Um teste de injeção de esperma (PICSI) nas taxas de aborto espontâneo na concepção assistida (PICSI)

1. INTRODUÇÃO 1.1 Antecedentes A injeção fisiológica intracitoplasmática de espermatozoides (PICSI) é uma técnica usada para selecionar espermatozóides maduros e saudáveis ​​para uso no tratamento de infertilidade com base em sua capacidade fisiológica de se ligar ao ácido hialurônico (AH), um composto natural encontrado no corpo. A relação entre esperma e HA pode ser usada como um marcador de maturidade espermática e potencial de fertilização; este princípio pode ser observado in vitro usando um dispositivo de seleção de esperma PICSI. A placa PICSI contém micropontos de hialuronano, aos quais apenas espermatozóides maduros se ligam e estes são selecionados pelo embriologista antes de serem usados ​​no procedimento de injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI).

   O recente estudo HABSelect investigou os resultados do tratamento após a PICSI e, embora não tenham concluído nenhum efeito na taxa de nascidos vivos, encontraram uma associação significativa em sua análise secundária entre PICSI e redução da taxa de aborto espontâneo em comparação com ICSI. As implicações do estudo HABSelect merecem ser mais exploradas com a taxa de aborto avaliada como uma medida de desfecho primário.

   Este estudo randomizado controlado de prova de conceito visa investigar se o PICSI mostra alguma promessa que mereça avaliação em um estudo totalmente poderoso para avaliar sua eficácia como um método avançado de seleção de esperma para a redução da taxa de aborto espontâneo. Os participantes elegíveis do estudo serão pacientes submetidos a tratamento de fertilidade usando ICSI, que forneceram consentimento para PICSI. Os pacientes serão alocados aleatoriamente em dois grupos: o grupo controle receberá ICSI de acordo com o protocolo padrão e o grupo intervenção terá seleção de esperma adicional por ligação de HA em uma placa PICSI.

   1.2 Justificativa Técnicas avançadas de seleção de esperma foram desenvolvidas para melhorar os resultados do ART para selecionar o esperma mais saudável, maduro e estruturalmente saudável. É crucial que os melhores espermatozóides sejam selecionados para ICSI, mas os métodos convencionais de preparação de esperma, incluindo gradientes de densidade, swim-up e lavagem simples, são limitados em sua capacidade de selecionar espermatozóides com maturidade e fragmentação de DNA reduzida.

   Os abortos espontâneos recorrentes após o tratamento de infertilidade são principalmente resultantes de causas desconhecidas, mas podem estar relacionados com o aumento de anormalidades cromossômicas de embriões aneuplóides. A Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides Fisiológica (PICSI) é um método avançado de seleção de espermatozóides que seleciona espermatozóides maduros com baixo dano ao DNA antes de injetar os oócitos no procedimento de ICSI. PICSI demonstrou resultar em melhor desenvolvimento do embrião e redução de anormalidades cromossômicas. A PICSI pode ser uma ferramenta útil para reduzir a taxa de aborto após o tratamento de infertilidade.

   No Reino Unido, existem políticas restritivas estabelecidas pelos grupos de comissionamento clínico (CCGs) do NHS sobre o acesso a técnicas de reprodução assistida, onde apenas um número limitado de ciclos de fertilização in vitro são financiados, por isso é extremamente importante maximizar as chances de transferência de um embrião viável o que levará a um nascimento com sucesso.

   O SMWFC tem uma meta de KPI de <20% para taxa de aborto espontâneo e, infelizmente, o número atual de abortos espontâneos após o tratamento com ICSI é de 24%, que está acima desse limite. O objetivo deste estudo é investigar se vale a pena fazer um estudo maior de eficácia para estabelecer se a PICSI reduz a taxa de aborto espontâneo e, portanto, pode ser introduzida na prática.

2. OBJETIVOS DO ESTUDO

   2.1 Objetivo Primário Estabelecer se há alguma promessa de efeito da Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides Fisiológicos (PICSI) na taxa de aborto espontâneo em comparação com a ICSI convencional.

   2.2 Objetivo Secundário Investigar se há alguma promessa de efeito da Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides Fisiológicos (PICSI) na taxa de fertilização, qualidade e desenvolvimento do embrião, taxa de gravidez clínica ou taxa de implantação em comparação com a ICSI convencional.

   2.3 Desfecho primário/resultado O desfecho primário é a taxa de aborto espontâneo, ou seja, o número de perdas gestacionais após gravidez bioquímica (detecção de hcGH urinário). Os dados de resultados primários coletados são dados categóricos quantitativos e analisados ​​em um teste estatístico exato de Fisher.

