Bacillus Spore -probioottien tehokkuus vähentämään ummetusta, anoreksiaa ja hidasta painonnousua lapsilla

Lasten aliravitsemus on kiireellinen kansanterveysongelma, erityisesti alle 5-vuotiaiden keskuudessa, ja se vaikuttaa fyysiseen, henkiseen ja motoriseen kehitykseen ja johtaa kroonisiin ongelmiin aikuisiässä ja tuleville sukupolville. UNICEFin, WHO:n ja Maailmanpankin raportissa (maaliskuu 2020) korostettiin hälyttäviä maailmanlaajuisia aliravitsemusasteita: 144,0 miljoonaa alle 5-vuotiasta lasta kärsii aliravitsemuksesta, mukaan lukien stunting (47,0 miljoonaa) ja vakava aliravitsemus (14,3 miljoonaa). Alemman keskitulotason maat kantavat suurimman osan, sillä kaksi kolmasosaa kiduratuista ja kolme neljäsosaa hukkaan jääneistä lapsista maailmassa. Vietnamissa (vuoden 2020 tiedot) 19,5 % alle 5-vuotiaista lapsista on kitukasvuisia, 11,6 % alipainoisia ja 4,7 % hukassa. Samanaikaisesti ummetus on kasvava terveysongelma Aasiassa ja maailmanlaajuisesti, ja se vaikuttaa lapsiin jopa kehittyneissä talouksissa. Funktionaalinen ummetus on yleistä lapsilla (12-28 %). Vietnamissa 24,6 %:lla 3–5-vuotiaista on ummetusta, mikä on korkeimmillaan 54,9 % 36–48 kuukauden välillä. Hoitamaton ummetus aiheuttaa vakavia fyysisiä, psyykkisiä ja sosioekonomisia komplikaatioita, kuten maha-suolikanavan tulehdusta, anoreksiaa ja ravinteiden imeytymishäiriötä. Anoreksia, joka on yleistä lapsilla, vaikuttaa heidän ravintoaineiden imeytymiseen, kasvuun ja pituuteen. Anoreksiasta kärsivillä lapsilla on 2,5-3 kertaa suurempi riski saada alipainoinen aliravitsemus ja kitukasvuisuus. Aliravitsemuksesta ja ruoansulatushäiriöistä kärsivillä lapsilla on heikentynyt entsyymituotanto, ravintoaineiden menetys ja suoliston dysbioosi, mikä aiheuttaa hidasta painonnousua. Aliravitut lapset, joilla on heikompi vastustuskyky, ovat alttiimpia, mikä pahentaa anoreksiaa ja muodostaa ongelmallisen kierteen. Viime vuosina probioottien rooli ihmisten terveydessä ja sairauksissa on herättänyt tutkijoiden huomion. Tämä voi osittain johtua probioottien erinomaisesta aktiivisuudesta sairauksien ehkäisyssä ja lievittämisessä. Tällä hetkellä probioottien tutkimus keskittyy pääasiassa ruoansulatuskanavan sairauksien hoitoon perinteisillä probiooteilla. Ongelma syntyy kuitenkin, kun näiden mikro-organismien lisääminen voi tuskin selviytyä erittäin ankarissa ympäristöissä. Siksi itiöitä muodostavat probiootit ovat herättäneet tutkijoiden kiinnostusta. Näiden bakteerien elinkelpoisuus ja stabiilisuus ovat merkittävästi parempia verrattuna muihin probiootteihin niiden itiömuodostuskyvyn vuoksi. Bacillus-lajeista Bacillus clausii, Bacillus subtilis ja Bacillus coagulans ovat bakteereita, jotka voivat muodostaa mahanesteen happamassa ympäristössä pysyviä itiöitä ja siten kulkea mahan läpi turvallisesti ja tuottaa myös ruoansulatusentsyymejä, kuten amylaasia ja proteaasia suolistossa. B. coagulans on ainoa Bacillus-laji, joka pystyy tuottamaan maitohappoa, joka alentaa pH:ta ja saattaa ympäristön lievästi happamaan tilaan. Tämä on erinomainen ympäristöolosuhteet hyödyllisten suolistobakteerien kasvulle ja haitallisten bakteerien kasvun estämiselle. Samalla se tehostaa imeytymistä ja parantaa lasten anoreksiaa ja ummetusta. Aiemmat tutkimukset ovat myös osoittaneet, että probiootit voivat lyhentää merkittävästi ulosteen retentioaikaa suolistossa ja parantaa ulosteen konsistenssia. Yllä olevien tutkimustulosten perusteella itiöprobiootteja voidaan pitää luonnollisina ja turvallisina aineina lievittää ummetusta, ruokahaluttomuutta ja hidasta painonnousua lapsilla. Tämän väitteen tueksi tutkijat suunnittelevat suorittavansa kliinisen tutkimuksen, jonka otsikko on "LiveSpo® Preg-Mom- ja LiveSpo® KIDS -itiöprobioottien tehokkuuden arviointi ummetuksen, anoreksian ja hitaan painonnousun vähentämisessä 24–60-vuotiailla lapsilla kuukaudet".

Tämän tutkimuksen yleisenä tavoitteena on arvioida kahden tyyppisen probiootin tehokkuutta, joista ensimmäinen sisältää 3 miljardia itiötä kolmesta bakteerilajista, Bacillus subtilis-, B. clausii- ja B. coagulans -itiöistä (LiveSpo® Preg-Mom) ​​ampullissa. ja toisessa, jossa on 3 miljardia kahden bakteerilajin itiötä ampullia kohden (LiveSpo® KIDS), mukaan lukien Bacillus subtilis ja B. clausii, tukemaan lasten ummetusta, anoreksiaa ja hidasta painonnousua.

