Próba iniekcji spermy (PICSI) na temat wskaźników poronień w przypadku wspomaganego poczęcia (PICSI)

1. WPROWADZENIE 1.1 Wprowadzenie Fizjologiczne docytoplazmatyczne wstrzyknięcie plemnika (PICSI) jest techniką stosowaną do selekcji zdrowych, dojrzałych plemników do zastosowania w leczeniu niepłodności w oparciu o ich fizjologiczną zdolność wiązania się z kwasem hialuronowym (HA), naturalnym związkiem występującym w organizmie. Związek między plemnikami a HA może być wykorzystany jako marker dojrzałości plemników i potencjału zapłodnienia; zasadę tę można zaobserwować in vitro za pomocą urządzenia do selekcji plemników PICSI. Płytka PICSI zawiera mikrokropki hialuronianu, z którymi wiążą się tylko dojrzałe plemniki i są one wybierane przez embriologa przed użyciem w procedurze wstrzyknięcia plemnika do cytoplazmy (ICSI).

   W niedawnym badaniu HABSelect zbadano wyniki leczenia po PICSI i chociaż nie stwierdzono wpływu na wskaźnik żywych urodzeń, w ich analizie wtórnej stwierdzono istotny związek między PICSI a zmniejszonym odsetkiem poronień w porównaniu z ICSI. Implikacje badania HABSelect zasługują na dalsze zbadanie, przy czym wskaźnik poronień oceniany jest jako główna miara wyniku.

   Ta randomizowana, kontrolowana próba dowodowa ma na celu zbadanie, czy PICSI jest obiecujący, co zasługiwałoby na ocenę w badaniu z pełną mocą, aby ocenić jego skuteczność jako zaawansowanej metody selekcji plemników w celu zmniejszenia częstości poronień. Kwalifikującymi się uczestnikami badania będą pacjentki poddawane leczeniu bezpłodności z wykorzystaniem ICSI, które wyraziły zgodę na PICSI. Pacjenci zostaną losowo przydzieleni do dwóch grup: grupa kontrolna otrzyma ICSI zgodnie ze standardowym protokołem, a grupa interwencyjna będzie miała dodatkową selekcję plemników poprzez wiązanie HA w szalce PICSI.

   1.2 Uzasadnienie Opracowano zaawansowane techniki selekcji plemników w celu poprawy wyników ART w celu wybrania najzdrowszych, dojrzałych i strukturalnie zdrowych plemników. Kluczowe znaczenie ma wybór najlepszych plemników do ICSI, jednak konwencjonalne metody przygotowania plemników, w tym gradienty gęstości, pływanie i proste płukanie, mają ograniczone możliwości selekcji plemników o dojrzałości i zmniejszonej fragmentacji DNA.

   Nawracające poronienia po leczeniu niepłodności wynikają głównie z nieznanych przyczyn, ale można je wiązać ze zwiększonymi nieprawidłowościami chromosomalnymi w zarodkach aneuploidalnych. Fizjologiczne docytoplazmatyczne wstrzyknięcie plemnika (PICSI) to zaawansowana metoda selekcji plemników, która selekcjonuje dojrzałe plemniki z niskim uszkodzeniem DNA przed wstrzyknięciem oocytów w procedurze ICSI. Wykazano, że PICSI skutkuje lepszym rozwojem zarodka i zmniejszeniem nieprawidłowości chromosomalnych. PICSI może być użytecznym narzędziem do zmniejszania częstości poronień po leczeniu niepłodności.

   W Wielkiej Brytanii istnieją restrykcyjne zasady określone przez grupy zlecające NHS (CCG) dotyczące dostępu do technik wspomaganego rozrodu, w przypadku których finansowana jest tylko ograniczona liczba cykli zapłodnienia in vitro, dlatego wyjątkowo ważne jest maksymalizowanie szans na przeniesienie zdolnego do życia zarodka co doprowadzi do pomyślnego porodu żywego.

   SMWFC ma docelowy KPI <20% dla wskaźnika poronień i niestety obecna liczba poronień po leczeniu ICSI wynosi 24%, czyli powyżej tego progu. Celem tego badania jest zbadanie, czy warto przeprowadzić większe badanie skuteczności, aby ustalić, czy PICSI zmniejsza częstość poronień i czy w związku z tym może zostać wprowadzony do praktyki.

2. CELE STUDIÓW

   2.1 Główny cel Ustalenie, czy jest jakikolwiek obiecujący wpływ fizjologicznej docytoplazmatycznej iniekcji plemnika (PICSI) na częstość poronień w porównaniu z konwencjonalną ICSI.

   2.2 Cel drugorzędny Zbadanie, czy istnieje jakikolwiek obiecujący wpływ fizjologicznej docytoplazmatycznej iniekcji plemnika (PICSI) na wskaźnik zapłodnienia, jakość i rozwój zarodka, wskaźnik ciąż klinicznych lub wskaźnik implantacji w porównaniu z konwencjonalnym ICSI.

   2.3 Pierwszorzędowy punkt końcowy/wynik Pierwszorzędowym punktem końcowym jest wskaźnik poronień, oznaczający liczbę utraconych ciąż po ciąży biochemicznej (wykrycie hcGH w moczu). Pierwotne zebrane dane wynikowe to ilościowe dane kategoryczne i przeanalizowane w statystycznym teście dokładnym Fishera.

