Estudo Genético de Famílias Afetadas pela Doença Óssea de Paget (PAGET)

Introdução: A doença óssea de Paget é um distúrbio ósseo crônico com início tardio, geralmente após os 40 anos de idade. Esta doença é transmitida em um padrão autossômico dominante de herança com penetrância incompleta. Desde 2002, o primeiro gene (SEQUESTOSOME 1 ou SQSTM1) envolvido na doença óssea de Paget é conhecido. Atualmente, 14 mutações desse gene localizadas nos éxons 7 e 8 foram relatadas em formas familiares da doença, bem como em formas esporádicas. Embora o tamanho das amostras estudadas na literatura seja bastante pequeno para estabelecer correlações fenótipo-genótipo, parece que a presença dessas mutações está associada a um início mais precoce da doença e a uma doença mais extensa. No entanto, a presença dessas mutações parece não ser suficiente para explicar todo o desenvolvimento da doença, mas análises funcionais podem ajudar a entender o real efeito dessas mutações. A ligação entre a genética e a observação de inclusões PARANYXOVIRAL no núcleo de osteoclastos não está realmente estabelecida. A hipótese de uma interação entre gene e ambiente pode ser plausível para vários autores.

Os resultados de um estudo em 94 pacientes franceses esporádicos com doença óssea de Paget levaram à identificação de duas novas mutações do gene SQSTM1 e mostraram a presença de mutações SQSTM1 duplas. Este estudo estabeleceu correlações fenótipo genótipo, os indivíduos afetados que carregam uma mutação têm uma idade mais jovem no momento do diagnóstico e um envolvimento poliostótico. Essa correlação fenótipo genótipo é um elemento importante que pode ajudar a direcionar os familiares em risco de complicações, que podem se beneficiar de um tratamento precoce para prevenir a ocorrência de complicações.

Objetivo primário: recrutar 15 pacientes afetados pela doença óssea de Paget, com forma familiar, e seus familiares saudáveis ​​ou afetados, até o segundo grau de parentesco (total de cerca de 100 indivíduos) para um estudo genético da doença óssea de Paget com : Coleta de DNA, punção de sangue para coleta de RNA, coleta de soro e coleta de urina para estudo dos parâmetros de remodelação óssea. Amostras de DNA serão usadas para pesquisar mutações envolvidas na doença óssea de Paget em colaboração com o centro de pesquisa do centro hospitalar universitário de LAVAL, Quebec, Canadá.

Os critérios de inclusão e exclusão são descritos em outro lugar.

Descrição do protocolo:

- Identificação dos pacientes afetados (15 casos índices). Visita de inclusão do caso índice: informações sobre o projeto e assinatura do consentimento, validação dos critérios de inclusão do caso índice, exame clínico, respostas ao questionário. Pedigree familiar detalhado e informações fornecidas ao caso índice para os parentes até o segundo grau de parentesco para participação no presente estudo. Punção de sangue e coleta urinária, exames de imagem são necessários nos próximos três meses somente se não tiverem sido feitos anteriormente.

Visita de inclusão do familiar saudável ou acometido pela doença óssea de Paget: Informações sobre o projeto e assinatura do consentimento, validação dos critérios de inclusão, exame clínico e resposta ao questionário, coleta de sangue e urina. A imagem é necessária apenas para parentes saudáveis ​​com cintilografia óssea nos próximos três meses ou radiografias de crânio e pelve. Para os familiares afetados, exames de imagem são solicitados apenas quando não realizados anteriormente.

Exames realizados no paciente para o estudo:

Cada indivíduo, saudável ou acometido pela doença óssea de Paget, incluído neste estudo, deve ser submetido a exames biológicos (fosfatases alcalinas, creatinina e gamaGT) e exames de imagem, caso não tenham sido realizados nos últimos 10 anos (cintilografia óssea e/ou radiografias do crânio e pélvis). Serão feitas punções de sangue para extração de amostras de DNA, RNA e soro e coletas de urina.

Benefícios e riscos:

Benefícios: A realização de exames biológicos e de imagem para busca de lesões ósseas assintomáticas da doença de Paget óssea, pode levar à identificação fortuita de lesões ósseas de diversas etiologias, cujo tratamento e acompanhamento pode ser benéfico para os familiares, mas o tipo de benefício não é certo. A identificação de uma mutação SQSTM1 em um parente pode levar a um tratamento mais precoce que pode prevenir a ocorrência de complicações. De fato, existe um tratamento médico eficiente para a doença óssea de Paget (bifosfonatos). Não há benefício para o caso índice, nem para os familiares afetados.

Riscos conhecidos : Dor devido a punção de sangue venoso e irradiação com a cintilografia óssea e/ou radiografias.

Número de pacientes: 15 pacientes afetados pela doença óssea de Paget e seus familiares em primeiro ou segundo grau de parentesco, em um total de cerca de 100 indivíduos. Este número é baseado na viabilidade do recrutamento e no fato de que essas famílias podem ser agrupadas para análise com famílias de Quebec e permitirá aumentar o poder de detectar por análise de ligação novas mutações, novos haplótipos e/ou novos genes.

Objetivo principal: Novas mutações ou novos haplótipos de mutações já identificadas, novas mutações de novos genes da doença.

Resultados esperados :

• De acordo com a frequência das mutações do SQSTM1 nas formas familiares da doença, uma mutação neste gene pode ser identificada em 1/3 das famílias, ou seja, cerca de 5 famílias. Nessas famílias, o estudo dos haplótipos pode mostrar dois haplótipos principais contendo a mutação P392L. Esse material de família com mutação identificada pode ser útil na busca de correlação fenótipo genótipo e na busca de fatores modificadores (genéticos, epigenéticos, ambientais).
• Nas outras 10 famílias, nenhuma mutação SQSTM1 é esperada. Essas famílias podem ser agrupadas com famílias com antecedentes genéticos (franco-canadenses), que podem permitir alcançar um poder suficiente para detectar por análise de ligação novas regiões do genoma que podem conter um outro gene da doença óssea de Paget.