Perfil Fenotípico y Funcional de los Linfomonocitos de Sangre Periférica en la Dermatitis Seborreica. (PHENOTYPIC)
El protocolo describe un estudio piloto prospectivo y monocéntrico realizado en el Istituto Dermatologico San Gallicano (IFO-ISG) cuyo objetivo es investigar el perfil fenotípico y funcional de los linfomonocitos de sangre periférica en individuos con dermatitis seborreica (DS) en comparación con controles no afectados. Un objetivo secundario es explorar los hábitos dietéticos en sujetos con DS.
La dermatitis seborreica es una enfermedad inflamatoria cutánea crónica-recurrente, común en la infancia, la pubertad y la edad adulta (40-60 años). Su etiología multifactorial implica:
Hiperactividad de las glándulas sebáceas y composición lipídica alterada que favorece la proliferación de Malassezia;
Activación metabólica de las glándulas sebáceas por Malassezia, que genera ácidos grasos irritantes;
Desregulación inmunitaria, que influye en la activación y diferenciación de los queratinocitos;
Alteración de la barrera, que clínicamente se manifiesta como eritema, descamación y prurito.
Investigaciones previas sobre células inmunitarias en tejidos de barrera (intestino, pulmón, piel) sugieren que factores ambientales, en particular los ácidos grasos dietéticos y la ingesta de sal, modulan la polarización funcional de las células Th17 frente a Treg, con implicaciones para la autoinmunidad. Las células T de memoria residentes en tejidos (TRM), abundantes en órganos de barrera, presentan marcadores de homing específicos del sitio, como CCR4, CCR10, CXCR4, GATA6 y BCL6. Por el contrario, los subconjuntos circulantes TEM y TEMRA comparten perfiles comunes entre tejidos.
Protocollo_Profilo fenotipico e…
En la piel, las células Th17 exhiben estados transcripcionales variables que pueden reflejar estados funcionales dependientes del tejido en lugar de subtipos fijos. Los estudios sobre DS se han centrado principalmente en las respuestas inmunitarias cutáneas, destacando los papeles de las células Tγδ, las citocinas (IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, TNF-α) y las β-defensinas, vinculadas a la maduración de las células dendríticas impulsada por lípidos sebáceos y la activación del inflamasoma NLRP3. Malassezia también puede inducir la liberación de IL-1β de las células dendríticas in vitro. Sin embargo, se sabe poco sobre cómo la DS afecta a las células inmunitarias circulantes o cómo los patrones dietéticos influyen en las respuestas inmunitarias sistémicas en esta enfermedad.
Población del estudio
El estudio incluirá a 15 pacientes con DS y 15 controles no afectados (NA), de 45 a 75 años, de ambos sexos. Los pacientes con DS deben tener afectación facial leve a moderada y haber suspendido los tratamientos tópicos o sistémicos durante al menos dos semanas. Los criterios de exclusión incluyen otras enfermedades cutáneas, trastornos neurodegenerativos, inmunosupresión, tratamientos en curso o positividad al VIH. Los controles se seleccionan entre el personal del IFO, familiares e individuos que se someten a exámenes dermatológicos de rutina.
Métodos
Tras un ayuno nocturno, los participantes se someten a una extracción de sangre venosa (7 mL). El plasma se separa y almacena a -80°C para el perfil secretor y lipidómico. Los linfomonocitos se aíslan utilizando gradientes de Ficoll-Hypaque y se analizan mediante citometría de flujo para caracterizar los fenotipos inmunológicos. Cada participante completa un cuestionario dietético al inicio. Los datos recopilados incluyen información demográfica, antecedentes clínicos, información dietética, hallazgos de laboratorio y datos clínicos específicos de la DS (para el grupo de pacientes).
Plan estadístico
Como estudio piloto, los datos se resumirán únicamente con estadística descriptiva; no se realizarán comparaciones formales. Los hallazgos generarán hipótesis para futuras investigaciones. El reclutamiento está planificado durante 18 meses, con una duración total del estudio de 24 meses.