   2.4 Drugorzędowy punkt końcowy/wynik

   Wyniki drugorzędowe, które zostaną porównane dla PICSI i ICSI:

   • Współczynnik zapłodnienia, zdefiniowany jako liczba 2PN na zapłodniony/wstrzyknięty oocyt.
   • Rozwój i jakość zarodków oceniano w drugiej i trzeciej dobie pod względem morfologii zarodków, stopnia rozdrobnienia, obecności wakuoli, symetrycznej wielkości blastomerów.
   • Rozwój i jakość blastocysty oceniano w dniu 5 i 6 zgodnie z systemem punktacji Gardnera i Schoolcrafta.
   • Wskaźnik implantacji, zdefiniowany jako liczba uderzeń serca płodu lub pęcherzyków ciążowych obserwowanych w 6-7 tygodniu ciąży podzielona przez liczbę przeniesionych zarodków.
   • Biochemiczny wskaźnik ciąż, wskazany przez wykrycie hcGH w moczu.
   • Wskaźnik ciąż klinicznych oparty na wykryciu bicia serca płodu lub obecności pęcherzyka płodowego w 6-7 tygodniu ciąży.
   • Współczynnik żywych urodzeń, jako liczba żywych urodzeń w ≥37 tygodniu ciąży na transfer zarodka.

3. PROJEKT BADANIA Badanie zostanie przeprowadzone jako pilotażowe badanie z randomizacją i grupą kontrolną, w ramach którego pacjenci zostaną losowo przydzieleni do grupy interwencji (PICSI) lub grupy kontrolnej (ICSI). Prosta randomizacja ma na celu wyeliminowanie wszelkich uprzedzeń i umożliwia prawdziwe porównanie grup z dodatkowym etapem fizjologicznej selekcji plemników w PICSI będącym czynnikiem różnicującym.

   Hipoteza zerowa:

   Nie ma związku między PICSI a zmniejszonym odsetkiem poronień w porównaniu z ICSI w Shropshire and Mid Wales Fertility Centre.

   Projekt badania:

   Badanie jest prospektywnym badaniem z randomizacją i grupą kontrolną, którego celem jest porównanie PICSI (interwencja) i standardowego ICSI (kontrola). Grupa ICSI jest odpowiednia jako kontrola w tym badaniu, więc jedyną różnicującą zmienną jest selekcja plemników przez wiązanie HA.

   Pary zostaną losowo przydzielone do leczenia standardowym ICSI lub dodatkowego PICSI. Wykorzystując wiązanie HA jako narzędzie do selekcji plemników, grupa interwencyjna przeprowadzi fizjologiczną selekcję plemników przed ICSI przy użyciu płytek PICSI, zgodnie z metodami zalecanymi przez ORIGIO. Tylko plemniki z ruchomym ogonkiem, ale bez ruchu do przodu, zostaną wybrane do użycia w ICSI. Wskaźnik zapłodnienia, rozwój zarodka, wskaźnik implantacji, wskaźnik ciąż klinicznych, wskaźnik poronień i wskaźnik żywych urodzeń zostaną porównane między dwiema procedurami.

   Stronniczość badacza:

   Badacz będzie miał dostęp do przydziału pacjentów do grup terapeutycznych, jednak zabiegi będą wykonywane przez niezależny personel przeszkolony przez praktyków ICSI.

   Wielkość próbki:

   Całkowita wielkość próby wyniesie 140. Badaną populacją będą pary przechodzące leczenie niepłodności metodą ICSI w Shropshire and Mid-Wales Fertility Center w Shrewsbury.

   Rekrutacja uczestników potrwa 6 miesięcy iw oparciu o to ograniczenie czasowe spodziewamy się 140 uczestników. Szacuje się, że ta wielkość próby jest odpowiednia dla tego badania na małą skalę i wykonalna na podstawie liczby zabiegów ICSI przeprowadzonych w Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre.

4. WARUNKI BADANIA Jest to jednoośrodkowe badanie przeprowadzone w Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre, które jest licencjonowane i monitorowane przez Urząd ds. Płodności Człowieka i Embriologii. Rekrutacja pacjentów i prowadzenie badań odbędzie się w Shropshire and Mid-Wale Fertility Centre. Interesującą populacją pacjentów są pary poddawane leczeniu bezpłodności przy użyciu ICSI w Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre, które jest placówką opieki trzeciego stopnia. Kwalifikującymi się uczestnikami będą pacjenci zgłaszający się na leczenie i zostaną zidentyfikowani przez personel kliniczny ośrodka, który ma dostęp do harmonogramu „nadchodzących zabiegów”.

Procedury PICSI i ICSI będą wykonywane w laboratorium embriologicznym przez wykwalifikowanych embriologów, którzy są również doświadczonymi praktykami ICSI. Zbieranie danych będzie odbywać się w Shropshire and Mid-Wales Fertility Center na chronionych hasłem bezpiecznych komputerach stacjonarnych w pliku bazy danych leczenia. Przetwarzanie i analiza danych odbywać się będzie z wykorzystaniem zanonimizowanych danych w bezpiecznym systemie NHS OneDrive.