Fenotypowy i funkcjonalny profil limfomonocytów krwi obwodowej w łojotokowym zapaleniu skóry. (PHENOTYPIC)
Profil fenotypowy i funkcjonalny limfomonocytów krwi obwodowej w łojotokowym zapaleniu skóry.
Protokół opisuje prospektywne, jednocentryczne badanie pilotażowe przeprowadzone w Istituto Dermatologico San Gallicano (IFO-ISG), mające na celu zbadanie fenotypowego i funkcjonalnego profilu limfomonocytów krwi obwodowej u osób z łojotokowym zapaleniem skóry (ŁZS) w porównaniu z grupą kontrolną osób zdrowych. Drugorzędowym celem jest zbadanie nawyków żywieniowych u osób z ŁZS.
Łojotokowe zapalenie skóry jest przewlekłą, nawracającą chorobą zapalną skóry, powszechną w okresie niemowlęcym, dojrzewania i wieku dorosłym (40-60 lat). Jego wieloczynnikowa etiologia obejmuje:
Nadczynność gruczołów łojowych i zmieniony skład lipidowy sprzyjający proliferacji Malassezia;
Metaboliczną aktywację gruczołów łojowych przez Malassezia, która generuje drażniące kwasy tłuszczowe;
Zaburzenia immunoregulacji, wpływające na aktywację i różnicowanie keratynocytów;
Uszkodzenie bariery, klinicznie objawiające się rumieniem, złuszczaniem i świądem.
Dotychczasowe badania nad komórkami odpornościowymi w tkankach barierowych (jelito, płuca, skóra) sugerują, że czynniki środowiskowe – w szczególności spożycie kwasów tłuszczowych i soli – modulują funkcjonalną polaryzację komórek Th17 vs. Treg, co ma implikacje dla autoimmunizacji. Tkankowo-rezydentne komórki pamięci T (TRM), obficie występujące w narządach barierowych, wykazują specyficzne dla miejsca markery homingowe, takie jak CCR4, CCR10, CXCR4, GATA6 i BCL6. Natomiast krążące subpopulacje TEM i TEMRA mają wspólne profile w różnych tkankach.
Protocollo_Profilo fenotipico e…
W skórze komórki Th17 wykazują zmienne stany transkrypcyjne, które mogą odzwierciedlać zależne od tkanki stany funkcjonalne, a nie stałe podtypy. Badania nad ŁZS koncentrowały się głównie na skórnych odpowiedziach immunologicznych, podkreślając rolę komórek Tγδ, cytokin (IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, TNF-α) oraz β-defensyn, związanych z dojrzewaniem komórek dendrytycznych indukowanym przez lipidy łojowe i aktywacją inflamasomu NLRP3. Malassezia może również indukować uwalnianie IL-1β z komórek dendrytycznych in vitro. Jednak niewiele wiadomo o tym, jak ŁZS wpływa na krążące komórki odpornościowe lub jak wzorce żywieniowe wpływają na ogólnoustrojowe odpowiedzi immunologiczne w tej chorobie.
Populacja badana
Badanie obejmie 15 pacjentów z ŁZS i 15 osób zdrowych (grupa kontrolna) w wieku 45-75 lat, obojga płci. Pacjenci z ŁZS muszą mieć łagodne do umiarkowane zmiany na twarzy i musieli zaprzestać leczenia miejscowego lub ogólnoustrojowego co najmniej na dwa tygodnie przed badaniem. Kryteria wykluczenia obejmują inne choroby skóry, zaburzenia neurodegeneracyjne, immunosupresję, trwające leczenie lub zakażenie HIV. Osoby z grupy kontrolnej są wybierane spośród personelu IFO, krewnych oraz osób poddawanych rutynowym badaniom dermatologicznym.
Metody
Po całonocnym poście uczestnicy przechodzą pobranie krwi żylnej (7 ml). Osocze jest oddzielane i przechowywane w temperaturze -80°C w celu analizy profilu sekrecyjnego i lipidomicznego. Limfomonocyty są izolowane przy użyciu gradientów Ficoll-Hypaque i analizowane metodą cytometrii przepływowej w celu scharakteryzowania fenotypów immunologicznych. Każdy uczestnik wypełnia kwestionariusz żywieniowy przy rekrutacji. Zbierane dane obejmują dane demograficzne, historię kliniczną, informacje o diecie, wyniki laboratoryjne oraz dane kliniczne specyficzne dla ŁZS (dla grupy pacjentów).
