Skuteczność probiotyków Bacillus Spore w zmniejszaniu zaparć, anoreksji i powolnego przyrostu masy ciała u dzieci

Niedożywienie dzieci stanowi palący problem zdrowia publicznego, szczególnie wśród dzieci poniżej 5 roku życia, wpływając na rozwój fizyczny, umysłowy i motoryczny, prowadząc do chronicznych problemów w życiu dorosłym i przyszłych pokoleniach. W raporcie UNICEF, WHO i Banku Światowego (marzec 2020 r.) podkreślono alarmujące wskaźniki niedożywienia na świecie, przy czym 144,0 mln dzieci poniżej 5 roku życia doświadcza niedożywienia, w tym zahamowania wzrostu (47,0 mln) i poważnego niedożywienia (14,3 mln). Największy ciężar ponoszą kraje o niższych średnich dochodach, w których na całym świecie występuje dwie trzecie dzieci z karłowatością i trzy czwarte wyniszczonych dzieci. W Wietnamie (dane za 2020 r.) 19,5% dzieci poniżej 5 roku życia ma zahamowanie wzrostu, 11,6% ma niedowagę, a 4,7% jest wyniszczone. Jednocześnie zaparcia stanowią rosnący problem zdrowotny w Azji i na całym świecie, dotykający dzieci nawet w gospodarkach rozwiniętych. Zaparcia czynnościowe są powszechne u dzieci (12-28%). W Wietnamie 24,6% dzieci w wieku 3–5 lat cierpi na zaparcia, osiągając szczytowy odsetek 54,9% między 36 a 48 miesiącem życia. Nieleczone zaparcia powodują poważne powikłania fizyczne, psychiczne i społeczno-ekonomiczne, takie jak zapalenie przewodu pokarmowego, anoreksja i zaburzenia wchłaniania składników odżywczych. Anoreksja, występująca u dzieci, wpływa na wchłanianie składników odżywczych, wzrost i wzrost. U dzieci z anoreksją ryzyko niedożywienia i zahamowania wzrostu jest 2,5–3 razy wyższe. Dzieci cierpiące na niedożywienie i zaburzenia trawienia borykają się z upośledzoną produkcją enzymów, utratą składników odżywczych i dysbiozą jelit, co powoduje powolny przyrost masy ciała. Niedożywione dzieci z obniżoną odpornością stają się bardziej podatne na choroby, zaostrzając anoreksję i tworząc problematyczny cykl. W ostatnich latach uwagę badaczy przyciągnęła rola probiotyków w zdrowiu i chorobach człowieka. Może to częściowo wynikać z doskonałej aktywności probiotyków w zapobieganiu i łagodzeniu chorób. Obecnie badania nad probiotykami skupiają się głównie na leczeniu chorób przewodu pokarmowego niektórymi tradycyjnymi probiotykami. Jednakże pojawia się problem, gdy dodanie tych mikroorganizmów z trudem przetrwa w wyjątkowo trudnych warunkach. Dlatego też probiotyki tworzące przetrwalniki wzbudziły zainteresowanie badaczy. Żywotność i stabilność tych bakterii są znacznie lepsze w porównaniu z innymi probiotykami ze względu na ich zdolność do tworzenia przetrwalników. Wśród gatunków Bacillus, Bacillus clausii, Bacillus subtilis i Bacillus coagulans to bakterie, które mogą tworzyć przetrwalniki stabilne w kwaśnym środowisku soku żołądkowego i dlatego bezpiecznie przechodzą przez żołądek, a także wytwarzają w jelitach enzymy trawienne, takie jak amylaza i proteaza. B. coagulans to jedyny gatunek Bacillus, który może wytwarzać kwas mlekowy, który obniża pH, powodując lekko kwaśny stan środowiska. Jest to doskonały warunek środowiskowy dla rozwoju pożytecznych bakterii jelitowych i zapobiegania rozwojowi szkodliwych bakterii. Jednocześnie poprawia wchłanianie oraz łagodzi anoreksję i zaparcia u dzieci. Wcześniejsze badania wykazały również, że probiotyki mogą znacząco skrócić czas zatrzymywania stolca w jelitach i poprawić jego konsystencję. W oparciu o powyższe wyniki badań, probiotyki zarodnikowe można uznać za naturalne i bezpieczne środki łagodzące zaparcia, anoreksję i powolny przyrost masy ciała u dzieci. Na poparcie tej tezy badacze planują przeprowadzić badanie kliniczne pt. „Ocena skuteczności probiotyków zarodnikowych LiveSpo® Preg-Mom i LiveSpo® KIDS we wspieraniu redukcji zaparć, anoreksji i powolnego przyrostu masy ciała u dzieci w wieku 24-60 lat miesiące".

Ogólnym celem tego badania jest ocena skuteczności dwóch rodzajów probiotyków, z których pierwszy zawiera 3 miliardy zarodników trzech gatunków bakterii, zarodników Bacillus subtilis, B. clausii i B. coagulans (LiveSpo® Preg-Mom) ​​w jednej ampułce a drugi zawiera 3 miliardy zarodników dwóch gatunków bakterii w ampułce (LiveSpo® KIDS), w tym Bacillus subtilis i B. clausii, wspomagając leczenie dzieci z zaparciami, anoreksją i powolnym przyrostem masy ciała.