   2.4 Desfecho/resultado secundário

   Resultados secundários que serão comparados para PICSI e ICSI:

   • Taxa de fertilização, definida como o número de 2PNs por oócito inseminado/injetado.
   • Desenvolvimento e qualidade do embrião avaliados no segundo e terceiro dia em termos de morfologia dos embriões, grau de fragmentação, presença de vacúolos, tamanho simétrico dos blastômeros.
   • Desenvolvimento e qualidade do blastocisto avaliados no dia 5 e 6 de acordo com o sistema de pontuação de Gardner e Schoolcraft.
   • Taxa de implantação, definida como o número de batimentos cardíacos fetais ou sacos gestacionais observados em 6-7 semanas de gestação dividido pelo número de embriões transferidos.
   • Taxa de gravidez bioquímica, indicada pela detecção de hcGH urinário.
   • Taxa de gravidez clínica com base na detecção de batimentos cardíacos fetais ou na presença de saco fetal em 6-7 semanas de gestação.
   • Taxa de nascidos vivos, como o número de nascidos vivos com ≥37 semanas de gestação por transferência de embrião.

3. DESENHO DO ESTUDO O estudo será realizado como um ensaio piloto randomizado-controlado, em que os pacientes serão alocados aleatoriamente para o grupo de intervenção (PICSI) ou grupo de controle (ICSI). A randomização simples visa eliminar qualquer viés e permite uma comparação real dos grupos com a etapa adicional de seleção fisiológica de espermatozoides no PICSI sendo o fator diferenciador.

   hipótese nula:

   Não há associação entre PICSI e redução da taxa de aborto em comparação com ICSI no Centro de Fertilidade de Shropshire e Mid Wales.

   Design de estudo:

   O estudo é um estudo prospectivo randomizado controlado projetado para comparar PICSI (intervenção) e ICSI padrão (controle). O grupo ICSI é adequado como controle neste estudo, portanto, a única variável diferente é a seleção de esperma por ligação a HA.

   Os casais serão designados aleatoriamente para receber tratamento com ICSI padrão ou receber PICSI adicional. Usando a ligação HA como uma ferramenta de seleção de esperma, o grupo de intervenção terá esperma selecionado fisiologicamente antes da ICSI usando placas PICSI, seguindo os métodos recomendados pela ORIGIO. Apenas espermatozoides com cauda em movimento, mas sem movimento para frente, serão selecionados para uso no ICSI. A taxa de fertilização, desenvolvimento do embrião, taxa de implantação, taxa de gravidez clínica, taxa de aborto espontâneo e taxa de nascidos vivos serão comparadas entre os dois procedimentos.

   Viés do pesquisador:

   O estudante de pesquisa não será cegado quanto à alocação de pacientes em grupos de tratamento; no entanto, os tratamentos serão realizados por funcionários independentes que são profissionais treinados em ICSI.

   Tamanho da amostra:

   O tamanho total da amostra será de 140. A população investigada será de casais submetidos a tratamento de infertilidade com ICSI no Shropshire and Mid-Wales Fertility Center em Shrewsbury.

   O recrutamento de participantes ocorrerá ao longo de 6 meses e, com base nesse limite de tempo, esperamos atingir 140 participantes. Estima-se que o tamanho da amostra seja apropriado para este estudo de pequena escala e viável com base no número de tratamentos de ICSI realizados no Centro de Fertilidade de Shropshire e Mid-Wales.

4. LOCAL DO ESTUDO Este é um estudo de centro único, realizado no Centro de Fertilidade de Shropshire e Mid-Wales, que é licenciado e monitorado pela Autoridade de Fertilização Humana e Embriologia. O recrutamento de pacientes e a condução do estudo serão realizados no Centro de Fertilidade de Shropshire e Mid-Wales. A população de pacientes de interesse são casais submetidos a tratamento de fertilidade usando ICSI no Centro de Fertilidade de Shropshire e Mid-Wales, que é um ambiente de atendimento terciário. Os participantes elegíveis serão pacientes que chegam para tratamento e serão identificados pela equipe clínica do centro que tem acesso ao cronograma de 'próximos tratamentos'.

Os procedimentos PICSI e ICSI serão realizados no laboratório de embriologia por embriologistas qualificados que também são praticantes experientes de ICSI. A coleta de dados ocorrerá no Centro de Fertilidade de Shropshire e Mid-Wales em computadores desktop seguros protegidos por senha em um arquivo de banco de dados de tratamento. O processamento e a análise de dados serão realizados usando os dados anonimizados no sistema seguro NHS OneDrive.