Aspectos éticos y administrativos
El estudio se adhiere a las Buenas Prácticas Clínicas, la Declaración de Helsinki y las regulaciones de la UE/nacionales. Se requiere aprobación ética antes de iniciar. Los participantes deben proporcionar consentimiento informado por escrito tanto para la participación en el estudio como para el procesamiento de datos. Los datos se manejarán de conformidad con el GDPR, utilizando seudonimización, almacenamiento seguro y acceso restringido. Los monitores autorizados y las autoridades reguladoras pueden inspeccionar los documentos fuente. Las muestras biológicas se almacenarán hasta la finalización de los análisis. Los resultados se publicarán de forma agregada y no identificable en revistas científicas y conferencias.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Descripción detallada
La dermatitis seborreica (SD) es una enfermedad inflamatoria crónica-recurrente de la piel con tres picos de incidencia: dentro de los primeros tres meses de vida, durante la pubertad y en la edad adulta (40-60 años). Su etiología es multifactorial y puede atribuirse a: (I) producción excesiva de sebo por la glándula sebácea (SG) y alteraciones en su composición, creando un entorno favorable para el crecimiento de Malassezia; (II) activación del metabolismo de la SG y su actividad secretora por Malassezia, con la liberación de ácidos grasos saturados e insaturados irritantes; (III) deterioro de la función del sistema inmunitario, que conduce a la inducción de la activación y diferenciación de queratinocitos; y (IV) alteración de la barrera cutánea, responsable de manifestaciones clínicas como eritema, picor y descamación.
Los estudios centrados en la presencia de células inmunocompetentes en sitios de barrera (lámina propia intestinal, pulmones y piel) han demostrado que, a nivel intestinal, la dieta y el metabolismo pueden influir en el fenotipo de los linfocitos Th17. De hecho, el enriquecimiento dietético en ácidos grasos de cadena corta puede promover la diferenciación hacia Treg, mientras que la ingesta dietética habitual de ácidos grasos de cadena larga, así como un mayor consumo de sal, se asocia con un mayor número de linfocitos con un perfil funcional Th17, y por tanto con un estado de autoinmunidad. Los sitios de barrera suelen ser ricos en células TRM (células T de memoria residentes en tejidos), que muestran perfiles funcionales específicos del sitio adaptados a los requisitos locales de homing. En la piel, las TRM se caracterizan por una alta expresión de CCR4, CCR10, CXCR4, GATA6 y BCL6. En cambio, los compartimentos TEM (memoria efectora T) y TEMRA (memoria efectora terminalmente diferenciada) parecen compartir un perfil funcional en diferentes sitios de barrera y tejidos periféricos.
Sin embargo, la clasificación de las células T de los sitios de barrera en subtipos Th1, Th17 y Th2 debe verse de manera matizada, como una expresión de características funcionales más que como el resultado final de un proceso de maduración y diferenciación. En particular, los linfocitos Th17 pueden modificar su fenotipo funcional, exhibiendo perfiles transcripcionales distintos asociados con potencial homeostático o patógeno, lo que sugiere que estos deberían considerarse estados funcionales dependientes del tejido en lugar de tipos celulares diferentes. Los linfocitos Th17 se asocian con la secreción de IL-17A, IL-17F e IL-22, y dependen de la vía de señalización dependiente de RORγt, mientras que TGF-β e IL-6 son necesarios para su generación a partir de linfocitos T vírgenes. Los estudios sobre la participación de componentes inmunitarios en la etiopatogenia de la SD se han centrado hasta ahora en la piel, donde se ha observado un papel de las células T γδ, con secreción de IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, TNF-α, β-defensinas, probablemente relacionado con la maduración de células dendríticas inducida por lípidos sebáceos y la posterior inducción del inflamasoma NLRP3.
La propia Malassezia puede inducir la liberación de IL-1β in vitro por células dendríticas obtenidas de sangre periférica.
