Анализ стула и сыворотки на ЦМВ-ПЦР в диагностике ЦМВ-колита

Золотым стандартом диагностики ЦМВ-колита является колоноскопия с биопсией ткани. Гистология с окрашиванием гематоксилином и эозином (H&E) имеет высокую специфичность 92-100%, но низкую чувствительность 10-87%. Иммуногистохимическое окрашивание (ИГХ) повышает диагностическую чувствительность до 78-93%. Тканевая полимеразная цепная реакция (ПЦР), метод, который амплифицирует ДНК ЦМВ, имеет самую высокую чувствительность (92-93%); тем не менее, нет четкого порогового значения, позволяющего отличить свидетелей ЦМВ от колита ЦМВ. Хотя колоноскопия является золотым стандартом, в некоторых ситуациях ее не разрешают проводить из-за высокого риска процедурных осложнений, например, у пациентов с глубокой нейтропенией, тромбоцитопенией или тяжелыми заболеваниями. ЦМВ-ПЦР сыворотки — это неинвазивный тест, который выявляет виремию ЦМВ, которая может быть связана с заболеванием ЦМВ-ЖК. Однако результаты предыдущих исследований противоречивы.

В последние годы возрос интерес к ЦМВ-ПЦР кала в диагностике ЦМВ-колита. ЦМВ-ПЦР стула — это неинвазивный тест, который может быть качественным или количественным. В первом пилотном исследовании Herfarth et al. сообщили о чувствительности CMV-PCR стула 83% и специфичности 93% у 19 пациентов с воспалительным заболеванием кишечника. С тех пор было проведено всего несколько исследований, сообщающих об эффективности ЦМВ-ПЦР в кале при диагностике ЦМВ-колита, и их результаты противоречивы. Заявленная чувствительность колеблется от 16,7% до 85%, а специфичность — от 71 до 96%. Кроме того, не изучалась диагностическая эффективность комбинации ЦМВ-ПЦР сыворотки и кала, которая могла бы улучшить диагностическую эффективность. Поэтому мы стремились исследовать диагностическую эффективность ЦМВ-ПЦР стула, ЦМВ-ПЦР сыворотки и их комбинации при диагностике ЦМВ-колита с использованием гистопатологии тканей в качестве стандартного эталона у пациентов с клиническим подозрением на ЦМВ-колит. Кроме того, мы также оценили корреляцию вирусной нагрузки в стуле, сыворотке, ткани толстой кишки и количества инфицированных ЦМВ клеток в ткани толстой кишки.

В исследование были включены пациенты старше 18 лет с клиническим подозрением на ЦМВ-колит. Критерии клинического подозрения на ЦМВ-колит включали: i) наличие хотя бы одного из факторов риска, включая инфекцию вирусом иммунодефицита человека, трансплантацию паренхиматозных органов или гематологических стволовых клеток, гематологическое злокачественное новообразование, воспалительное заболевание кишечника, прием иммунодепрессантов или химиотерапию, и критическое состояние с множественными сопутствующими заболеваниями и ii) наличие симптомов со стороны желудочно-кишечного тракта, включая боль в животе, желудочно-кишечное кровотечение, диарею и кишечную непроходимость.

Всем участникам была проведена колоноскопия с биопсией ткани для окрашивания H&E и иммуногистохимия для ЦМВ (IHC-CMV). У пациентов с обнаружением либо цитомегалических клеток, либо клеток IHC-CMV диагностировали ЦМВ-колит. Два других образца ткани толстой кишки были отправлены на количественную ЦМВ-ПЦР (набор CMV R-gene®, предел обнаружения 450 копий/мл, Biomerieux, Франция). Пациенты, которые не могли выполнить колоноскопию и биопсию тканей, были исключены. Собирали количественную ЦМВ-ПЦР кала (набор CMV R-gene®, предел обнаружения 450 копий/мл, Biomerieux, Франция) и количественную ЦМВ-ПЦР сыворотки (Cobas® CMV, предел обнаружения 150 копий/мл, Roche, США). в течение семи дней после колоноскопии.