Fenotypový a funkční profil periferních krvních lymfomonocytů u seboroické dermatitidy. (PHENOTYPIC)

Protokol popisuje prospektivní, monocentrickou pilotní studii prováděnou v Istituto Dermatologico San Gallicano (IFO-ISG), jejímž cílem je prozkoumat fenotypický a funkční profil lymfomonocytů periferní krve u jedinců se seboroickou dermatitidou (SD) ve srovnání s nepostiženými kontrolami. Sekundárním cílem je prozkoumat stravovací návyky u subjektů se SD.

Seboroická dermatitida je chronické-relabující zánětlivé kožní onemocnění, běžné v dětství, pubertě a dospělosti (40-60 let). Její multifaktoriální etiologie zahrnuje:

Hyperaktivitu mazových žláz a změněné složení lipidů, které podporuje proliferaci Malassezia;

Metabolickou aktivaci mazových žláz Malassezií, která vytváří dráždivé mastné kyseliny;

Imunitní dysregulaci, ovlivňující aktivaci a diferenciaci keratinocytů;

Narušení bariéry, klinicky se projevující erytémem, šupinatěním a svěděním.

Předchozí výzkum imunitních buněk v bariérových tkáních (střevo, plíce, kůže) naznačuje, že environmentální faktory – zejména příjem dietních mastných kyselin a soli – modulují funkční polarizaci Th17 vs. Treg buněk, s důsledky pro autoimunitu. Tkáňově rezidentní paměťové T buňky (TRM), hojné v bariérových orgánech, vykazují místně specifické homingové markery jako CCR4, CCR10, CXCR4, GATA6 a BCL6. Naopak cirkulující TEM a TEMRA subpopulace sdílejí společné profily napříč tkáněmi.

Protocollo_Profilo fenotipico e…

V kůži vykazují Th17 buňky variabilní transkripční stavy, které mohou odrážet tkáňově závislé funkční stavy spíše než pevné podtypy. Studie na SD se zaměřovaly hlavně na kožní imunitní odpovědi, zdůrazňující role Tγδ buněk, cytokinů (IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, TNF-α) a β-defenzinů, spojených s maturací dendritických buněk řízenou mazovými lipidy a aktivací NLRP3 inflamazomu. Malassezia může také indukovat uvolňování IL-1β z dendritických buněk in vitro. Nicméně, málo je známo o tom, jak SD ovlivňuje cirkulující imunitní buňky nebo jak stravovací vzorce ovlivňují systémové imunitní odpovědi u tohoto onemocnění.

Studijní populace

Studie zahrne 15 pacientů se SD a 15 nepostižených (NA) kontrol, ve věku 45-75 let, obou pohlaví. Pacienti se SD musí mít mírné až střední postižení obličeje a musí přerušit lokální nebo systémovou léčbu alespoň na dva týdny. Vylučovací kritéria zahrnují jiná kožní onemocnění, neurodegenerativní poruchy, imunosupresi, probíhající léčbu nebo pozitivitu na HIV. Kontroly jsou vybírány z personálu IFO, příbuzných a jedinců podstupujících rutinní dermatologická vyšetření.

Metody

Po nočním lačnění podstoupí účastníci odběr žilní krve (7 ml). Plazma je separována a skladována při -80°C pro sekreční a lipidomické profilování. Lymfomonocyty jsou izolovány pomocí gradientů Ficoll-Hypaque a analyzovány průtokovou cytometrií ke charakterizaci imunologických fenotypů. Každý účastník vyplní při zařazení dotazník o stravování. Shromážděná data zahrnují demografické údaje, klinickou anamnézu, informace o stravování, laboratorní nálezy a klinická data specifická pro SD (pro skupinu pacientů).

Statistický plán

Jako pilotní studie budou data shrnuta pouze pomocí popisné statistiky; nebudou prováděna formální srovnání. Zjištění vygenerují hypotézy pro budoucí výzkum. Nábor je plánován na 18 měsíců, s celkovou délkou studie 24 měsíců.

Etické a administrativní aspekty

Studie dodržuje Dobrou klinickou praxi, Helsinskou deklaraci a evropské/národní předpisy. Před zahájením je vyžadováno etické schválení. Účastníci musí poskytnout písemný informovaný souhlas jak pro účast ve studii, tak pro zpracování dat. Data budou zpracovávána v souladu s GDPR, pomocí pseudonymizace, zabezpečeného uložení a omezeného přístupu. Autorizovaní monitoroři a regulační orgány mohou kontrolovat zdrojové dokumenty. Biologické vzorky budou skladovány až do dokončení analýz. Výsledky budou publikovány v agregované, neidentifikovatelné formě ve vědeckých časopisech a na konferencích.