Ensimmäinen tavoite on arvioida näiden tuotteiden tehokkuutta ummetuksen, anoreksian ja hitaan painonnousun tyypillisten oireiden lievittämisessä. Toissijaisena tavoitteena on mitata muutoksia tyypillisissä sytokiineissa veressä, IgA-indeksissä ulosteessa ja mikrobiota koostumuksessa ulosteessa ennen ja jälkeen lisäkäyttöä LiveSpo® Preg-Mom ja LiveSpo® KIDS kanssa.

Tätä tarkoitusta varten tutkimus on suunniteltu satunnaistetuksi, kaksoissokkoutetuksi ja kontrolloiduksi kliiniseksi tutkimukseksi, johon osallistui 201 osallistujaa, joilla on diagnosoitu ummetus, anoreksia ja hidas painonnousu. Osallistujat satunnaistetaan kolmeen ryhmään käyttämällä permutoitua lohkosatunnaistusta: kontrolliryhmä käyttää RO-vettä (CC), koeryhmä 1 käyttämällä LiveSpo® Preg-Mom (AA) ja koeryhmä 2 käyttämällä LiveSpo® KIDS (BB). Jokainen potilas saa 2 ampullia määrättyä probioottista tuotetta päivittäin, jaettuna 2 annokseen päivittäin. Tutkimus sisältää kliinisen arvioinnin indikaattoreista päivinä 0, 7 ja 28, kuten paino, ulostetyypit, päivittäisten suolen liikkeiden tiheys ja keskimääräinen ruokailuaika ateriaa kohti.

Subkliinisen havaitsemisen sisältö ja menetelmät. Tutkimuksen osallistujat ovat 24–60 kuukauden ikäisiä lapsia, joilla on diagnosoitu ummetus, anoreksia ja hidas painonnousu.

• Hematologiset ja biokemialliset testit suoritetaan päivinä 0 ja 28 MEDLATEC (oikeanimi) -sairaalassa Vietnamissa.
• Reaaliaikainen PCR-määritys ulostenäytteille päivinä 0, 7 ja 28 Spobiotic Research Centerissä (oikeanimi) probioottisten itiöiden havaitsemiseksi, mukaan lukien B. subtilis, B. clausii ja B. coagulans, ristiin Tarkista probioottien tai lumelääkkeen asianmukainen käyttö koe- ja vertailuryhmässä.
• ELISA-testit suoritetaan päivinä 0, 7 ja 28 Spobiotic Research Centerissä (oman substantiivi) pro-inflammatoristen/anti-inflammatoristen sytokiinien määrittämiseksi verinäytteissä ja IgA-tasojen määrittämiseksi ulostenäytteissä, vastaavasti immuunijärjestelmän muutosten arvioimiseksi. liittyviä indikaattoreita tukihoidon aikana.
• Testit, jotka osoittavat bakteerien Gr (+) ja Gr (-) suhteita ulostenäytteissä, suoritetaan päivinä 0, 7 ja 28 MEDLATEC (oman substantiivi) sairaalassa, jotta voidaan: arvioida muutosta erityyppisten bakteerien välillä. bakteerit Gr (+) ja Gr (-) bakteerit suolistossa.
• 16S V3-V4 metagenomin sekvensointianalyysi suoritetaan Macrogenissa (Soul, Korea) käyttämällä seuraavan sukupolven sekvensointitekniikkaa (NGS) Illumina MiSeq -alustalla (Illumina, San Diego, CA, USA) käyttäen 2 × 250 bp:n ajoa. kokoonpano. DNA-näytteitä, jotka on otettu noin 10 edustavan potilaan ulostenäytteistä kustakin ryhmästä päivinä 0 ja 28, käytetään analyysiin mikrobiomissa tapahtuvien muutosten tunnistamiseksi.
• Tiedonkeruu ja tilastollinen analyysi sisältävät yksittäisten potilastietojen keräämisen ja potilastietojen systematisoinnin aineistoksi.

Taulukkoanalyysi suoritetaan dikotomisille muuttujille käyttämällä χ2-testiä tai Fisherin tarkkaa testiä, kun minkä tahansa solun odotusarvo on alle viisi. Jatkuvia muuttujia verrataan käyttämällä Wilcoxon-testiä, t-testiä tai Mann-Whitney-testiä, kun tiedot eivät ole normaalijakaumassa. Sen määrittämiseksi, onko näiden kolmen ryhmän välillä tilastollisesti merkitsevä ero, suoritetaan ANOVA-testi. Spearmanin korrelaatioanalyysi arvioi muuttujien välisiä korrelaatioita. Tilastolliset ja graafiset analyysit suoritetaan GraphPad Prism v8.4.3 -ohjelmistolla (GraphPad Software, CA, USA). Kaikkien analyysien merkitsevyystasoksi asetetaan p < 0,05. P-arvot. LiveSpo® Preg-Momin ja LiveSpo® KIDSin tehokkuutta arvioidaan ja verrataan kontrolliin seuraavien koe- ja kontrolliryhmistä saatujen kliinisten ja subkliinisten kriteerien perusteella: Ensisijainen tulos on: (i) Ummetuksen, anoreksian oireiden helpotus. ja hidas painonnousu; Toissijaiset tulokset ovat: (ii) Proinflammatoristen sytokiinien, kuten IL-6, IL-10, IL-17, IL-23 ja TNF-alfa, säädellyt tasot verinäytteissä. (iii) säädellyt IgA-tasot ulostenäytteissä. (iv) Parempi monimuotoisuus ja hyödyllisten bakteerilajien lukumäärä verrattuna haitallisiin bakteereihin suoliston mikrobiotassa.