Испытание инъекции спермы (PICSI) на частоту выкидышей при вспомогательном зачатии (PICSI)

1. ВВЕДЕНИЕ 1.1 Предпосылки Физиологическая интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (PICSI) — это метод, используемый для отбора здоровых, зрелых сперматозоидов для использования в лечении бесплодия на основе их физиологической способности связываться с гиалуроновой кислотой (ГК), естественным соединением, присутствующим в организме. Взаимосвязь между сперматозоидами и НА может использоваться в качестве маркера зрелости сперматозоидов и способности к оплодотворению; этот принцип можно наблюдать in vitro с помощью устройства для отбора сперматозоидов PICSI. Чашка PICSI содержит микроточки гиалуронана, с которыми связываются только зрелые сперматозоиды, и они выбираются эмбриологом перед использованием в процедуре интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов (ИКСИ).

   В недавнем исследовании HABSelect изучались результаты лечения после PICSI, и, хотя они пришли к выводу об отсутствии влияния на коэффициент живорождения, во вторичном анализе была обнаружена значительная связь между PICSI и снижением частоты выкидышей по сравнению с ICSI. Последствия исследования HABSelect заслуживают дальнейшего изучения, при этом частота выкидышей оценивается как первичный критерий исхода.

   Это рандомизированное контролируемое исследование для подтверждения концепции направлено на то, чтобы выяснить, демонстрирует ли PICSI некоторые перспективы, которые заслуживают оценки в полнофункциональном исследовании для оценки его эффективности в качестве передового метода отбора сперматозоидов для снижения частоты выкидышей. Приемлемыми участниками исследования будут пациенты, проходящие лечение бесплодия с помощью ИКСИ, давшие согласие на проведение PICSI. Пациенты будут случайным образом разделены на две группы: контрольная группа получит ИКСИ по стандартному протоколу, а группа вмешательства будет иметь дополнительный отбор сперматозоидов путем связывания ГК в чашке PICSI.

   1.2 Обоснование Для улучшения результатов ВРТ были разработаны передовые методы отбора сперматозоидов для отбора наиболее здоровых, зрелых и структурно здоровых сперматозоидов. Крайне важно, чтобы для ИКСИ отбирались лучшие сперматозоиды, однако традиционные методы подготовки сперматозоидов, включая градиенты плотности, плавание и простую промывку, ограничены в своих возможностях отбора зрелых сперматозоидов и сниженной фрагментации ДНК.

   Повторяющиеся выкидыши после лечения бесплодия в основном возникают по неизвестным причинам, но могут быть связаны с увеличением хромосомных аномалий у анеуплоидных эмбрионов. Физиологическая интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (PICSI) — это усовершенствованный метод отбора сперматозоидов, который отбирает зрелые сперматозоиды с низким уровнем повреждения ДНК перед инъекцией ооцитов в процедуре ICSI. Было показано, что PICSI приводит к лучшему развитию эмбриона и уменьшению хромосомных аномалий. PICSI может быть полезным инструментом для снижения частоты выкидышей после лечения бесплодия.

   В Соединенном Королевстве существует ограничительная политика, установленная группами клинического ввода в эксплуатацию NHS (CCG) в отношении доступа к вспомогательным репродуктивным методам, где финансируется только ограниченное количество циклов ЭКО, поэтому исключительно важно максимизировать шансы переноса жизнеспособного эмбриона. что приведет к успешному живорождению.

   SMWFC имеет цель KPI <20% для частоты выкидышей, и, увы, текущий показатель выкидышей после лечения ICSI составляет 24%, что выше этого порога. Целью данного исследования является выяснить, стоит ли проводить более масштабное исследование эффективности, чтобы установить, снижает ли PICSI частоту выкидышей и, следовательно, может ли она быть внедрена в практику.

2. ЦЕЛИ ИССЛЕДОВАНИЯ

   2.1 Основная цель Установить, есть ли какое-либо обещание влияния физиологической интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов (ПИКСИ) на частоту выкидышей по сравнению с обычной ИКСИ.

   2.2 Второстепенная цель Исследовать, есть ли какое-либо обещание влияния физиологической интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ПИКСИ) на частоту оплодотворения, качество и развитие эмбриона, частоту наступления клинической беременности или частоту имплантации по сравнению с обычной ИКСИ.

   2.3 Первичная конечная точка/результат Первичным критерием исхода является частота выкидышей, то есть число невынашиваний беременности после биохимической беременности (обнаружение ХГЧ в моче). Собранные первичные исходные данные представляют собой количественные категориальные данные и анализируются с помощью статистического точного критерия Фишера.

