Zkouška injekce spermií (PICSI) o míře potratů u asistovaného početí (PICSI)

1. ÚVOD 1.1 Pozadí Fyziologická intracytoplazmatická injekce spermie (PICSI) je technika používaná k výběru zdravých, zralých spermií pro použití při léčbě neplodnosti na základě jejich fyziologické schopnosti vázat se na kyselinu hyaluronovou (HA), přirozenou sloučeninu nacházející se v těle. Vztah mezi spermiemi a HA lze použít jako marker zralosti spermií a fertilizačního potenciálu, tento princip lze pozorovat in vitro pomocí zařízení pro selekci spermií PICSI. Miska PICSI obsahuje mikrotečky hyaluronanu, na které se vážou pouze zralé spermie a ty jsou vybrány embryologem před použitím v postupu intracytoplazmatické injekce spermie (ICSI).

   Nedávná studie HABSelect zkoumala léčebné výsledky po PICSI, a i když dospěli k závěru, že nemá žádný vliv na míru živě narozených dětí, ve své sekundární analýze zjistili významnou souvislost mezi PICSI a sníženou mírou potratů ve srovnání s ICSI. Důsledky studie HABSelect si zaslouží další prozkoumání, přičemž míra potratů je hodnocena jako primární měřítko výsledku.

   Tato randomizovaná kontrolovaná studie prokazující koncept si klade za cíl zjistit, zda PICSI vykazuje určitý příslib, který by si zasloužil hodnocení v plně výkonné studii, aby se posoudila její účinnost jako pokročilé metody výběru spermií pro snížení míry potratů. Způsobilými účastníky studie budou pacienti podstupující léčbu neplodnosti pomocí ICSI, kteří poskytli souhlas s PICSI. Pacienti budou náhodně rozděleni do dvou skupin: kontrolní skupina obdrží ICSI podle standardního protokolu a intervenční skupina bude mít další selekci spermií pomocí vazby HA v misce PICSI.

   1.2 Odůvodnění Pokročilé techniky výběru spermií byly vyvinuty pro zlepšení výsledků ART pro výběr nejzdravějších, zralých a strukturálně zdravých spermií. Je zásadní, aby byly pro ICSI vybrány nejlepší spermie, ale konvenční metody přípravy spermií, včetně gradientů hustoty, plavání a jednoduchého promytí, jsou omezené ve své schopnosti vybrat spermie se zralostí a sníženou fragmentací DNA.

   Opakované potraty po léčbě neplodnosti jsou způsobeny hlavně neznámými příčinami, ale mohou být spojeny se zvýšenými chromozomálními abnormalitami z aneuploidních embryí. Fyziologická intracytoplazmatická injekce spermií (PICSI) je pokročilá metoda selekce spermií, která vybírá zralé spermie s nízkým poškozením DNA před injekcí oocytů v postupu ICSI. Ukázalo se, že PICSI vede k lepšímu vývoji embryí a snížení chromozomálních abnormalit. PICSI může být užitečným nástrojem pro snížení míry potratů po léčbě neplodnosti.

   Ve Spojeném království existují restriktivní politiky stanovené skupinami pro klinické uvádění do provozu (CCG) NHS ohledně přístupu k technikám asistované reprodukce, kde je financován pouze omezený počet cyklů IVF, takže je mimořádně důležité maximalizovat šance na přenos životaschopného embrya. což povede k úspěšnému porodu.

   SMWFC má cíl KPI <20 % pro míru potratů a bohužel aktuální údaj pro potraty po léčbě ICSI je 24 %, což je nad touto hranicí. Účelem této studie je prozkoumat, zda stojí za to provést rozsáhlejší studii účinnosti, aby se zjistilo, zda PICSI snižuje míru potratů, a mohla by být proto zavedena do praxe.

2. STUDIJNÍ CÍLE

   2.1 Primární cíl Zjistit, zda existuje nějaký příslib účinku fyziologické intracytoplazmatické injekce spermií (PICSI) na míru potratů ve srovnání s konvenční ICSI.

   2.2 Sekundární cíl Zjistit, zda existuje nějaký příslib účinku fyziologické intracytoplazmatické injekce spermií (PICSI) na míru oplodnění, kvalitu a vývoj embrya, míru klinického těhotenství nebo míru implantace ve srovnání s konvenční ICSI.

   2.3 Primární cíl/výsledek Primárním výstupním měřítkem je míra potratů, což znamená počet těhotenských ztrát po biochemickém těhotenství (detekce hcGH v moči). Primární výsledná data jsou kvantitativní kategorická data a analyzována ve statistickém Fisherově exaktním testu.