Plan statystyczny
Jako badanie pilotażowe, dane zostaną podsumowane wyłącznie za pomocą statystyk opisowych; nie będą przeprowadzane żadne formalne porównania. Wyniki będą generować hipotezy do przyszłych badań. Rekrutacja jest planowana na 18 miesięcy, a całkowity czas trwania badania wynosi 24 miesiące.
Aspekty etyczne i administracyjne
Badanie jest zgodne z Dobrą Praktyką Kliniczną, Deklaracją Helsińską oraz przepisami UE i krajowymi. Wymagana jest zgoda komisji etycznej przed rozpoczęciem badania. Uczestnicy muszą wyrazić pisemną świadomą zgodę zarówno na udział w badaniu, jak i na przetwarzanie danych. Dane będą przetwarzane zgodnie z RODO, z użyciem pseudonimizacji, bezpiecznego przechowywania i ograniczonego dostępu. Upoważnieni monitorzy i organy regulacyjne mogą wglądać w dokumentację źródłową. Próbki biologiczne będą przechowywane do zakończenia analiz. Wyniki zostaną opublikowane w zagregowanej, nieidentyfikowalnej formie w czasopismach naukowych i na konferencjach.
Przegląd badań
Status
Szczegółowy opis
Łojotokowe zapalenie skóry (ŁZS) jest przewlekle nawracającą zapalną chorobą skóry z trzema szczytami zachorowań: w ciągu pierwszych trzech miesięcy życia, w okresie dojrzewania i w wieku dorosłym (40-60 lat). Jego etiologia jest wieloczynnikowa i można ją przypisać: (I) nadmiernej produkcji łoju przez gruczoł łojowy (GL) oraz zmianom w jego składzie, tworząc środowisko sprzyjające wzrostowi Malassezia; (II) aktywacji metabolizmu GL i jego aktywności wydzielniczej przez Malassezia, z uwalnianiem drażniących nasyconych i nienasyconych kwasów tłuszczowych; (III) upośledzeniu funkcji układu odpornościowego, prowadzącemu do indukcji aktywacji i różnicowania keratynocytów; oraz (IV) zaburzeniu bariery skórnej, odpowiedzialnej za objawy kliniczne, takie jak rumień, świąd i złuszczanie.
Badania skupiające się na obecności komórek immunokompetentnych w miejscach barierowych (blaszka właściwa jelit, płuca i skóra) wykazały, że na poziomie jelitowym dieta i metabolizm mogą wpływać na fenotyp limfocytów Th17. Rzeczywiście, wzbogacenie diety w krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe może promować różnicowanie w kierunku Treg, podczas gdy zwyczajowe spożycie długołańcuchowych kwasów tłuszczowych, a także większe spożycie soli, wiąże się ze zwiększoną liczbą limfocytów o profilu funkcjonalnym Th17, a zatem ze stanem autoimmunizacji. Miejsca barierowe są zazwyczaj bogate w komórki TRM (tkankowo-rezydentne pamięciowe T), które wykazują specyficzne dla miejsca profile funkcjonalne dostosowane do lokalnych wymagań homingowych. W skórze komórki TRM charakteryzują się wysoką ekspresją CCR4, CCR10, CXCR4, GATA6 i BCL6. W przeciwieństwie do tego, przedziały TEM (efektorowe pamięciowe T) i TEMRA (terminowo zróżnicowane efektorowe pamięciowe) wydają się dzielić profil funkcjonalny między różnymi miejscami barierowymi i tkankami obwodowymi.
Jednak klasyfikację komórek T w miejscach barierowych na podtypy Th1, Th17 i Th2 należy postrzegać w sposób zniuansowany – jako wyraz cech funkcjonalnych, a nie ostateczny wynik procesu dojrzewania i różnicowania. W szczególności limfocyty Th17 mogą modyfikować swój fenotyp funkcjonalny, wykazując odrębne profile transkrypcyjne związane z potencjałem homeostatycznym lub patogennym, co sugeruje, że należy je uważać za stany funkcjonalne zależne od tkanki, a nie za różne typy komórek. Limfocyty Th17 są związane z wydzielaniem IL-17A, IL-17F i IL-22 i zależą od szlaku sygnalizacyjnego zależnego od RORγt, podczas gdy TGF-β i IL-6 są wymagane do ich wytworzenia z naiwnych limfocytów T. Badania dotyczące zaangażowania składników odpornościowych w etiopatogenezę ŁZS dotychczas koncentrowały się na skórze, gdzie zaobserwowano rolę komórek T γδ, z wydzielaniem IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, TNF-α, β-defensyn – prawdopodobnie związanych z dojrzewaniem komórek dendrytycznych indukowanych przez lipidy łojowe i późniejszą indukcją inflammasomu NLRP3.