   2.4 Вторичная конечная точка/исход

   Вторичные результаты, которые будут сравниваться для PICSI и ICSI:

   • Частота оплодотворения, определяемая как количество 2PN на осемененный/инъецированный ооцит.
   • Развитие и качество эмбрионов оценивали на второй и третий день по морфологии эмбрионов, степени фрагментации, наличию вакуолей, симметричному размеру бластомеров.
   • Развитие и качество бластоцисты оценивали на 5-й и 6-й день по шкале Гарднера и Скулкрафта.
   • Частота имплантации, определяемая как количество сердечных сокращений плода или плодного яйца, наблюдаемое на 6-7 неделе беременности, деленное на количество перенесенных эмбрионов.
   • Биохимическая частота наступления беременности, определяемая обнаружением в моче ХГЧ.
   • Клиническая частота наступления беременности, основанная на обнаружении сердцебиения плода или наличии плодного яйца на 6-7 неделе беременности.
   • Коэффициент живорождения, как число живорождений на сроке беременности ≥37 недель на перенос эмбриона.

3. ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование будет проводиться как пилотное рандомизированное контролируемое исследование, в котором пациенты будут случайным образом распределены либо в группу вмешательства (PICSI), либо в контрольную группу (ICSI). Простая рандомизация направлена ​​на устранение какой-либо систематической ошибки и позволяет провести истинное сравнение групп с дополнительным этапом отбора физиологических сперматозоидов в PICSI, являющимся разным фактором.

   Нулевая гипотеза:

   Нет никакой связи между PICSI и снижением частоты выкидышей по сравнению с ICSI в Центре плодородия Шропшира и Среднего Уэльса.

   Дизайн исследования:

   Исследование представляет собой проспективное рандомизированное контролируемое исследование, предназначенное для сравнения PICSI (вмешательство) и стандартное ICSI (контроль). Группа ИКСИ подходит в качестве контроля в этом исследовании, поэтому единственной отличающейся переменной является отбор сперматозоидов путем связывания ГК.

   Пары будут случайным образом распределены для получения лечения стандартной ИКСИ или дополнительного PICSI. Используя связывание ГК в качестве инструмента отбора сперматозоидов, группа вмешательства будет проводить физиологический отбор сперматозоидов перед ИКСИ с использованием чашек PICSI в соответствии с методами, рекомендованными ORIGIO. Для использования в ИКСИ будут отобраны только сперматозоиды с подвижным хвостом, но без движения вперед. Частота оплодотворения, развитие эмбриона, частота имплантации, частота клинической беременности, частота выкидышей и частота рождаемости будут сравниваться между двумя процедурами.

   Предвзятость исследователя:

   Студенту-исследователю не будет известно о распределении пациентов по группам лечения, однако лечение будет проводиться независимым персоналом, прошедшим обучение в области ИКСИ.

   Размер образца:

   Общий размер выборки составит 140. Исследуемая популяция будет состоять из пар, проходящих лечение бесплодия с помощью ИКСИ в Центре лечения бесплодия Шропшира и Среднего Уэльса в Шрусбери.

   Набор участников будет происходить в течение 6 месяцев, и, исходя из этого временного ограничения, мы ожидаем набрать 140 участников. Этот размер выборки считается подходящим для этого небольшого исследования и осуществимым, исходя из количества процедур ИКСИ, проведенных в Центре лечения бесплодия в Шропшире и Среднем Уэльсе.

4. УСЛОВИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ Это исследование проводится в одном центре в Центре репродуктивной медицины Шропшира и Среднего Уэльса, лицензированном и контролируемом Управлением по оплодотворению человека и эмбриологии. Набор пациентов и проведение исследования будут проходить в Центре фертильности Шропшира и Среднего Уэльса. Интересующая популяция пациентов — это пары, проходящие лечение бесплодия с помощью ИКСИ в Центре лечения бесплодия Шропшира и Среднего Уэльса, который является учреждением третичной помощи. Приемлемыми участниками будут пациенты, приходящие на лечение, и они будут определены клиническим персоналом в центре, у которого есть доступ к расписанию «предстоящих процедур».

Процедуры PICSI и ICSI будут проводиться в эмбриологической лаборатории квалифицированными эмбриологами, которые также являются опытными практиками ICSI. Сбор данных будет осуществляться в Центре плодородия Шропшира и Среднего Уэльса на защищенных паролем безопасных настольных компьютерах в файле базы данных лечения. Обработка и анализ данных будут осуществляться с использованием обезличенных данных в защищенной системе NHS OneDrive.