Danno del glicocalice endoteliale nella lesione renale acuta

Disegno dello studio: studio prospettico di coorte.

Gli investigatori recluteranno 70 pazienti elettivi sottoposti a intervento di CABG con e senza bypass cardiopolmonare (CPB), con prelievo di sangue e urina e valutazione della perfusione microcircolatoria mediante IDF nei periodi pre-peri e post-operatorio, con consenso informato scritto. Gli investigatori hanno completato uno studio di fattibilità con il reclutamento e la raccolta dei dati di successo in tutti i momenti e il protocollo attuale e il materiale del paziente sono stati rivisti da un rappresentante del paziente.

Saranno analizzati campioni di sangue e urina per considerare i marcatori di degradazione del glicocalice endoteliale (incluso syndecan-1 (SDC1)), l'attivazione endoteliale (inclusa la trombomodulina (TM)) e i marcatori di stress tubulare renale (NephroCheck).

La perfusione microcircolatoria sublinguale valutata mediante imaging IDF è indolore e a basso rischio e l'accettabilità dei partecipanti è stata confermata durante lo studio di fattibilità. Il processo prevede l'utilizzo di una piccola sonda portatile per premere delicatamente sulla parte inferiore della lingua e richiede 3-10 minuti. Quattro videoclip di 10s saranno presi da ciascun partecipante da diversi siti all'interno dell'area sublinguale. I video verranno esportati come file pseudonimizzati per l'analisi. La raccolta e l'analisi delle immagini saranno eseguite in conformità con le raccomandazioni del consenso internazionale, utilizzando un video-microscopio CytoCam (Braedius Medical B.V., Huizen, Paesi Bassi). Le immagini saranno analizzate utilizzando uno strumento software dedicato (Automated Vascular Analysis V.3.02, Microvision Medical, Paesi Bassi). I dati generati includeranno misure basate sul flusso e sulla densità della microcircolazione, tra cui la densità dei vasi perfusi (PVD) e l'indice di flusso microcircolatorio (MFI).

Il campionamento e l'imaging perioperatorio avverranno in punti temporali chirurgici predefiniti, in linea con gli studi precedenti e informati dallo studio di fattibilità. I punti temporali sono stati selezionati in previsione dei risultati più informativi, incluso il punto di "riperfusione" di picco dopo l'anastomosi chirurgica finale, e per ridurre al minimo i disagi dei partecipanti (saranno utilizzati la linea arteriosa esistente e il tubo del catetere urinario) e per evitare interruzioni chirurgiche e ritardi ( L'IDF è più veloce durante l'anestesia e studi precedenti hanno mostrato un cambiamento trascurabile tra il basale e la valutazione immediatamente dopo l'anestesia prima dell'intervento chirurgico).

Fattori confondenti: i fattori che influenzano lo sviluppo di AKI comprendono l'anamnesi (malattia renale cronica, ipertensione, diabete), fattori chirurgici (operazione, durata del blocco crociato dell'aorta e del CPB, uso di emoderivati), emoglobina libera (fHb) e parametri macrovascolari (pressione arteriosa , lattato, gittata cardiaca, ematocrito) saranno registrati ed eseguiti gli aggiustamenti delle analisi statistiche.

Follow-up: fino a sette giorni dopo l'intervento o la dimissione dall'ospedale, a seconda di quale evento si verifica prima.

Dimensione del campione proposta: 70 (studio a centro singolo)

Calcoli della potenza: lo studio di coorte è alimentato per determinare l'esito primario: concentrazione di picco plasmatico di SDC1 tra coloro che sviluppano e non sviluppano CSA-AKI. L'analisi retrospettiva dei ricercatori ha rilevato che l'incidenza di CSA-AKI post-CABG nel loro ospedale era del 19%. Lo studio pubblicato più appropriato che offre statistiche di test per guidare il calcolo della potenza è quello dell'AKI in una coorte di pazienti con scompenso cardiaco acuto scompensato. La differenza nella SDC1 media tra quelli con e senza AKI (dimensione dell'effetto) è stata calcolata dai dati presentati come 153,2 ± 123,8 ng/ml. Assumendo un valore di potenza dell'80% e un livello di significatività del 5%, un calcolo che utilizza la statistica T produce un campione di 36: 7 con CSA-AKI e 29 senza. I ricercatori hanno ulteriormente ripetuto i calcoli utilizzando dati non pubblicati di pazienti con shock emorragico traumatico, in cui la differenza nell'SDC1 medio tra quelli con e senza AKI era di 175,2 ± 185,5 ng/ml. Con le stesse ipotesi di prima, il calcolo produce un campione di 61: 12 con CSA-AKI e 49 senza. Gli investigatori utilizzeranno il più conservativo di questi calcoli, consentiranno un tasso di abbandono del 10% e mireranno a reclutare 70 pazienti.

Perdite dovute al follow-up: poiché tutti i campionamenti e la raccolta dei dati avverranno in un periodo molto breve, non dovrebbero esserci perdite dovute al follow-up, come nello studio di fattibilità. Se i partecipanti ritirano il consenso, non verranno raccolti ulteriori campioni o immagini.

Bias: i partecipanti saranno reclutati mediante campionamento di convenienza consecutivo. È improbabile che vi siano differenze tra coloro che sono stati contattati e quelli che non sono stati contattati ed è improbabile che si applichi un bias di selezione. Anche la distorsione delle informazioni è improbabile poiché tutte le misurazioni e i dati da raccogliere sono oggettivi. Gli investigatori proteggeranno dai pregiudizi di valutazione durante l'analisi dei risultati mediante pseudonimizzazione di campioni e video IDF. I fattori di confusione saranno presi in considerazione durante l'analisi, come sopra.

Analisi statistica: i pazienti saranno divisi in due gruppi in base alla presenza o assenza di CSA-AKI. La differenza tra il picco SDC1 tra i gruppi sarà valutata utilizzando i test T. Verrà utilizzata la regressione logistica multipla con AKI come risultato e picco SDC1 come predittore indipendente per considerare i parametri confondenti, incluso fHb. I valori P <0,05 saranno considerati statisticamente significativi. L'analisi verrà ripetuta per la differenza tra il picco SDC1 e il basale per ciascun partecipante, per tenere conto di possibili lesioni glicocaliceali preesistenti. Verrà calcolata la correlazione tra SDC1 e TM e PVD / MFI, utilizzando variabili continue o gruppi categoriali a seconda dei casi. Per determinare il valore predittivo di SDC1 e delle variabili microcircolatorie in CSA-AKI, le curve delle caratteristiche operative del ricevitore (ROC) saranno costruite per ciascuna variabile tracciando la sensibilità rispetto a (1-specificità) per una serie di valori di soglia e calcolando l'area sotto la curva ( AUC) per ciascuno. Questi saranno confrontati con quelli per il punteggio NephroCheck, il punteggio Cleveland Clinic, fHb, lattato e parametri macrovascolari.

Accesso ai dati: i dati raccolti durante questo studio saranno accessibili solo al team dello studio e allo sponsor per scopi normativi.

Conservazione dei dati e dei campioni: tutti i dati saranno archiviati in conformità con i Principi Caldicott.