Эффективность пробиотиков со спорами Bacillus в уменьшении запоров, анорексии и медленного набора веса у детей

Недоедание детей является актуальной проблемой общественного здравоохранения, особенно среди детей в возрасте до 5 лет, влияя на физическое, умственное и двигательное развитие, приводя к хроническим проблемам во взрослом возрасте и в будущих поколениях. В отчете ЮНИСЕФ, ВОЗ и Всемирного банка (март 2020 г.) подчеркиваются тревожные глобальные показатели недоедания: 144,0 миллиона детей в возрасте до 5 лет страдают от недоедания, включая задержку роста (47,0 миллиона) и тяжелое недоедание (14,3 миллиона). Основная тяжесть приходится на страны с уровнем дохода ниже среднего: в них две трети детей с задержкой роста и три четверти детей с истощением. Во Вьетнаме (данные за 2020 год) 19,5% детей в возрасте до 5 лет страдают задержкой роста, 11,6% имеют недостаточный вес и 4,7% страдают истощением. Параллельно с этим запор становится растущей проблемой здравоохранения в Азии и во всем мире, от которой страдают дети даже в развитых странах. У детей преобладают функциональные запоры (12-28%). Во Вьетнаме 24,6% детей в возрасте 3–5 лет сталкиваются с запорами, пик которых достигает 54,9% в период от 36 до 48 месяцев. Нелеченый запор приводит к серьезным физическим, психологическим и социально-экономическим осложнениям, таким как воспаление желудочно-кишечного тракта, анорексия и нарушение всасывания питательных веществ. Анорексия, распространенная среди детей, влияет на их усвоение питательных веществ, рост и рост. У детей с анорексией в 2,5-3 раза выше риск недостаточного питания и задержки роста. Дети, страдающие от недоедания и расстройств пищеварения, сталкиваются с нарушением выработки ферментов, потерей питательных веществ и дисбиозом кишечника, что приводит к медленному набору веса. Недоедающие дети с более низким иммунитетом становятся более склонными к заболеванию, что усугубляет анорексию и формирует проблемный цикл. В последние годы роль пробиотиков в здоровье и заболевании человека привлекла внимание исследователей. Частично это может быть связано с превосходной активностью пробиотиков в предотвращении и облегчении заболеваний. В настоящее время исследования пробиотиков в основном сосредоточены на лечении желудочно-кишечных заболеваний с помощью некоторых традиционных пробиотиков. Однако возникает проблема, когда добавленные микроорганизмы вряд ли смогут выжить в чрезвычайно суровых условиях. Поэтому спорообразующие пробиотики привлекли интерес исследователей. Жизнеспособность и стабильность этих бактерий значительно лучше по сравнению с другими пробиотиками благодаря их способности образовывать споры. Среди видов Bacillus Bacillus clausii, Bacillus subtilis и Bacillus coagulans являются бактериями, которые могут образовывать споры, стабильные в кислой среде желудочного сока и, следовательно, безопасно проходить через желудок, а также продуцировать пищеварительные ферменты, такие как амилаза и протеаза, в кишечнике. B. coagulans — единственный вид Bacillus, который может производить молочную кислоту, которая снижает pH, доводя среду до слегка кислого состояния. Это отличные условия окружающей среды для роста полезных кишечных бактерий и предотвращения роста вредных бактерий. В то же время он улучшает всасывание и облегчает анорексию и запоры у детей. Предыдущие исследования также продемонстрировали, что пробиотики могут значительно сократить время задержки стула в кишечнике и улучшить консистенцию стула. На основании приведенных выше результатов исследований споровые пробиотики можно считать натуральными и безопасными средствами для облегчения запоров, анорексии и медленного набора веса у детей. Чтобы обосновать этот аргумент, исследователи планируют провести клиническое исследование под названием «Оценка эффективности споровых пробиотиков LiveSpo® Preg-Mom и LiveSpo® KIDS в снижении запоров, анорексии и медленного набора веса у детей в возрасте 24–60 лет». месяцы".

Общая цель этого исследования - оценить эффективность двух типов пробиотиков, первый из которых содержит 3 миллиарда спор трех видов бактерий, Bacillus subtilis, B. clausii и споры B. coagulans (LiveSpo® Preg-Mom) ​​на ампулу. и второй, содержащий 3 миллиарда спор двух видов бактерий в ампуле (LiveSpo® KIDS), включая Bacillus subtilis и B. clausii, для лечения детей с запорами, анорексией и медленным набором веса.