Pierwszym celem jest ocena skuteczności tych produktów w łagodzeniu typowych objawów zaparć, anoreksji i powolnego przyrostu masy ciała. Drugorzędnym celem jest pomiar zmian typowych cytokin we krwi, wskaźników IgA w kale i składu mikroflory w kale przed i po dodatkowym zastosowaniu LiveSpo® Preg-Mom i LiveSpo® KIDS.

W tym celu badanie zaprojektowano jako randomizowane, kontrolowane badanie kliniczne z podwójnie ślepą próbą, w którym wzięło udział 201 uczestników, u których zdiagnozowano zaparcia, anoreksję i powolny przyrost masy ciała. Uczestnicy są losowo przydzielani do 3 grup przy użyciu randomizacji bloków permutowanych: grupa kontrolna stosująca wodę RO (CC), grupa eksperymentalna 1 stosująca LiveSpo® Preg-Mom (AA) i grupa eksperymentalna 2 stosująca LiveSpo® KIDS (BB). Każdy pacjent codziennie otrzymuje 2 ampułki przypisanego produktu probiotycznego, podzielone na 2 dawki dziennie. Badanie obejmuje kliniczną ocenę wskaźników w dniach 0, 7 i 28, takich jak masa ciała, rodzaj stolca, częstotliwość codziennych wypróżnień i średni czas spożywania posiłku.

Treść i metody wykrywania subklinicznego. Uczestnikami badania są dzieci w wieku od 24 do 60 miesięcy, u których zdiagnozowano zaparcia, anoreksję i powolny przyrost masy ciała.

• Badania hematologiczne i biochemiczne przeprowadza się w dniach 0 i 28 w szpitalu MEDLATEC (nazwa własna) w Wietnamie.
• Test PCR w czasie rzeczywistym przeprowadza się na próbkach kału w dniach 0, 7 i 28 w Centrum Badań Spobiotyków (nazwa własna) w celu wykrycia zarodników probiotycznych, w tym B. subtilis, B. clausii i B. coagulans, w celu krzyżowania się sprawdzić właściwe stosowanie probiotyków lub placebo odpowiednio w grupie eksperymentalnej i kontrolnej.
• Testy ELISA przeprowadza się w dniach 0, 7 i 28 w Centrum Badań Spobiotyków (nazwa własna) w celu określenia, odpowiednio, poziomu cytokin prozapalnych/przeciwzapalnych w próbkach krwi i poziomów IgA w próbkach kału, w celu oceny zmian w układzie odpornościowym. powiązane wskaźniki podczas leczenia wspomagającego.
• Badania wskazujące zawartość bakterii Gr (+) i Gr (-) w próbkach kału przeprowadza się w dniach 0, 7 i 28 w szpitalu MEDLATEC (nazwa własna) w celu: oceny zmiany równowagi pomiędzy rodzajami bakterii bakterie Gr (+) i Gr (-) bakterie w jelitach.
• Analizę sekwencjonowania metagenomu 16S V3-V4 przeprowadza się w Macrogen (Seul, Korea) przy użyciu technologii sekwencjonowania nowej generacji (NGS) na platformie Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, Kalifornia, USA), wykorzystując serię 2 × 250 bp konfiguracja. Do analizy wykorzystuje się próbki DNA pobrane z próbek kału około 10 reprezentatywnych pacjentów z każdej grupy w dniu 0 i dniu 28 w celu identyfikacji zmian w mikrobiomie.
• Zbieranie danych i analiza statystyczna obejmują gromadzenie indywidualnej dokumentacji medycznej i usystematyzowanie informacji o pacjencie w zbiór danych.

Analizę tabelaryczną przeprowadza się na zmiennych dychotomicznych za pomocą testu χ2 lub dokładnego testu Fishera, gdy wartość oczekiwana dowolnej komórki jest mniejsza niż pięć. Zmienne ciągłe porównuje się za pomocą testu Wilcoxona, testu t lub testu Manna-Whitneya, gdy dane nie mają rozkładu normalnego. Aby określić, czy istnieje statystycznie istotna różnica pomiędzy trzema grupami, przeprowadza się test ANOVA. Analiza korelacji Spearmana ocenia korelacje między zmiennymi. Analizy statystyczne i graficzne przeprowadzane są w programie GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Poziom istotności wszystkich analiz przyjęto na poziomie p < 0,05. Wartości P. Skuteczność LiveSpo® Preg-Mom i LiveSpo® KIDS ocenia się i porównuje z kontrolą w oparciu o następujące kryteria kliniczne i subkliniczne uzyskane z grup eksperymentalnych i kontrolnych: Pierwszorzędowy wynik to: (i) Objawowe złagodzenie zaparć, anoreksji i powolny przyrost masy ciała; Drugorzędnymi wynikami są: (ii) Regulowane poziomy cytokin prozapalnych, takich jak IL-6, IL-10, IL-17, IL-23 i TNF-alfa w próbkach krwi. (iii) Regulowane poziomy IgA w próbkach kału. (iv) Zwiększona różnorodność i liczba pożytecznych gatunków bakterii w porównaniu ze szkodliwymi bakteriami w mikroflorze jelitowej.