Actualmente no hay estudios disponibles sobre la posible participación, en términos de modulación funcional, de los linfomonocitos de sangre periférica en la patogénesis de la SD.
Asimismo, a pesar de las influencias dietéticas conocidas en la función de las células Th17 en sitios de barrera como la mucosa intestinal, faltan datos sobre el papel de la dieta y el estilo de vida en la dermatitis seborreica.
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Italy
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Roma, Italy, Italia, 00144
- San Gallicano Dermatological Institute IRCCS
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
- Adulto
- Adulto Mayor
Acepta Voluntarios Saludables
Método de muestreo
Población de estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- Pacientes afectados por Dermatitis Seborreica (DS) facial de gravedad leve a moderada; otras áreas sebáceas del cuerpo también pueden estar afectadas.
Ambos sexos. Edad 45-75 años. Tratamientos para DS, tópicos y/o sistémicos, suspendidos durante al menos dos (2) semanas.
Disposición para cumplir con las citas/procedimientos requeridos por el estudio. Firma del consentimiento informado.
Criterios de exclusión:
- Condiciones dermatológicas concomitantes, tales como, por ejemplo, dermatitis atópica, rosácea, acné, psoriasis, además de la condición de inclusión (Dermatitis Seborreica).
Enfermedades neurodegenerativas diagnosticadas. Tratamiento farmacológico en curso, tópico o sistémico, para Dermatitis Seborreica (DS).
Inmunosupresión. Seropositividad al VIH.
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
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Dermatitis Seborreica (DS)
Participantes de 45 a 75 años con dermatitis seborreica facial leve a moderada.
También pueden verse afectadas otras áreas sebáceas.
Se recogen muestras de sangre para análisis de plasma (perfil secretorio y lipidómico) y para aislamiento de linfomonocitos y fenotipado por citometría de flujo.
Los participantes también completan un cuestionario sobre hábitos dietéticos.
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Controles No Afectados (NA)
Voluntarios sanos de 45 a 75 años sin dermatitis seborreica u otras enfermedades dermatológicas relevantes.
Los controles se someten a los mismos procedimientos de laboratorio y cuestionario que el grupo DS.
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Perfil Fenotípico y Funcional de Linfomonocitos de Sangre Periférica
Periodo de tiempo: Línea de base (Día 1)
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Evaluación del perfil inmunológico de las Células Mononucleares de Sangre Periférica (PBMC) en pacientes con Dermatitis Seborreica en comparación con controles sanos. El análisis incluye: Caracterización Fenotípica (Citometría de Flujo): Expresión de marcadores de superficie celular para identificar Células T Reguladoras (CD45, CD4, CD25, CD127, FoxP3), subconjuntos inmunitarios generales (CD3, CD4, CD8, CD14, CD16, CD19, CD45, CD56), y Células T activadas (CD8, HLA-DR, CD38, CD3, CD4, CD45RA, CD197). Perfil Funcional/Secretor (Multiplex/ELISA): Medición de las concentraciones plasmáticas de las siguientes citocinas: IL-4, IL-5, IL-8, IL-12, IL-13, IL-18, IL-31, TNF-a, IFN-a, IFN-g, GRO-a, IL-6, IL1a/b, IL-20, IL-23, IL-17A/F, IL-22, GM-CSF y TSLP. |
Línea de base (Día 1)
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Evaluación de Hábitos Alimenticios
Periodo de tiempo: Baseline (Día 1)
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Evaluación de los hábitos dietéticos y el estilo de vida mediante un cuestionario de frecuencia alimentaria y de estilo de vida autoadministrado (incluyendo elementos del cuestionario MeDiWeB) para comparar los patrones nutricionales entre el grupo de Dermatitis Seborreica y el grupo de control.
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Baseline (Día 1)
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Colaboradores e Investigadores
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Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Actual)
Finalización del estudio (Actual)
Fechas de registro del estudio
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Términos relacionados con este estudio
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Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- RS 170/ISG/24
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Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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