Usando AS-OCT para avaliar o papel da idade e da região na morfologia e espessura epitelial do limbo

O limbo localizado entre a córnea e o tecido conjuntivo, com aproximadamente 1,5 mm de largura em olhos humanos adultos, é importante não só por fornecer uma fronteira de barreira para impedir a invasão do tecido conjuntival na córnea, contendo nervos que passam para a córnea, possuindo vascularização sanguínea e linfática para entrega de oxigênio e nutrientes, mas também o ambiente de nicho das células-tronco límbicas. O limbo humano contém caroços fibrovasculares orientados radialmente denominados paliçadas de Vogt (POV), um tecido único observado pela primeira vez em 1866 e descrito em detalhes em 1921. O ponto de vista tem estrutura, configuração e dimensão únicas que foram comumente encontradas em todos os tipos de nicho de células-tronco epiteliais em todo o corpo, que incluem a complicada área de nicho que fornece um local seguro para proteger as células-tronco de danos ou lesões. Durante os últimos anos, o progresso na pesquisa com células-tronco e na terapia celular concentrou a atenção no ponto de vista como o local das células-tronco que mantêm a homeostase e a clareza do epitélio da córnea. O POV também fornece o ambiente de nicho para células-tronco límbicas. As células de nicho que cercam as células-tronco do limbo, o ambiente estromal sob as células epiteliais do limbo, os vasos sanguíneos e a inervação nervosa ao redor do epitélio do limbo ajudam a criar o ambiente de nicho exclusivo para as células-tronco do limabl. A compreensão da estrutura límbica, especialmente do ponto de vista, é necessária para o tratamento de danos límbicos e para o desenvolvimento de terapias com células-tronco destinadas a restaurar a função prejudicada das células-tronco límbicas.

Até agora, os sistemas de imagem in vivo não são capazes de visualizar ou identificar diretamente as células-tronco límbicas. Uma alternativa prática é visualizar a morfologia histológica do POV e especular o possível status das células-tronco de acordo. No entanto, a microestrutura do POV não é bem definida ou compreendida, apesar da consciência de sua importância. O biomicroscópio com lâmpada de fenda pode ser usado rotineiramente para o exame clínico da morfologia límbica. No entanto, esta tecnologia não permite imagens de alta resolução de detalhes estruturais e apenas até 20% dos pacientes podem ser identificados. A microscopia confocal in vivo tem sido usada para visualizar o POV e pode fornecer imagens com resolução de nível celular, mas a técnica é limitada pela alta ampliação que restringe a área da varredura. Além disso, a microscopia confocal in vivo requer contato direto com o olho. Embora a qualidade dessas imagens seja impressionante, as desvantagens existentes incluíam o contato direto durante o exame, o pequeno campo de visão (~200μm x 200μm) e a resolução axial limitada. Além disso, tanto a biomicroscopia com lâmpada de fenda quanto a microscopia confocal in vivo têm a limitação de não serem capazes de dar uma visão geral da dimensão e estrutura de toda a região das paliçadas.

A tomografia de coerência óptica (OCT) é uma modalidade de imagem que permite imagens não invasivas da morfologia do tecido biológico com resolução em escala micrométrica em profundidades de imagem de 1-2 mm abaixo da superfície do tecido. Durante esses poucos anos, a OCT tornou-se uma ferramenta clínica e de pesquisa útil para imagens da superfície ocular. Além do aplicativo mais utilizado para observar o disco óptico e a estrutura coroidal da retina, o uso no segmento anterior, especialmente na córnea, também foi amplamente desenvolvido. Uma OCT de segmento anterior (Visante; Carl Zeiss Meditec, Dublin, CA), uma OCT de domínio do tempo, é uma OCT disponível comercialmente projetada especialmente para o segmento anterior. Este instrumento OCT tem sido amplamente utilizado em LASIK, diferentes ceratoplastias lamelares, triagem de ceratocone e avaliação de doenças da córnea em diferentes camadas. No entanto, sua resolução limitada não permite a observação da camada epitelial na superfície ocular. A OCT de domínio espectral com um módulo corneano pode fornecer uma resolução muito melhor do que a OCT de domínio de tempo para a observação da camada epitelial na superfície ocular. Tem sido usado recentemente para avaliar a camada epitelial da córnea com resultados confiáveis. Neste estudo, usamos uma OCT de tomografia de coerência óptica de domínio de Fourier (RTvue, Optovue Inc., Fremont, CA), com um adaptador de lente longa de módulo córneo-anterior com baixa ampliação, para observar a estrutura límbica (POV). O objetivo do estudo é avaliar o papel do envelhecimento e das regiões do limbo.