Kał i surowica CMV-PCR w diagnostyce zapalenia jelita grubego CMV

Złotym standardem w diagnostyce zapalenia jelita grubego CMV jest kolonoskopia z biopsją tkanki. Histologia za pomocą barwienia hematoksyliną i eozyną (H&E) ma wysoką swoistość 92-100%, ale niską czułość 10-87%. Barwienie immunohistochemiczne (IHC) zwiększa czułość diagnostyczną do 78-93%. Test reakcji łańcuchowej polimerazy tkankowej (PCR), metoda amplifikacji DNA CMV, ma najwyższą czułość (92-93%); jednak nie ma wyraźnej wartości odcięcia, aby odróżnić osoby postronne CMV od zapalenia jelita grubego wywołanego przez CMV. Choć kolonoskopia jest złotym standardem, w niektórych sytuacjach jest niedopuszczalna ze względu na duże ryzyko powikłań po zabiegu, np. u pacjentów z głęboką neutropenią, trombocytopenią lub ciężkimi chorobami. CMV-PCR w surowicy jest nieinwazyjnym testem wykrywającym wiremię CMV, która może być związana z chorobą CMV-GI. Jednak wyniki poprzednich badań są niespójne.

W ostatnich latach wzrosło zainteresowanie CMV-PCR w kale w diagnostyce CMV zapalenia jelita grubego. Test kału CMV-PCR jest nieinwazyjnym testem, który może być jakościowy lub ilościowy. W pierwszym badaniu pilotażowym Herfarth i in. zgłosili czułość CMV-PCR w stolcu na poziomie 83% i swoistość na poziomie 93% u 19 pacjentów z nieswoistymi zapaleniami jelit. Od tego czasu przeprowadzono tylko kilka badań opisujących skuteczność testu CMV-PCR w kale w rozpoznawaniu CMV zapalenia jelita grubego, a ich wyniki są niespójne. Podana czułość waha się od 16,7% do 85%, a swoistość od 71 do 96%. Ponadto nie badano skuteczności diagnostycznej połączenia CMV-PCR w surowicy i kale, które mogłoby poprawić skuteczność diagnostyczną. Dlatego naszym celem było zbadanie skuteczności diagnostycznej CMV-PCR w kale, CMV-PCR w surowicy i ich kombinacji w diagnozowaniu zapalenia jelita grubego wywołanego przez CMV przy użyciu histopatologii tkanek jako standardowego odniesienia u pacjentów z klinicznym podejrzeniem zapalenia jelita grubego wywołanego przez CMV. Ponadto oceniliśmy również korelację miana wirusa w kale, surowicy, tkance okrężnicy i liczbie komórek zakażonych CMV w tkance okrężnicy.

Do badania włączono pacjentów w wieku powyżej 18 lat z klinicznym podejrzeniem zapalenia jelita grubego CMV. Kryteria klinicznego podejrzenia zapalenia jelita grubego CMV obejmowały: i) obecność co najmniej jednego z czynników ryzyka, w tym zakażenia ludzkim wirusem upośledzenia odporności, przeszczepu narządu miąższowego lub hematologicznych komórek macierzystych, nowotworu układu krwiotwórczego, choroby zapalnej jelit, przyjmowania leków immunosupresyjnych lub chemioterapii oraz w stanie krytycznym z wieloma chorobami współistniejącymi oraz ii) z objawami ze strony przewodu pokarmowego, w tym bólem brzucha, krwawieniem z przewodu pokarmowego, biegunką i niedrożnością jelit.

Wszyscy uczestnicy przeszli kolonoskopię z biopsją tkanki zarówno pod kątem barwienia H&E, jak i immunohistochemii pod kątem CMV (IHC-CMV). U pacjentów z wykryciem komórek cytomegalii lub komórek IHC-CMV zdiagnozowano zapalenie jelita grubego CMV. Pozostałe dwa fragmenty tkanki okrężnicy przesłano do ilościowego CMV-PCR (zestaw CMV R-gene®, granica wykrywalności 450 kopii/ml, Biomerieux, Francja). Wykluczono pacjentów, którzy nie mogli wykonać kolonoskopii i biopsji tkanki. Pobrano ilościowe badanie CMV-PCR w kale (zestaw CMV R-gene®, granica wykrywalności 450 kopii/ml, Biomerieux, Francja) i ilościowe CMV-PCR w surowicy (Cobas® CMV, granica wykrywalności 150 kopii/ml, Roche, USA) w ciągu siedmiu dni od kolonoskopii.