Účinnost probiotik Bacillus spore při snižování zácpy, anorexie a pomalého přibírání u dětí

Dětská podvýživa je naléhavým problémem veřejného zdraví, zejména mezi osobami mladšími 5 let, ovlivňuje fyzický, duševní a motorický vývoj a vede k chronickým problémům v dospělosti a budoucích generacích. Zpráva UNICEF, WHO a Světové banky (březen 2020) zdůraznila alarmující globální míru podvýživy, přičemž 144,0 milionů dětí mladších 5 let trpí podvýživou, včetně zakrnění (47,0 milionů) a vážné podvýživy (14,3 milionů). Hlavní břemeno nesou země s nižšími středními příjmy, kde jsou dvě třetiny zakrnělých dětí a tři čtvrtiny ztracených dětí na celém světě. Ve Vietnamu (údaje z roku 2020) je 19,5 % dětí do 5 let zakrnělých, 11,6 % podváhou a 4,7 % promarněných. Souběžně s tím je zácpa rostoucím zdravotním problémem v Asii i na celém světě, který postihuje děti i v rozvinutých ekonomikách. Funkční zácpa převládá u dětí (12–28 %). Ve Vietnamu čelí 24,6 % 3–5letých dětí zácpě, přičemž vrchol je 54,9 % mezi 36. a 48. měsícem. Neléčená zácpa představuje závažné fyzické, psychické a socioekonomické komplikace, jako je gastrointestinální zánět, anorexie a malabsorpce živin. Anorexie, převládající u dětí, ovlivňuje jejich vstřebávání živin, růst a výšku. Anorektické děti mají 2,5-3x vyšší riziko podvýživy a zakrnění. Děti trpící podvýživou a poruchami trávení čelí snížené produkci enzymů, ztrátě živin a střevní dysbióze, což způsobuje pomalé přibírání na váze. Podvyživené děti s nižší imunitou se stávají náchylnějšími, zhoršuje se anorexie a tvoří se problematický cyklus. V posledních letech přitahuje pozornost výzkumníků úloha probiotik v lidském zdraví a nemocech. To může být částečně způsobeno vynikající aktivitou probiotik při prevenci a zmírnění onemocnění. V současné době se výzkum probiotik zaměřuje především na léčbu gastrointestinálních onemocnění některými tradičními probiotiky. Problém však nastává, když přidání těchto mikroorganismů může jen stěží přežít v extrémně drsném prostředí. Proto sporotvorná probiotika přitáhla zájem výzkumníků. Životaschopnost a stabilita těchto bakterií je výrazně lepší ve srovnání s jinými probiotiky díky jejich schopnosti tvořit spory. Z druhů Bacillus jsou Bacillus clausii, Bacillus subtilis a Bacillus coagulans bakterie, které mohou tvořit spory stabilní v kyselém prostředí žaludeční šťávy, a proto bezpečně procházet žaludkem a také produkovat trávicí enzymy, jako je amyláza a proteáza ve střevě. B. coagulans je jediným druhem Bacillus, který může produkovat kyselinu mléčnou, která snižuje pH a přivádí prostředí do mírně kyselého stavu. To je vynikající prostředí pro růst prospěšných střevních bakterií a zabránění růstu škodlivých bakterií. Zároveň zvyšuje vstřebávání a zlepšuje nechutenství a zácpu u dětí. Předchozí studie také prokázaly, že probiotika mohou významně zkrátit dobu zadržení stolice ve střevech a zlepšit konzistenci stolice. Na základě výše uvedených výsledků výzkumu lze sporová probiotika považovat za přírodní a bezpečné prostředky ke zmírnění zácpy, anorexie a pomalého přibírání na váze u dětí. K doložení tohoto argumentu plánují vyšetřovatelé provést klinickou studii s názvem „Hodnocení účinnosti sporových probiotik LiveSpo® Preg-Mom a LiveSpo® KIDS při podpoře redukce zácpy, anorexie a pomalého přibírání na váze u dětí ve věku 24–60 let. měsíce“.

Celkovým cílem této studie je posoudit účinnost dvou typů probiotik, z nichž první obsahuje 3 miliardy spor tří bakteriálních druhů, Bacillus subtilis, B. clausii a spor B. coagulans (LiveSpo® Preg-Mom) ​​na ampuli. a druhý s 3 miliardami spor dvou bakteriálních druhů na ampuli (LiveSpo® KIDS), včetně Bacillus subtilis a B. clausii, při podpoře léčby dětí se zácpou, anorexií a pomalým přibíráním na váze.

