Perfil Fenotípico e Funcional dos Linfomonócitos do Sangue Periférico na Dermatite Seborreica. (PHENOTYPIC)

O protocolo descreve um estudo piloto prospetivo e monocêntrico realizado no Istituto Dermatologico San Gallicano (IFO-ISG), que visa investigar o perfil fenotípico e funcional dos linfomonócitos do sangue periférico em indivíduos com dermatite seborreica (DS) em comparação com controlos não afetados. Um objetivo secundário é explorar os hábitos alimentares em sujeitos com DS.

A dermatite seborreica é uma doença inflamatória da pele crónica e recidivante, comum na infância, puberdade e idade adulta (40-60 anos). A sua etiologia multifatorial envolve:

Hiperatividade das glândulas sebáceas e composição lipídica alterada, que promovem a proliferação de Malassezia;

Ativação metabólica das glândulas sebáceas pela Malassezia, que gera ácidos gordos irritantes;

Desregulação imunitária, influenciando a ativação e diferenciação dos queratinócitos;

Rutura da barreira, resultando clinicamente em eritema, descamação e prurido.

Investigação anterior sobre células imunitárias em tecidos de barreira (intestino, pulmão, pele) sugere que fatores ambientais — particularmente ácidos gordos dietéticos e ingestão de sal — modulam a polarização funcional das células Th17 vs. Treg, com implicações para a autoimunidade. As células T de memória residentes nos tecidos (TRM), abundantes em órgãos de barreira, exibem marcadores de homing específicos do local, como CCR4, CCR10, CXCR4, GATA6 e BCL6. Em contraste, os subconjuntos circulantes TEM e TEMRA partilham perfis comuns entre tecidos.

Protocollo_Profilo fenotipico e…

Na pele, as células Th17 exibem estados transcricionais variáveis que podem refletir estados funcionais dependentes do tecido, em vez de subtipos fixos. Estudos em DS focaram-se principalmente nas respostas imunitárias cutâneas, destacando papéis para células Tγδ, citocinas (IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, TNF-α) e β-defensinas, ligadas à maturação de células dendríticas impulsionada por lípidos sebáceos e ativação do inflamassoma NLRP3. A Malassezia também pode induzir a libertação de IL-1β por células dendríticas in vitro. Contudo, sabe-se pouco sobre como a DS afeta as células imunitárias circulantes ou como os padrões alimentares influenciam as respostas imunitárias sistémicas nesta doença.

População do estudo

O estudo incluirá 15 doentes com DS e 15 controlos não afetados (NA), com idades entre 45-75 anos, de ambos os sexos. Os doentes com DS devem ter envolvimento facial ligeiro a moderado e devem ter interrompido tratamentos tópicos ou sistémicos durante pelo menos duas semanas. Os critérios de exclusão incluem outras doenças da pele, distúrbios neurodegenerativos, imunossupressão, tratamentos em curso ou positividade para VIH. Os controlos são selecionados entre o pessoal do IFO, familiares e indivíduos submetidos a exames dermatológicos de rotina.

Métodos

Após jejum noturno, os participantes são submetidos a colheita de sangue venoso (7 mL). O plasma é separado e armazenado a -80°C para perfis secretório e lipidómico. Os linfomonócitos são isolados usando gradientes de Ficoll-Hypaque e analisados por citometria de fluxo para caracterizar fenótipos imunológicos. Cada participante preenche um questionário alimentar no momento da inscrição. Os dados recolhidos incluem demografia, história clínica, informação alimentar, achados laboratoriais e dados clínicos específicos da DS (para o grupo de doentes).

Plano estatístico

Como estudo piloto, os dados serão resumidos apenas com estatísticas descritivas; não serão realizadas comparações formais. Os resultados gerarão hipóteses para investigação futura. O recrutamento está planeado para 18 meses, com uma duração total do estudo de 24 meses.

Aspectos éticos e administrativos

O estudo adere às Boas Práticas Clínicas, à Declaração de Helsínquia e às regulamentações da UE/nacionais. É necessária aprovação ética antes do início. Os participantes devem fornecer consentimento informado por escrito tanto para a participação no estudo como para o processamento de dados. Os dados serão tratados em conformidade com o RGPD, usando pseudonimização, armazenamento seguro e acesso restrito. Monitores autorizados e autoridades reguladoras podem inspecionar documentos-fonte. As amostras biológicas serão armazenadas até à conclusão das análises. Os resultados serão publicados de forma agregada e não identificável em revistas científicas e conferências.