Первая цель — оценить эффективность этих продуктов в облегчении типичных симптомов запора, анорексии и медленного набора веса. Вторичной целью является измерение изменений типичных цитокинов в крови, показателей IgA в кале и состава микробиоты в кале до и после дополнительного применения LiveSpo® Preg-Mom и LiveSpo® KIDS.

С этой целью исследование спроектировано как рандомизированное, двойное слепое и контролируемое клиническое исследование с участием 201 участника с диагнозом запор, анорексия и медленный набор веса. Участники были рандомизированы на 3 группы с использованием рандомизации с перестановкой блоков: контрольная группа, использующая воду обратного осмоса (CC), экспериментальная группа 1, использующая LiveSpo® Preg-Mom (AA), и экспериментальная группа 2, использующая LiveSpo® KIDS (BB). Каждый пациент ежедневно получает по 2 ампулы назначенного пробиотического препарата, разделенные на 2 приема. Исследование включает клиническую оценку показателей на 0, 7 и 28 дни, таких как вес, тип стула, частота ежедневных испражнений и среднее время приема пищи за один прием пищи.

Содержание и методы субклинического выявления. Участники исследования — дети в возрасте от 24 до 60 месяцев, у которых диагностированы запор, анорексия и медленный набор веса.

• Гематологические и биохимические тесты проводятся в 0 и 28 дни в больнице MEDLATEC (имя собственное), Вьетнам.
• ПЦР-анализ в реальном времени проводится на образцах стула на 0, 7 и 28-й дни в Исследовательском центре «Спобиотик» (имя собственное) для выявления спор пробиотиков, включая B. subtilis, B. clausii и B. coagulans, для перекрестного анализа. проверьте правильность использования пробиотиков или плацебо в экспериментальной и контрольной группах соответственно.
• Тесты ELISA проводятся на 0, 7 и 28 дни в Исследовательском центре «Спобиотик» (имя собственное) для определения уровней провоспалительных/противовоспалительных цитокинов в образцах крови и уровней IgA в образцах стула, соответственно, для оценки изменений в иммунной системе. соответствующие показатели во время поддерживающего лечения.
• Тесты, указывающие соотношение бактерий Гр (+) и Гр (-) в образцах стула, проводятся на 0, 7 и 28 дни в больнице МЕДЛАТЕК (имя собственное) с целью: оценить изменение баланса между видами бактерии Gr (+) и Gr (-) в кишечнике.
• Анализ секвенирования метагенома 16S V3-V4 проводится в компании Macrogen (Сеул, Корея) с использованием технологии секвенирования нового поколения (NGS) на платформе Illumina MiSeq (Illumina, Сан-Диего, Калифорния, США) с использованием серии 2 × 250 п.о. конфигурация. Для анализа используются образцы ДНК, извлеченные из образцов стула примерно 10 репрезентативных пациентов из каждой группы в день 0 и день 28, чтобы выявить изменения в микробиоме.
• Сбор данных и статистический анализ включают сбор отдельных медицинских записей и систематизацию информации о пациентах в набор данных.

Табличный анализ выполняется для дихотомических переменных с использованием теста χ2 или точного теста Фишера, когда ожидаемое значение любой ячейки меньше пяти. Непрерывные переменные сравниваются с использованием критерия Уилкоксона, t-критерия или критерия Манна-Уитни, когда данные не распределены нормально. Чтобы определить, существует ли статистически значимая разница между тремя группами, проводится тест ANOVA. Корреляционный анализ Спирмена оценивает корреляции между переменными. Статистический и графический анализ проводят с помощью программного обеспечения GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, Калифорния, США). Уровень значимости всех анализов установлен на уровне p < 0,05. P-значения. Эффективность LiveSpo® Preg-Mom и LiveSpo® KIDS оценивается и сравнивается с контролем на основе следующих клинических и субклинических критериев, полученных в экспериментальной и контрольной группах: Первичный результат: (i) Симптоматическое облегчение запоров, анорексии. и медленный набор веса; Вторичными результатами являются: (ii) Регулируемые уровни провоспалительных цитокинов, таких как IL-6, IL-10, IL-17, IL-23 и TNF-альфа, в образцах крови. (iii) Регулируемые уровни IgA в образцах фекалий. (iv) Улучшение разнообразия и количества полезных видов бактерий по сравнению с вредными бактериями в микробиоте кишечника.