Sama Malassezia może indukować uwalnianie IL-1β in vitro przez komórki dendrytyczne uzyskane z krwi obwodowej.
Obecnie nie ma dostępnych badań dotyczących możliwego zaangażowania, w zakresie modulacji funkcjonalnej, limfomonocytów krwi obwodowej w patogenezie ŁZS.
Podobnie, pomimo znanych wpływów diety na funkcję komórek Th17 w miejscach barierowych, takich jak błona śluzowa jelit, brakuje danych dotyczących roli diety i stylu życia w łojotokowym zapaleniu skóry.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
Italy
-
Roma, Italy, Włochy, 00144
- San Gallicano Dermatological Institute IRCCS
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
- Dorosły
- Starszy dorosły
Akceptuje zdrowych ochotników
Metoda próbkowania
Badana populacja
Opis
Kryteria włączenia:
- Pacjenci dotknięci Łojotokowym Zapaleniem Skóry (ŁZS) twarzy o łagodnym do umiarkowanego nasileniu; inne obszary łojotokowe ciała również mogą być dotknięte.
Obie płci. Wiek 45-75 lat. Leczenie ŁZS, miejscowe i/lub ogólnoustrojowe, zawieszone na co najmniej dwa (2) tygodnie.
Gotowość do przestrzegania wizyt/procedur wymaganych przez badanie. Podpisanie świadomej zgody.
Kryteria wykluczenia:
- Współistniejące schorzenia dermatologiczne, takie jak na przykład atopowe zapalenie skóry, trądzik różowaty, trądzik, łuszczyca, poza stanem włączenia (Łojotokowe Zapalenie Skóry).
Zdiagnozowane choroby neurodegeneracyjne. Trwające leczenie farmakologiczne, miejscowe lub ogólnoustrojowe, z powodu Łojotokowego Zapalenia Skóry (ŁZS).
Immunosupresja. Sieropozytywność w kierunku HIV.
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
Kohorty i interwencje
Grupa / Kohorta |
|---|
|
Łojotokowe zapalenie skóry (DS)
Uczestnicy w wieku 45-75 lat z łagodną do umiarkowanej łojotokowym zapaleniem skóry twarzy.
Dodatkowe obszary łojotokowe mogą być dotknięte.
Pobiera się próbki krwi do analizy osocza (profilowanie wydzielnicze i lipidomiczne) oraz do izolacji limfomonocytów i fenotypowania cytometrii przepływowej.
Uczestnicy wypełniają również kwestionariusz nawyków żywieniowych.
|
|
Kontrole Niezwiązane (NA)
Zdrowi ochotnicy w wieku 45-75 lat bez łojotokowego zapalenia skóry lub innych istotnych chorób dermatologicznych.
Grupa kontrolna przechodzi te same procedury laboratoryjne i ankietowe jak grupa DS.
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Profil fenotypowy i funkcjonalny limfomonocytów krwi obwodowej
Ramy czasowe: Linia bazowa (dzień 1)
|
Ocena profilu immunologicznego komórek jednojądrzastych krwi obwodowej (PBMC) u pacjentów z łojotokowym zapaleniem skóry w porównaniu z osobami zdrowymi. Analiza obejmuje: Charakterystyka fenotypowa (cytometria przepływowa): Ekspresja markerów powierzchniowych komórek w celu identyfikacji regulatorowych limfocytów T (CD45, CD4, CD25, CD127, FoxP3), ogólnych podzbiorów immunologicznych (CD3, CD4, CD8, CD14, CD16, CD19, CD45, CD56) oraz aktywowanych limfocytów T (CD8, HLA-DR, CD38, CD3, CD4, CD45RA, CD197). Profil funkcjonalny/sekrecyjny (multiplex/ELISA): Pomiar stężeń osoczowych następujących cytokin: IL-4, IL-5, IL-8, IL-12, IL-13, IL-18, IL-31, TNF-a, IFN-a, IFN-g, GRO-a, IL-6, IL1a/b, IL-20, IL-23, IL-17A/F, IL-22, GM-CSF i TSLP. |
Linia bazowa (dzień 1)
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Ocena nawyków żywieniowych
Ramy czasowe: Linia podstawowa (Dzień 1)
|
Ocena nawyków żywieniowych i stylu życia za pomocą samodzielnie wypełnianego kwestionariusza częstotliwości spożycia żywności i stylu życia (zawierającego elementy kwestionariusza MeDiWeB) w celu porównania wzorców żywieniowych między grupą z łojotokowym zapaleniem skóry a grupą kontrolną.
|
Linia podstawowa (Dzień 1)
|
Współpracownicy i badacze
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- RS 170/ISG/24
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .