Efficacia dei probiotici delle spore di Bacillus nel ridurre la stitichezza, l'anoressia e il lento aumento di peso nei bambini

La malnutrizione infantile è un problema urgente per la salute pubblica, in particolare tra i bambini sotto i 5 anni, che colpisce lo sviluppo fisico, mentale e motorio, portando a problemi cronici nell’età adulta e nelle generazioni future. Un rapporto di UNICEF, OMS e Banca Mondiale (marzo 2020) ha sottolineato gli allarmanti tassi di malnutrizione globale, con 144,0 milioni di bambini sotto i 5 anni che soffrono di malnutrizione, incluso arresto della crescita (47,0 milioni) e malnutrizione grave (14,3 milioni). I paesi a reddito medio-basso ne sopportano il peso, con due terzi dei bambini rachitici e tre quarti dei bambini deperiti in tutto il mondo. In Vietnam (dati 2020), il 19,5% dei bambini sotto i 5 anni è rachitico, l’11,6% sottopeso e il 4,7% deperiti. Parallelamente, la stitichezza è un problema sanitario crescente in Asia e nel mondo, che colpisce i bambini anche nelle economie sviluppate. La stitichezza funzionale è prevalente nei bambini (12-28%). In Vietnam, il 24,6% dei bambini di età compresa tra 3 e 5 anni soffre di stitichezza, con un picco del 54,9% tra 36 e 48 mesi. La stitichezza non trattata pone gravi complicazioni fisiche, psicologiche e socioeconomiche, come infiammazione gastrointestinale, anoressia e malassorbimento dei nutrienti. L’anoressia, prevalente nei bambini, influisce sull’assorbimento dei nutrienti, sulla crescita e sull’altezza. I bambini anoressici corrono rischi 2,5-3 volte più elevati di sottopeso, malnutrizione e arresto della crescita. I bambini che soffrono di malnutrizione e disturbi digestivi devono affrontare una ridotta produzione di enzimi, perdita di nutrienti e disbiosi intestinale, che causano un lento aumento di peso. I bambini malnutriti con difese immunitarie inferiori diventano più inclini alle malattie, esacerbando l’anoressia e formando un ciclo problematico. Negli ultimi anni, il ruolo dei probiotici nella salute e nelle malattie umane ha attirato l’attenzione dei ricercatori. Ciò potrebbe essere in parte dovuto all’eccellente attività dei probiotici nel prevenire e alleviare le malattie. Attualmente la ricerca sui probiotici si concentra principalmente sul trattamento delle malattie gastrointestinali con alcuni probiotici tradizionali. Tuttavia, sorge un problema quando questi microrganismi aggiunti difficilmente riescono a sopravvivere in ambienti estremamente difficili. Pertanto, i probiotici sporigeni hanno attirato l’interesse dei ricercatori. La vitalità e la stabilità di questi batteri sono significativamente migliori rispetto ad altri probiotici grazie alla loro capacità di formare spore. Tra le specie Bacillus, Bacillus clausii, Bacillus subtilis e Bacillus coagulans sono batteri che possono formare spore stabili nell'ambiente acido del succo gastrico e, quindi, passare attraverso lo stomaco in modo sicuro e produrre anche enzimi digestivi come amilasi e proteasi nell'intestino. B. coagulans è l'unica specie di Bacillus in grado di produrre acido lattico, che riduce il pH, portando l'ambiente ad uno stato leggermente acido. Questa è una condizione ambientale eccellente per la crescita dei batteri intestinali benefici e per prevenire la crescita di batteri nocivi. Allo stesso tempo, migliora l’assorbimento e migliora l’anoressia e la stitichezza nei bambini. Studi precedenti hanno inoltre dimostrato che i probiotici possono ridurre significativamente il tempo di ritenzione delle feci nell’intestino e migliorarne la consistenza. Sulla base dei risultati della ricerca di cui sopra, i probiotici di spore possono essere considerati agenti naturali e sicuri per alleviare la stitichezza, l’anoressia e il lento aumento di peso nei bambini. Per suffragare questa argomentazione, i ricercatori intendono condurre uno studio clinico intitolato "Valutazione dell'efficacia dei probiotici di spore LiveSpo® Preg-Mom e LiveSpo® KIDS nel supportare la riduzione della stitichezza, dell'anoressia e del lento aumento di peso nei bambini di età compresa tra 24 e 60 anni". mesi".

Lo scopo generale di questo studio è valutare l'efficacia di due tipi di probiotici, il primo contenente 3 miliardi di spore di tre specie batteriche, spore di Bacillus subtilis, B. clausii e B. coagulans (LiveSpo® Preg-Mom) ​​per fiala e il secondo con 3 miliardi di spore di due specie batteriche per fiala (LiveSpo® KIDS), tra cui Bacillus subtilis e B. clausii, a supporto del trattamento dei bambini affetti da stitichezza, anoressia e lento aumento di peso.

Il primo obiettivo è valutare l'efficacia di questi prodotti nell'alleviare i sintomi tipici di stitichezza, anoressia e lento aumento di peso. L'obiettivo secondario è misurare i cambiamenti nelle citochine tipiche nel sangue, negli indici IgA nelle feci e nella composizione del microbiota nelle feci prima e dopo l'utilizzo supplementare di LiveSpo® Preg-Mom e LiveSpo® KIDS.

A questo scopo, lo studio è concepito come uno studio clinico randomizzato, in doppio cieco e controllato con 201 partecipanti con diagnosi di stitichezza, anoressia e lento aumento di peso. I partecipanti vengono randomizzati in 3 gruppi utilizzando la randomizzazione a blocchi permutati: un gruppo di controllo che utilizza acqua RO (CC), gruppo sperimentale 1 che utilizza LiveSpo® Preg-Mom (AA) e gruppo sperimentale 2 che utilizza LiveSpo® KIDS (BB). Ogni paziente riceve giornalmente 2 fiale del prodotto probiotico assegnato, suddiviso in 2 dosi giornaliere. Lo studio include la valutazione clinica degli indicatori ai giorni 0, 7 e 28, come peso, tipo di feci, frequenza dei movimenti intestinali giornalieri e tempo medio di consumo per pasto.

Contenuti e metodi per il rilevamento subclinico. I partecipanti allo studio sono bambini di età compresa tra 24 e 60 mesi a cui è stata diagnosticata stitichezza, anoressia e lento aumento di peso.

• I test ematologici e biochimici vengono condotti nei giorni 0 e 28 presso l'ospedale MEDLATEC (nome proprio), Vietnam.
• Un test PCR in tempo reale viene condotto su campioni di feci ai giorni 0, 7 e 28 presso lo Spobiotic Research Center (nome proprio) per rilevare spore probiotiche, tra cui B. subtilis, B. clausii e B. coagulans, per incrociare verificare l'uso appropriato di probiotici o placebo rispettivamente nei gruppi sperimentale e di controllo.
• I test ELISA vengono condotti ai giorni 0, 7 e 28 presso lo Spobiotic Research Center (nome proprio) per determinare rispettivamente i livelli di citochine proinfiammatorie/antinfiammatorie nei campioni di sangue e i livelli di IgA nei campioni di feci, per valutare i cambiamenti nel sistema immunitario. indicatori correlati durante il trattamento di supporto.
• I test che indicano i rapporti dei batteri Gr (+) e Gr (-) nei campioni di feci vengono condotti ai giorni 0, 7 e 28 presso l'ospedale MEDLATEC (nome proprio), al fine di: valutare il cambiamento nell'equilibrio tra i tipi di batteri batteri Gr (+) e Gr (-) batteri nell'intestino.
• L'analisi di sequenziamento del metagenoma 16S V3-V4 viene eseguita presso Macrogen (Seoul, Corea) utilizzando la tecnologia di sequenziamento di nuova generazione (NGS) sulla piattaforma Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA), utilizzando una corsa 2 × 250 bp configurazione. Per l'analisi vengono utilizzati campioni di DNA estratti da campioni di feci di circa 10 pazienti rappresentativi di ciascun gruppo il giorno 0 e il giorno 28, per identificare i cambiamenti nel microbioma.
• La raccolta dei dati e l'analisi statistica comportano la raccolta di cartelle cliniche individuali e la sistematizzazione delle informazioni sui pazienti in un set di dati.

L'analisi tabellare viene eseguita su variabili dicotomiche utilizzando il test χ2 o il test esatto di Fisher quando il valore atteso di qualsiasi cella è inferiore a cinque. Le variabili continue vengono confrontate utilizzando il test di Wilcoxon, il test t o il test di Mann-Whitney quando i dati non sono distribuiti normalmente. Per determinare se esiste una differenza statisticamente significativa tra i tre gruppi, viene eseguito un test ANOVA. L'analisi di correlazione di Spearman valuta le correlazioni tra le variabili. Le analisi statistiche e grafiche vengono eseguite sul software GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Il livello di significatività di tutte le analisi è fissato a p <0,05. Valori P. L'efficacia di LiveSpo® Preg-Mom e LiveSpo® KIDS viene valutata e confrontata con il controllo sulla base dei seguenti criteri clinici e subclinici ottenuti dai gruppi di esperimento e controllo: L'esito primario è: (i) Sollievo sintomatico di stitichezza, anoressia e lento aumento di peso; Gli esiti secondari sono: (ii) Livelli regolati di citochine proinfiammatorie come IL-6, IL-10, IL-17, IL-23 e TNF-alfa nei campioni di sangue. (iii) Livelli di IgA regolati nei campioni fecali. (iv) Miglioramento della diversità e del conteggio delle specie batteriche benefiche rispetto ai batteri dannosi nel microbiota intestinale.