Una prova di iniezione di sperma (PICSI) sui tassi di aborto spontaneo nella concezione assistita (PICSI)

1. INTRODUZIONE 1.1 Contesto L'iniezione intracitoplasmatica fisiologica di spermatozoi (PICSI) è una tecnica utilizzata per selezionare spermatozoi sani e maturi da utilizzare nel trattamento dell'infertilità in base alla loro capacità fisiologica di legarsi all'acido ialuronico (HA), un composto naturale presente nel corpo. La relazione tra spermatozoi e HA può essere utilizzata come indicatore della maturità degli spermatozoi e del potenziale fecondante; questo principio può essere osservato in vitro utilizzando un dispositivo di selezione dello sperma PICSI. Il piatto PICSI contiene micropunti di acido ialuronico, a cui si legano solo gli spermatozoi maturi e che vengono selezionati dall'embriologo prima dell'uso nella procedura di iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI).

   Il recente studio HABSelect ha esaminato i risultati del trattamento in seguito a PICSI e, sebbene non abbiano concluso alcun effetto sul tasso di nati vivi, hanno trovato un'associazione significativa nella loro analisi secondaria tra PICSI e tasso di aborto ridotto rispetto a ICSI. Le implicazioni dello studio HABSelect meritano di essere esplorate ulteriormente con il tasso di aborto spontaneo valutato come misura di esito primaria.

   Questo trial randomizzato-controllato proof-of-concept mira a indagare se il PICSI mostra qualche promessa che meriterebbe una valutazione in uno studio a piena potenza per valutare la sua efficacia come metodo avanzato di selezione dello sperma per la riduzione del tasso di aborto spontaneo. I partecipanti allo studio ammissibili saranno pazienti sottoposti a trattamento per la fertilità utilizzando ICSI, che hanno fornito il consenso per PICSI. I pazienti verranno assegnati in modo casuale a due gruppi: il gruppo di controllo riceverà ICSI secondo il protocollo standard e il gruppo di intervento avrà una selezione aggiuntiva di spermatozoi mediante legame HA in un piatto PICSI.

   1.2 Razionale Tecniche avanzate di selezione dello sperma sono state sviluppate per migliorare i risultati della ART per selezionare lo sperma più sano, maturo e strutturalmente sano. È fondamentale selezionare gli spermatozoi migliori per l'ICSI, tuttavia i metodi convenzionali di preparazione degli spermatozoi, inclusi gradienti di densità, swim-up e lavaggio semplice, sono limitati nella loro capacità di selezionare gli spermatozoi con maturità e ridotta frammentazione del DNA.

   Gli aborti ricorrenti dopo il trattamento dell'infertilità derivano principalmente da cause sconosciute, ma possono essere collegati a un aumento delle anomalie cromosomiche da embrioni aneuploidi. L'iniezione intracitoplasmatica fisiologica di spermatozoi (PICSI) è un metodo avanzato di selezione dello sperma che seleziona lo sperma maturo con un basso danno al DNA prima dell'iniezione degli ovociti nella procedura ICSI. È stato dimostrato che PICSI determina un migliore sviluppo dell'embrione e una riduzione delle anomalie cromosomiche. PICSI può essere uno strumento utile per ridurre il tasso di aborto spontaneo dopo il trattamento dell'infertilità.

   Nel Regno Unito, esistono politiche restrittive stabilite dai gruppi di commissione clinica (CCG) del NHS sull'accesso alle tecniche di riproduzione assistita, dove viene finanziato solo un numero limitato di cicli di fecondazione in vitro, quindi è estremamente importante massimizzare le possibilità di trasferire un embrione vitale che porterà a un parto vivo di successo.

   L'SMWFC ha un obiettivo KPI di <20% per il tasso di aborto spontaneo e purtroppo la cifra attuale per gli aborti spontanei dopo il trattamento con ICSI è del 24%, che è al di sopra di questa soglia. Lo scopo di questo studio è indagare se valga la pena fare uno studio più ampio sull'efficacia per stabilire se il PICSI riduce il tasso di aborto spontaneo e potrebbe quindi essere introdotto nella pratica.

2. OBIETTIVI DI STUDIO

   2.1 Obiettivo primario Stabilire se vi è qualche promessa di un effetto dell'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi fisiologici (PICSI) sul tasso di aborto spontaneo rispetto all'ICSI convenzionale.

   2.2 Obiettivo secondario Indagare se vi è qualche promessa di effetto dell'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi fisiologici (PICSI) sul tasso di fecondazione, sulla qualità e sullo sviluppo dell'embrione, sul tasso di gravidanza clinica o sul tasso di impianto rispetto all'ICSI convenzionale.

   2.3 Endpoint/risultato primario La misura del risultato primario è il tasso di aborto spontaneo, ovvero il numero di aborti spontanei a seguito di una gravidanza biochimica (rilevamento dell'hcGH urinario). I dati sugli esiti primari raccolti sono dati categorici quantitativi e analizzati in un test esatto di Fisher statistico.

