Wpływ suplementacji antocyjanami na metabolizm żelaza u pływaczek

W badaniu tym objęto 8-tygodniową suplementację ekstraktem z aronii czarnej o 18% standaryzację zawartości antocyjanów (dawka 2×200 mg na dzień) lub preparatem placebo sporządzonym z błonnika aronii. Pierwszy termin badań uzupełnił grupę dwudziestu czterech jednorodnych pływaczek, które intensywnie trenują pływanie i uczęszczają do Zespołu Szkół Mistrzostwa Sportowego. Drugi termin badań uzupełnił grupę dwudziestu dwóch wybiórczych i jednorodnych pływaczek, które intensywnie trenują pływanie i uczęszczają do Zespołu Szkół Mistrzostwa Sportowego.

Zamiar:

Celem pracy było sprawdzenie skuteczności spożycia aronii jako potencjalnego czynnika, który dzięki swoim właściwościom przeciwzapalnym i chelatującym jony żelaza, będzie miał wpływ na minimalizowanie niepożądanych zmian w układzie krwinek czerwonych.

Hipoteza:

Hipoteza główna: Suplementacja aronii czarnej (Aronia melanocarpa) wpływa pozytywnie na gospodarkę żelaza pływaczek.

Hipotezy pomocnicze:

1. Suplementacja aronią czarną wzmacnia status antyoksydacyjny i pozytywnie wpływa na równowagę prooksydacyjno-antyoksydacyjną.
2. Suplementacja aronii czarnej łagodzi stany zapalne wywołane intensywnymi ćwiczeniami, poprzez redukcję markerów stanu zapalnego.

Badania będą prowadzone w formie eksperymentu medycznego z ingerencją w tkanki (zgoda Komisji Etyki Badań: 538/22 z 23.06.2022, ze zmianami: 221/23 z 09.03.2023). Wszyscy pływacy zostali zakwalifikowani do badania na podstawie kryteriów włączenia i wyłączenia oraz zostali poinformowani o wyciągu z przebiegu badania i wyrazili pisemną zgodę na udział w badaniu.

ZASTOSOWANA PROCEDURA BADAŃ (PLAN BADAŃ):

A. Przed pierwszym semestrem studiów:

Kontrola Faz Cyklu Miesiączkowego od marca 2023 (po zainstalowaniu aplikacji na telefon - Kalendarz Miesiączkowy) oraz trzy ankiety w trzech terminach.

B. Pierwszy semestr studiów:

1. Kontrola cyklu miesiączkowego za pomocą aplikacji Menstrual Tracker Kalendarz okresu i ankiety przed testem pływania.
2. Analiza składu ciała (TANITA MC-780 S MA).

3. Oznaczenia biochemiczne – przed i po próbie wysiłkowej oraz po 3-godzinnej restytucji zostaną pobrane próbki krwi w celu określenia:

   • parametry morfologiczne,

   • wartość wskaźników:

     1. problemy ze statusem żelaza (żelazo, hepcydyna, erytroferron, całkowita zdolność wiązania żelaza, zdolność wiązania żelaza nienasyconego, ferrytyna, transferyna,
     2. stres oksydacyjny (całkowita zdolność antyoksydacyjna),
     3. wskaźniki immunologiczne (interleukiny: IL-6, IL-2, IL-10, białko C-reaktywne),
     4. równowaga hormonalna (progesteron, estradiol, hormon luteinizujący, hormon folikulotropowy),
     5. inne: kwas mlekowy, mioglobina, hipoksantyna.

   Próbki krwi pobrano z żyły łokciowej do dwóch probówek o pojemności 4 ml (w celu uzyskania surowicy) i odwirowano przy 3000 obr./min oraz do probówek o pojemności 2,7 ml w celu określenia morfologii. Morfologię oznaczano tego samego dnia, w którym pobrano próbki, natomiast surowicę zamrożono i przechowywano w temperaturze -80 stopni Celsjusza do czasu wykonania badań. Dodatkowo przed i bezpośrednio po próbie wysiłkowej pobierano krew włośniczkową z płatka ucha w celu określenia poziomu mleczanu.

   Poziom mleczanu oznaczono natychmiast po pobraniu krwi włośniczkowej, stosując dostępny na rynku zestaw (Dr Lange, Niemcy). Stężenie mleczanu oznaczano w mmol/l. Pozostałe pomiary wykonano przy użyciu zestawów ELISA (DRG Medtek).

4. Intensywna próba wysiłkowa na basenie, przed suplementacją - kraulem (800 m + 200 m + 50 m) z 15-minutowym aktywnym odpoczynkiem pomiędzy odcinkami testowymi.
5. Suplementacja aronią czarną - prawie 56-dniowa suplementacja ekstraktem z aronii czarnej o 18% standaryzacji zawartości antocyjanów (powiązanie z fazą cyklu miesiączkowego). Pływacy zostali losowo podzieleni na dwie grupy: suplementację i placebo. Placebo zawierało błonnik z aronii. Całość wyrobów została wyprodukowana przez firmę MLB BIOTRADE z Poznania. Pływacy przyjmowali 2 kapsułki dziennie (przed śniadaniem i kolacją), popijając każdą kapsułkę szklanką wody.

C. Drugi semestr studiów:

1. Kontrola cyklu miesiączkowego za pomocą aplikacji Menstrual Tracker Kalendarz okresu i ankiety przed testem pływania.
2. Analiza składu ciała (TANITA MC-780 S MA).

3. Oznaczenia biochemiczne – przed i po próbie wysiłkowej oraz po 3-godzinnej restytucji zostaną pobrane próbki krwi w celu określenia:

   • parametry morfologiczne (erytrocyty, leukocyty, trombocyty),

   • wartość wskaźników odpowiedzialnych za:

     1. problemy ze statusem żelaza (żelazo, hepcydyna, erytroferron, całkowita zdolność wiązania żelaza, zdolność wiązania żelaza nienasyconego, ferrytyna, transferyna),
     2. stres oksydacyjny (całkowita zdolność antyoksydacyjna),
     3. wskaźniki immunologiczne (interleukiny: IL-6, IL-2, IL-10, białko C-reaktywne (CRP)),
     4. równowaga hormonalna (progesteron, estradiol, hormon luteinizujący (LH), hormon folikulotropowy (FSH)),
     5. inne: kwas mlekowy, mioglobina, hipoksantyna.

   Próbki krwi pobrano z żyły łokciowej do dwóch probówek o pojemności 4 ml (w celu uzyskania surowicy) i odwirowano przy 3000 obr./min oraz do probówek o pojemności 2,7 ml w celu określenia morfologii. Morfologię oznaczano tego samego dnia, w którym pobrano próbki, natomiast surowicę zamrożono i przechowywano w temperaturze -80 stopni Celsjusza do czasu wykonania oznaczeń. Dodatkowo przed i bezpośrednio po próbie wysiłkowej pobierano krew włośniczkową z płatka ucha w celu określenia poziomu mleczanu.

   Poziom mleczanu oznaczono natychmiast po pobraniu krwi włośniczkowej, stosując dostępny na rynku zestaw (Dr Lange, Niemcy). Stężenie mleczanu oznaczano w mmol/l. Pozostałe pomiary wykonano przy użyciu zestawów ELISA (DRG Medtek).

4. Intensywna próba wysiłkowa na basenie, po uzupełnieniu – stylem kraulowym (800 m + 200 m + 50 m) z 15-minutowym aktywnym odpoczynkiem pomiędzy odcinkami testowymi.

Zbieranie danych, analiza laboratoryjna, analiza statystyczna i przygotowanie artykułów do publikacji.