Фенотипический и функциональный профиль лимфомоноцитов периферической крови при себорейном дерматите. (PHENOTYPIC)

Протокол описывает проспективное, моноцентрическое пилотное исследование, проводимое в Институте дерматологии Сан-Галликано (IFO-ISG), направленное на изучение фенотипического и функционального профиля лимфомоноцитов периферической крови у лиц с себорейным дерматитом (СД) по сравнению с непоражёнными контролями. Второстепенной целью является изучение пищевых привычек у субъектов с СД.

Себорейный дерматит — это хронически-рецидивирующее воспалительное заболевание кожи, распространённое в младенчестве, пубертатном периоде и зрелом возрасте (40–60 лет). Его многофакторная этиология включает:

Гиперактивность сальных желез и изменённый липидный состав, способствующие пролиферации Malassezia;

Метаболическую активацию сальных желез Malassezia, которая генерирует раздражающие жирные кислоты;

Иммунную дисрегуляцию, влияющую на активацию и дифференцировку кератиноцитов;

Нарушение барьера, клинически проявляющееся эритемой, шелушением и зудом.

Предыдущие исследования иммунных клеток в барьерных тканях (кишечник, лёгкие, кожа) предполагают, что факторы окружающей среды, особенно пищевые жирные кислоты и потребление соли, модулируют функциональную поляризацию Th17 против Treg клеток, что имеет значение для аутоиммунитета. Тканерезидентные Т-клетки памяти (TRM), обильные в барьерных органах, демонстрируют сайт-специфические маркеры хоминга, такие как CCR4, CCR10, CXCR4, GATA6 и BCL6. В отличие от них, циркулирующие подмножества TEM и TEMRA имеют общие профили в разных тканях.

Protocollo_Profilo fenotipico e…

В коже Th17 клетки проявляют вариабельные транскрипционные состояния, которые могут отражать тканезависимые функциональные состояния, а не фиксированные подтипы. Исследования СД в основном были сосредоточены на кожных иммунных ответах, подчёркивая роли Tγδ клеток, цитокинов (IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, TNF-α) и β-дефензинов, связанных с созреванием дендритных клеток, вызванным липидами сальных желез, и активацией NLRP3 инфламмасомы. Malassezia также может индуцировать высвобождение IL-1β из дендритных клеток in vitro. Однако мало известно о том, как СД влияет на циркулирующие иммунные клетки или как пищевые паттерны влияют на системные иммунные ответы при этом заболевании.

Исследуемая популяция

В исследование будут включены 15 пациентов с СД и 15 непоражённых (НП) контролей в возрасте 45–75 лет, обоего пола. Пациенты с СД должны иметь лёгкое-умеренное поражение лица и должны были прекратить местное или системное лечение как минимум за две недели. Критерии исключения включают другие кожные заболевания, нейродегенеративные расстройства, иммуносупрессию, текущее лечение или ВИЧ-позитивность. Контроли отбираются из персонала IFO, родственников и лиц, проходящих плановые дерматологические обследования.

Методы

После ночного голодания участники проходят забор венозной крови (7 мл). Плазма отделяется и хранится при -80°C для секреторного и липидомического профилирования. Лимфомоноциты выделяются с использованием градиентов Ficoll-Hypaque и анализируются методом проточной цитометрии для характеристики иммунологических фенотипов. Каждый участник заполняет пищевой опросник при включении. Собранные данные включают демографические, клинический анамнез, пищевую информацию, лабораторные находки и клинические данные, специфичные для СД (для группы пациентов).

Статистический план

Как пилотное исследование, данные будут суммированы только с помощью описательной статистики; формальные сравнения проводиться не будут. Результаты сгенерируют гипотезы для будущих исследований. Набор запланирован на 18 месяцев, с общей продолжительностью исследования 24 месяца.

Этические и административные аспекты

Исследование соответствует Надлежащей клинической практике, Хельсинкской декларации и нормам ЕС/страны. Этическое одобрение требуется до начала. Участники должны предоставить письменное информированное согласие как на участие в исследовании, так и на обработку данных. Данные будут обрабатываться в соответствии с GDPR, с использованием псевдонимизации, безопасного хранения и ограниченного доступа. Авторизованные мониторы и регулирующие органы могут инспектировать исходные документы. Биологические образцы будут храниться до завершения анализов. Результаты будут опубликованы в агрегированной, неидентифицируемой форме в научных журналах и на конференциях.