Usando a perfusão do cotilédone para estudar a transferência de drogas através da placenta (DRUGS-PTP)

Por razões éticas, mulheres grávidas não são incluídas em ensaios clínicos, de modo que dados sobre segurança e eficácia de muitos medicamentos são escassos. Sabe-se que os xenobióticos atravessam a barreira placentária, mas os estudos sobre a quantidade e os mecanismos dessa transferência permanecem insuficientes. Entre as diferentes metodologias para avaliar a transferência de drogas, a perfusão do cotilédone humano é uma das mais relevantes. Os dois lados do cotilédone, fetal e materno, são perfundidos dentro de uma hora após o parto com meio EARLE em circuito duplo fechado. A droga em estudo (pode ser qualquer droga administrada a gestantes) e a antipirina (molécula controle) são adicionadas no início das três horas de perfusão realizadas a 37°C, com fluxo materno de 12ml/min e fetal de 6ml /min. As amostras são coletadas ao longo da perfusão e a dosagem das drogas será feita no departamento de farmacologia do Cochin Hospital. Tecidos do cotilédone também serão coletados para estudo das proteínas e ARNs expressos. As concentrações do fármaco serão analisadas calculando-se as taxas de concentração fetal para materna e uma taxa de transferência fetal (quantidade fetal de fármaco sobre a quantidade total de fármaco no final da perfusão). Em seguida, a modelagem no software Monolix será feita para estimar as constantes de transferência entre os dois compartimentos. A modelagem permitirá estimar a variabilidade interindividual e testar covariáveis ​​como sexo, duração da gestação, genética ou expressão de proteínas. As proteínas serão estudadas por um método apropriado (western blot, ou análise proteômica). O estudo genético consistirá na abordagem do gene candidato. Serão escolhidos polimorfismos em genes que codificam transportadores ou enzimas ou seus reguladores.