Efectividad de los probióticos de esporas de bacilo para reducir el estreñimiento, la anorexia y el aumento lento de peso en niños

La desnutrición infantil es un problema acuciante de salud pública, particularmente entre los menores de 5 años, que afecta el desarrollo físico, mental y motor y provoca problemas crónicos en la edad adulta y en las generaciones futuras. Un informe de UNICEF, la OMS y el Banco Mundial (marzo de 2020) destacó las alarmantes tasas de desnutrición mundial: 144,0 millones de niños menores de 5 años sufren desnutrición, incluido retraso del crecimiento (47,0 millones) y desnutrición grave (14,3 millones). Los países de ingresos medianos bajos son los más afectados: dos tercios de los niños con retraso en el crecimiento y tres cuartos de los niños con emaciación en todo el mundo. En Vietnam (datos de 2020), el 19,5% de los niños menores de 5 años tienen retraso del crecimiento, el 11,6% tienen bajo peso y el 4,7% emaciación. Paralelamente, el estreñimiento es un problema de salud cada vez mayor en Asia y en todo el mundo, que afecta a los niños incluso en las economías desarrolladas. El estreñimiento funcional prevalece en los niños (12-28%). En Vietnam, el 24,6% de los niños de 3 a 5 años padecen estreñimiento, alcanzando un máximo del 54,9% entre los 36 y los 48 meses. El estreñimiento no tratado plantea graves complicaciones físicas, psicológicas y socioeconómicas, como inflamación gastrointestinal, anorexia y malabsorción de nutrientes. La anorexia, frecuente en los niños, afecta su absorción de nutrientes, su crecimiento y su altura. Los niños anoréxicos tienen entre 2,5 y 3 veces más riesgos de sufrir desnutrición y retraso del crecimiento. Los niños que sufren desnutrición y trastornos digestivos enfrentan una producción deficiente de enzimas, pérdida de nutrientes y disbiosis intestinal, lo que provoca un lento aumento de peso. Los niños desnutridos con menor inmunidad se vuelven más propensos a enfermarse, lo que exacerba la anorexia y forma un ciclo problemático. En los últimos años, el papel de los probióticos en la salud y las enfermedades humanas ha atraído la atención de los investigadores. Esto puede deberse en parte a la excelente actividad de los probióticos para prevenir y aliviar enfermedades. Actualmente, la investigación sobre probióticos se centra principalmente en el tratamiento de enfermedades gastrointestinales con algunos probióticos tradicionales. Sin embargo, surge un problema cuando además estos microorganismos difícilmente pueden sobrevivir en ambientes extremadamente hostiles. Por tanto, los probióticos formadores de esporas han atraído el interés de los investigadores. La viabilidad y estabilidad de estas bacterias son significativamente mejores en comparación con otros probióticos debido a su capacidad de formar esporas. Entre las especies de Bacillus, Bacillus clausii, Bacillus subtilis y Bacillus coagulans son bacterias que pueden formar esporas estables en el ambiente ácido del jugo gástrico y, por tanto, pasar por el estómago de forma segura y además producir enzimas digestivas como la amilasa y la proteasa en el intestino. B. coagulans es la única especie de Bacillus que puede producir ácido láctico, que reduce el pH y lleva el ambiente a un estado ligeramente ácido. Esta es una excelente condición ambiental para que crezcan bacterias intestinales beneficiosas y prevenga el crecimiento de bacterias dañinas. Al mismo tiempo, potencia la absorción y mejora la anorexia y el estreñimiento en los niños. Estudios anteriores también han demostrado que los probióticos pueden reducir significativamente el tiempo de retención de las heces en los intestinos y mejorar la consistencia de las heces. Según los resultados de la investigación anterior, los probióticos de esporas pueden considerarse agentes naturales y seguros para aliviar el estreñimiento, la anorexia y el aumento lento de peso en los niños. Para fundamentar este argumento, los investigadores planean realizar un ensayo clínico titulado "Evaluación de la eficacia de los probióticos de esporas LiveSpo® Preg-Mom y LiveSpo® KIDS para apoyar la reducción del estreñimiento, la anorexia y el aumento lento de peso en niños de 24 a 60 años. meses".

El objetivo general de este estudio es evaluar la eficacia de dos tipos de probióticos, el primero que contiene 3 mil millones de esporas de tres especies bacterianas, esporas de Bacillus subtilis, B. clausii y B. coagulans (LiveSpo® Preg-Mom) ​​por ampolla. y el segundo que tiene 3 mil millones de esporas de dos especies bacterianas por ampolla (LiveSpo® KIDS), incluidos Bacillus subtilis y B. clausii, para apoyar el tratamiento de niños con estreñimiento, anorexia y aumento lento de peso.