Prvním cílem je vyhodnotit účinnost těchto přípravků při zmírňování typických příznaků zácpy, anorexie a pomalého přibírání na váze. Sekundárním cílem je měření změn typických cytokinů v krvi, IgA indexů ve stolici a složení mikroflóry ve stolici před a po doplňkovém užití s ​​LiveSpo® Preg-Mom a LiveSpo® KIDS.

Za tímto účelem je studie navržena jako randomizovaná, dvojitě zaslepená a kontrolovaná klinická studie s 201 účastníky s diagnostikovanou zácpou, anorexií a pomalým přibíráním na váze. Účastníci jsou randomizováni do 3 skupin pomocí permutované blokové randomizace: kontrolní skupina používající RO vodu (CC), experimentální skupina 1 používající LiveSpo® Preg-Mom (AA) a experimentální skupina 2 používající LiveSpo® KIDS (BB). Každý pacient dostává 2 ampule přiděleného probiotického přípravku denně, rozdělené do 2 dávek denně. Studie zahrnuje klinické hodnocení ukazatelů ve dnech 0, 7 a 28, jako je hmotnost, typy stolice, frekvence denních stolic a průměrná doba jídla na jídlo.

Obsah a metody pro subklinickou detekci. Účastníky studie jsou děti ve věku 24 až 60 měsíců, u kterých je diagnostikována zácpa, anorexie a pomalé přibírání na váze.

• Hematologické a biochemické testy se provádějí ve dnech 0 a 28 v nemocnici MEDLATEC (vlastní jméno) ve Vietnamu.
• Test PCR v reálném čase se provádí na vzorcích stolice ve dnech 0, 7 a 28 ve Spobiotic Research Center (vlastní jméno), aby se detekovaly probiotické spory, včetně B. subtilis, B. clausii a B. coagulans, ke křížení zkontrolovat vhodné použití probiotik nebo placeba v experimentální a kontrolní skupině, resp.
• Testy ELISA se provádějí ve dnech 0, 7 a 28 ve Spobiotic Research Center (vlastní jméno), aby se určily hladiny prozánětlivých/protizánětlivých cytokinů ve vzorcích krve a hladiny IgA ve vzorcích stolice, v daném pořadí, pro vyhodnocení změn imunitního systému. související ukazatele během podpůrné léčby.
• Testy ukazující poměry bakterií Gr (+) a Gr (-) ve vzorcích stolice se provádějí ve dnech 0, 7 a 28 v nemocnici MEDLATEC (vlastní jméno), aby se: vyhodnotila změna rovnováhy mezi typy bakterie Gr (+) a Gr (-) bakterie ve střevě.
• Analýza sekvenování metagenomu 16S V3-V4 se provádí v Macrogen (Soul, Korea) pomocí technologie sekvenování nové generace (NGS) na platformě Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA), s využitím běhu 2 × 250 bp. konfigurace. Vzorky DNA extrahované ze vzorků stolice asi 10 reprezentativních pacientů z každé skupiny v den 0 a den 28 se použijí pro analýzu, aby se identifikovaly změny v mikrobiomu.
• Sběr dat a statistická analýza zahrnují sběr individuálních lékařských záznamů a systematizaci informací o pacientech do datové sady.

Tabulková analýza se provádí na dichotomických proměnných pomocí χ2 testu nebo Fisherova exaktního testu, když je očekávaná hodnota kterékoli buňky nižší než pět. Spojité proměnné se porovnávají pomocí Wilcoxonova testu, t-testu nebo Mann-Whitneyho testu, pokud data nejsou normálně distribuována. K určení, zda existuje statisticky významný rozdíl mezi těmito třemi skupinami, se provádí test ANOVA. Spearmanova korelační analýza posuzuje korelace mezi proměnnými. Statistické a grafické analýzy se provádějí na softwaru GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Hladina významnosti všech analýz je nastavena na p < 0,05. P-hodnoty. Účinnost LiveSpo® Preg-Mom a LiveSpo® KIDS se hodnotí a porovnává s kontrolou na základě následujících klinických a subklinických kritérií získaných od experimentálních a kontrolních skupin: Primární výsledek je: (i) Symptomatická úleva od zácpy, anorexie a pomalé přibírání na váze; Sekundární výsledky jsou: (ii) Regulované hladiny prozánětlivých cytokinů, jako je IL-6, IL-10, IL-17, IL-23 a TNF-alfa ve vzorcích krve. (iii) Regulované hladiny IgA ve vzorcích stolice. (iv) Zlepšená diverzita a počet prospěšných bakteriálních druhů ve srovnání se škodlivými bakteriemi ve střevní mikroflórě.