materiál pacienta byly přezkoumány zástupcem pacientů.

Vzorky krve a moči budou analyzovány za účelem zvážení markerů degradace endoteliálního glykokalyxu (včetně syndekanu-1 (SDC1)), aktivace endotelu (včetně trombomodulinu (TM)) a markerů renálního tubulárního stresu (NephroCheck).

Sublingvální mikrocirkulační perfuze hodnocená IDF zobrazením je bezbolestná a s nízkým rizikem a přijatelnost účastníků byla potvrzena během studie proveditelnosti. Tento proces zahrnuje použití malé ruční sondy k jemnému zatlačení na spodní stranu jazyka a trvá 3–10 minut. Od každého účastníka budou pořízeny čtyři videoklipy po 10 sekundách z různých míst v sublingvální oblasti. Videa budou exportována jako pseudonymizované soubory pro analýzu. Sběr a analýza snímků budou prováděny v souladu s mezinárodními konsensuálními doporučeními pomocí videomikroskopu CytoCam (Braedius Medical B.V., Huizen, Nizozemsko). Snímky budou analyzovány pomocí speciálního softwarového nástroje (Automated Vascular Analysis V.3.02, Microvision Medical, Nizozemsko). Vygenerovaná data budou zahrnovat měření mikrocirkulace založená na průtoku a hustotě, včetně hustoty perfusních cév (PVD) a indexu mikrocirkulačního průtoku (MFI).

Perioperační odběr vzorků a zobrazování bude probíhat v předem definovaných chirurgických časových bodech, v souladu s předchozími studiemi a na základě studie proveditelnosti. Časové body byly vybrány s ohledem na očekávání nejinformativnějších výsledků, včetně bodu vrcholu „reperfuze“ po konečné chirurgické anastomóze, a aby se minimalizovalo nepohodlí účastníků (bude použita stávající arteriální linka a hadičky močového katétru) a aby se předešlo přerušení a zdržení při chirurgickém zákroku ( IDF je rychlejší během anestezie a předchozí studie prokázaly zanedbatelnou změnu mezi výchozí hodnotou a hodnocením bezprostředně po anestezii před operací).

Faktory ovlivňující vývoj AKI zahrnují anamnézu (chronické onemocnění ledvin, hypertenze, diabetes), chirurgické faktory (operace, trvání CPB a aortálního cross clampu, použití krevních přípravků), volný hemoglobin (fHb) a makrovaskulární parametry (krevní tlak , laktát, srdeční výdej, hematokrit) a provede se úprava statistických analýz.

Sledování: Do sedmi dnů po operaci nebo propuštění z nemocnice, podle toho, co nastane dříve.

Navrhovaná velikost vzorku: 70 (studie s jedním středem)

Výpočty síly: Kohortová studie je zaměřena na určení primárního výsledku: maximální plazmatické koncentrace SDC1 mezi těmi, u kterých se vyvine a nevyvine CSA-AKI. Retrospektivní analýza vyšetřovatelů zjistila, že incidence CSA-AKI po CABG v jejich nemocnici byla 19 %. Nejvhodnější publikovanou studií, která nabízí statistiky testů jako vodítko pro výpočet výkonu, je jedna z AKI u kohorty pacientů s akutním dekompenzovaným srdečním selháním. Rozdíl v průměrné SDC1 mezi těmi s a bez AKI (velikost účinku) byl vypočten z prezentovaných dat jako 153,2 ± 123,8 ng/ml. Za předpokladu hodnoty síly 80 % a hladiny významnosti 5 % získá výpočet pomocí T statistiky vzorek 36:7 s CSA-AKI a 29 bez. Výzkumníci dále zopakovali výpočty s použitím nepublikovaných dat od pacientů s traumatickým hemoragickým šokem, kde rozdíl v průměrné SDC1 mezi pacienty s a bez AKI byl 175,2 ± 185,5 ng/ml. Za stejných předpokladů jako dříve výpočet dává vzorek 61:12 s CSA-AKI a 49 bez. Vyšetřovatelé použijí konzervativnější z těchto výpočtů, umožní 10% míru předčasného ukončení a zaměří se na nábor 70 pacientů.

Ztráta následných opatření: Vzhledem k tomu, že veškeré odběry vzorků a sběr dat budou probíhat ve velmi krátkém období, nemělo by dojít ke ztrátám při sledování, jako je tomu ve studii proveditelnosti. Pokud účastníci odvolají souhlas, nebudou shromažďovány žádné další vzorky ani obrázky.

Zaujatost: Účastníci budou náborováni postupným vzorkováním. Je nepravděpodobné, že budou nějaké rozdíly mezi těmi, na které se přistupuje, a mezi těmi, na které se přistupuje, a není pravděpodobné, že se uplatní zkreslení výběru. Informační zkreslení je také nepravděpodobné, protože všechna měření a data, která mají být shromážděna, jsou objektivní. Vyšetřovatelé budou při analýze výsledků chránit před zkreslením hodnocení pseudonymizací vzorků a videí IDF. Během analýzy budou brány v úvahu matoucí faktory, jak je uvedeno výše.

Statistická analýza: Pacienti budou rozděleni do dvou skupin na základě přítomnosti nebo nepřítomnosti CSA-AKI. Rozdíl mezi vrcholem SDC1 mezi skupinami bude hodnocen pomocí T-testů. Vícenásobná logistická regrese s AKI jako výsledkem a vrcholem SDC1 jako nezávislým prediktorem bude použita pro zvážení matoucích parametrů, včetně fHb. P-hodnoty <0,05 budou považovány za statisticky významné. Analýza bude opakována pro rozdíl mezi vrcholem SDC1 a výchozí hodnotou pro každého účastníka, aby se vzalo v úvahu možné již existující poškození glykokalycey. Korelace mezi SDC1 a TM a PVD / MFI bude vypočítána pomocí spojitých proměnných nebo kategoriálních skupin podle potřeby. K určení prediktivní hodnoty SDC1 a mikrocirkulačních proměnných v CSA-AKI přijímači provozní charakteristiky (ROC) budou zkonstruovány křivky pro každou proměnnou vynesením citlivosti versus (1-specificita) pro řadu prahových hodnot a výpočtem plochy pod křivkou ( AUC) pro každého. Ty budou porovnány s těmi pro NephroCheck skóre, Cleveland Clinic Score, fHb, laktát a makrovaskulární parametry.

Přístup k datům: Data shromážděná během této studie budou přístupná pouze studijnímu týmu a sponzorovi pro regulační účely.

Ukládání dat a vzorků: Všechna data budou uložena v souladu s Caldicott Principles.