   2.4 Endpoint/risultato secondario

   Risultati secondari che verranno confrontati per PICSI e ICSI:

   • Tasso di fecondazione, definito come il numero di 2PN per ovocita inseminato/iniettato.
   • Sviluppo e qualità dell'embrione valutati il ​​secondo e terzo giorno in termini di morfologia degli embrioni, grado di frammentazione, presenza di vacuoli, dimensione simmetrica dei blastomeri.
   • Sviluppo e qualità della blastocisti valutati il ​​giorno 5 e 6 secondo il sistema di punteggio di Gardner e Schoolcraft.
   • Tasso di impianto, definito come il numero di battiti cardiaci fetali o sacchi gestazionali osservati a 6-7 settimane di gestazione diviso per il numero di embrioni trasferiti.
   • Tasso di gravidanza biochimica, indicato dal rilevamento dell'hcGH urinario.
   • Tasso di gravidanza clinica basato sul rilevamento di un battito cardiaco fetale o sulla presenza di sacco fetale a 6-7 settimane di gestazione.
   • Tasso di nati vivi, come il numero di nati vivi a ≥37 settimane di gestazione per trasferimento di embrioni.

3. DISEGNO DELLO STUDIO Lo studio sarà condotto come uno studio pilota randomizzato-controllato, in base al quale i pazienti saranno assegnati in modo casuale al gruppo di intervento (PICSI) o al gruppo di controllo (ICSI). La semplice randomizzazione mira a eliminare qualsiasi pregiudizio e consente un vero confronto dei gruppi con il passaggio aggiuntivo della selezione fisiologica degli spermatozoi in PICSI come fattore di differenza.

   Ipotesi nulla:

   Non vi è alcuna associazione tra PICSI e tasso di aborto ridotto rispetto all'ICSI presso lo Shropshire and Mid Wales Fertility Centre.

   Disegno dello studio:

   Lo studio è uno studio prospettico randomizzato controllato progettato per confrontare PICSI (intervento) e ICSI standard (controllo). Il gruppo ICSI è adatto come controllo in questo studio, quindi l'unica variabile diversa è la selezione degli spermatozoi mediante legame HA.

   Le coppie verranno assegnate in modo casuale a ricevere un trattamento con ICSI standard o ricevere PICSI aggiuntivi. Utilizzando il legame HA come strumento di selezione dello sperma, il gruppo di intervento avrà lo sperma selezionato fisiologicamente prima dell'ICSI utilizzando piatti PICSI, seguendo i metodi raccomandati da ORIGIO. Solo gli spermatozoi con una coda mobile ma senza movimento in avanti saranno selezionati per l'uso in ICSI. Il tasso di fecondazione, lo sviluppo dell'embrione, il tasso di impianto, il tasso di gravidanza clinica, il tasso di aborto spontaneo e il tasso di nati vivi saranno confrontati tra le due procedure.

   Bias del ricercatore:

   Lo studente ricercatore sarà aperto all'assegnazione dei pazienti ai gruppi di trattamento, tuttavia, i trattamenti saranno eseguiti da personale indipendente che è formato da professionisti ICSI.

   Misura di prova:

   La dimensione totale del campione sarà 140. La popolazione oggetto di indagine sarà costituita da coppie sottoposte a trattamento dell'infertilità con ICSI presso lo Shropshire and Mid-Wales Fertility Center di Shrewsbury.

   Il reclutamento dei partecipanti avverrà nell'arco di 6 mesi e sulla base di questo vincolo di tempo prevediamo di raggiungere 140 partecipanti. Si stima che questa dimensione del campione sia appropriata per questo studio su piccola scala e fattibile in base al numero di trattamenti ICSI eseguiti presso lo Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre.

4. IMPOSTAZIONE DELLO STUDIO Si tratta di uno studio in un unico centro, condotto presso lo Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre, autorizzato e monitorato dalla Human Fertilization and Embryology Authority. Il reclutamento dei pazienti e la conduzione dello studio si svolgeranno presso lo Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre. La popolazione di pazienti di interesse è costituita da coppie sottoposte a trattamento per la fertilità mediante ICSI presso lo Shropshire and Mid-Wales Fertility Centre, che è un ambiente di assistenza terziaria. I partecipanti idonei saranno pazienti che si sottopongono al trattamento e saranno identificati dal personale clinico del centro che avrà accesso al programma dei "trattamenti imminenti".

Le procedure PICSI e ICSI si svolgeranno nel laboratorio di embriologia da embriologi qualificati che sono anche professionisti ICSI esperti. La raccolta dei dati avverrà presso lo Shropshire and Mid-Wales Fertility Center su computer desktop sicuri protetti da password all'interno di un file di database di trattamento. L'elaborazione e l'analisi dei dati saranno effettuate utilizzando i dati anonimizzati sul sistema sicuro NHS OneDrive.