   2.4 Sekundární cíl/výsledek

   Sekundární výsledky, které budou porovnány pro PICSI a ICSI:

   • Míra oplodnění, definovaná jako počet 2 PN na oocyt inseminovaný/injikovaný.
   • Vývoj a kvalita embrya hodnocena druhý a třetí den z hlediska morfologie embryí, stupně fragmentace, přítomnosti vakuol, symetrické velikosti blastomer.
   • Vývoj a kvalita blastocyst hodnoceny 5. a 6. den podle skórovacího systému Gardner a Schoolcraft.
   • Rychlost implantace, definovaná jako počet srdečních tepů plodu nebo gestačních váčků pozorovaných v 6-7 týdnech těhotenství dělený počtem přenesených embryí.
   • Biochemická míra těhotenství, indikovaná detekcí hcGH v moči.
   • Klinická míra těhotenství založená na detekci srdečního tepu plodu nebo přítomnosti fetálního vaku v 6.–7. týdnu těhotenství.
   • Míra živě narozených dětí jako počet živě narozených dětí ve ≥37. týdnu těhotenství na přenos embrya.

3. NÁVRH STUDIE Studie bude provedena jako pilotní randomizovaná kontrolovaná studie, přičemž pacienti budou náhodně rozděleni buď do intervenční (PICSI) skupiny nebo kontrolní (ICSI) skupiny. Jednoduchá randomizace má za cíl eliminovat jakékoli zkreslení a umožňuje skutečné srovnání skupin, přičemž odlišným faktorem je další krok fyziologického výběru spermií v PICSI.

   Nulová hypotéza:

   Neexistuje žádná souvislost mezi PICSI a sníženou mírou potratů ve srovnání s ICSI v Shropshire and Mid Wales Fertility Centre.

   Studovat design:

   Studie je prospektivní randomizovaně kontrolovaná studie navržená ke srovnání PICSI (intervence) a standardní ICSI (kontrola). Skupina ICSI je v této studii vhodná jako kontrola, takže jedinou odlišnou proměnnou je selekce spermií na základě vazby HA.

   Páry budou náhodně přiřazeny k léčbě standardní ICSI nebo k dalšímu PICSI. Použitím vazby HA jako nástroje pro selekci spermatu bude mít intervenční skupina fyziologicky vybrané spermie před ICSI pomocí misek PICSI podle metod doporučených společností ORIGIO. Pro použití v ICSI budou vybrány pouze spermie s pohyblivým ocasem, ale bez pohybu dopředu. Mezi těmito dvěma postupy bude porovnána míra oplodnění, vývoj embrya, míra implantace, míra klinického těhotenství, míra potratů a míra porodnosti.

   Zaujatost výzkumníka:

   Student výzkumu nebude zaslepený, pokud jde o přidělování pacientů do léčebných skupin, léčbu však bude provádět nezávislý personál, který je vyškolenými praktiky ICSI.

   Velikost vzorku:

   Celková velikost vzorku bude 140. Zkoumanou populací budou páry podstupující léčbu neplodnosti pomocí ICSI v Shropshire and Mid-Wales Fertility Center v Shrewsbury.

   Nábor účastníků bude probíhat po dobu 6 měsíců a na základě tohoto časového omezení očekáváme dosažení 140 účastníků. Tato velikost vzorku se odhaduje jako vhodná pro tuto malou studii a proveditelná na základě počtu ošetření ICSI provedených v Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre.

4. PROSTŘEDÍ STUDIE Toto je studie jednoho centra, prováděná v Centru plodnosti Shropshire a Mid-Wales, která je licencována a monitorována Úřadem pro oplodnění a embryologii člověka. Nábor pacientů a provádění studie bude probíhat v Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre. Zájmovou populací pacientů jsou páry podstupující léčbu neplodnosti pomocí ICSI ve Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre, což je zařízení terciární péče. Způsobilými účastníky budou pacienti přicházející na léčbu a budou identifikováni klinickým personálem centra, který má přístup k plánu „nadcházejících léčebných postupů“.

Procedury PICSI a ICSI budou probíhat v embryologické laboratoři kvalifikovanými embryology, kteří jsou rovněž zkušenými praktiky ICSI. Sběr dat bude probíhat v Shropshire and Mid-Wales Fertility Center na heslem chráněných zabezpečených stolních počítačích v rámci souboru databáze léčby. Zpracování a analýza dat bude prováděna pomocí anonymizovaných dat v zabezpečeném systému NHS OneDrive.