El primer objetivo es evaluar la eficacia de estos productos para aliviar los síntomas típicos de estreñimiento, anorexia y aumento lento de peso. El objetivo secundario es medir los cambios en las citoquinas típicas en la sangre, en los índices de IgA en las heces y en la composición de la microbiota en las heces antes y después del uso suplementario de LiveSpo® Preg-Mom y LiveSpo® KIDS.

Para ello, el estudio está diseñado como un ensayo clínico aleatorizado, doble ciego y controlado con 201 participantes diagnosticados con estreñimiento, anorexia y lento aumento de peso. Los participantes se asignan al azar a 3 grupos mediante aleatorización en bloques permutados: un grupo de control que usa agua RO (CC), grupo experimental 1 que usa LiveSpo® Preg-Mom (AA) y grupo experimental 2 que usa LiveSpo® KIDS (BB). Cada paciente recibe 2 ampollas diarias del producto probiótico asignado, divididas en 2 tomas diarias. El estudio incluye una evaluación clínica de indicadores en los días 0, 7 y 28, como el peso, los tipos de heces, la frecuencia de las deposiciones diarias y el tiempo medio de ingesta por comida.

Contenidos y Métodos para la detección subclínica. Los participantes del estudio son niños de entre 24 y 60 meses a quienes se les diagnostica estreñimiento, anorexia y aumento lento de peso.

• Las pruebas hematológicas y bioquímicas se realizan los días 0 y 28 en el hospital MEDLATEC (nombre propio), Vietnam.
• Se realiza un ensayo de PCR en tiempo real en muestras de heces en los días 0, 7 y 28 en el Centro de Investigación Spobiotic (nombre propio) para detectar esporas de probióticos, incluidas B. subtilis, B. clausii y B. coagulans, para cruzar- comprobar el uso adecuado de probióticos o placebo en los grupos experimental y control, respectivamente.
• Las pruebas ELISA se realizan los días 0, 7 y 28 en el Centro de Investigación Spobiotic (nombre propio) para determinar los niveles de citoquinas proinflamatorias/antiinflamatorias en muestras de sangre y los niveles de IgA en muestras de heces, respectivamente, para evaluar cambios en el sistema inmunológico. indicadores relacionados durante el tratamiento de apoyo.
• Las pruebas que indican proporciones de bacterias Gr (+) y Gr (-) en muestras de heces se realizan los días 0, 7 y 28 en el hospital MEDLATEC (nombre propio), con el fin de: evaluar el cambio en el equilibrio entre los tipos de bacterias Gr (+) y Gr (-) bacterias en el intestino.
• El análisis de secuenciación del metagenoma 16S V3-V4 se lleva a cabo en Macrogen (Seúl, Corea) utilizando tecnología de secuenciación de próxima generación (NGS) en la plataforma Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, EE. UU.), utilizando una ejecución de 2 × 250 pb. configuración. Para el análisis se utilizan muestras de ADN extraídas de muestras de heces de aproximadamente 10 pacientes representativos de cada grupo el día 0 y el día 28, para identificar cambios en el microbioma.
• La recopilación de datos y el análisis estadístico implican la recopilación de registros médicos individuales y la sistematización de la información del paciente en un conjunto de datos.

El análisis tabular se realiza sobre variables dicotómicas mediante la prueba de χ2 o la prueba exacta de Fisher cuando el valor esperado de cualquier celda es inferior a cinco. Las variables continuas se comparan mediante la prueba de Wilcoxon, la prueba t o la prueba de Mann-Whitney cuando los datos no se distribuyen normalmente. Para determinar si existe una diferencia estadísticamente significativa entre los tres grupos, se realiza una prueba ANOVA. El análisis de correlación de Spearman evalúa las correlaciones entre las variables. Los análisis estadísticos y gráficos se realizan en el software GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, EE. UU.). El nivel de significancia de todos los análisis se establece en p < 0,05. Valores p. La eficacia de LiveSpo® Preg-Mom y LiveSpo® KIDS se evalúa y compara con el control según los siguientes criterios clínicos y subclínicos obtenidos de los grupos Experimento y Control: El resultado primario es: (i) Alivio sintomático del estreñimiento, anorexia y aumento lento de peso; Los resultados secundarios son: (ii) Niveles regulados de citocinas proinflamatorias como IL-6, IL-10, IL-17, IL-23 y TNF-alfa en muestras de sangre. (iii) Niveles regulados de IgA en muestras fecales. (iv) Mayor diversidad y recuento de especies bacterianas beneficiosas en comparación con bacterias dañinas en la microbiota intestinal.