Um estudo retrospectivo de biomarcadores em câncer de pulmão de células não pequenas

O objetivo deste estudo é:

1. Caracterizar os tipos e a frequência de alterações moleculares na via do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), FGFR4 e EML-ALK em pacientes asiáticos com câncer de pulmão de células não pequenas
2. Identificar biomarcadores candidatos de importância nas vias de EGFR e estrogênio

A maioria, se não todas, as malignidades humanas, incluindo o câncer de pulmão, são causadas por alterações somáticas do genoma, levando à ativação de oncogenes ou inativação de genes supressores de tumor e seus efeitos oncogênicos resultantes. Além das mutações, o aumento do número de cópias cromossômicas (por amplificação ou polissomia) e a metilação do DNA são outros mecanismos de ativação do oncogene e inativação do gene supressor de tumor, respectivamente.

Pouco se sabe sobre a relação entre esses oncogenes da família EGFR e os recentemente descritos oncogenes FGFR4 e fusão do gene EML4-ALK. Dados recentes sugerem que existem subgrupos definidos molecularmente de câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) e podem ser usados ​​para prever a sensibilidade a agentes direcionados (erlotinibe ou gefitinibe) ou quimioterapia citotóxica (pemetrexato, gencitabina, agentes de platina). As descobertas de que os receptores de estrogênio estão presentes em tumores de pulmão e que o estrogênio pode estimular o crescimento e a proliferação de cânceres de pulmão in vitro e in vivo são provocativas. Mais estudos para avaliar o papel dos estrogênios e outros hormônios sexuais no câncer de pulmão são necessários.

Uma compreensão mais aprofundada dos indicadores moleculares do prognóstico do câncer de pulmão e da previsão do tratamento melhoraria o desenvolvimento de medicamentos e a seleção do tratamento do paciente.

Tecido de tumor de NSCLC fresco congelado e embebido em parafina arquivado será obtido através do Departamento de Patologia e do Repositório de Tecidos da Universidade Nacional, respectivamente. As características clínico-patológicas serão obtidas nos prontuários, Patologia e Repositório de Tecidos. O DNA será isolado usando técnicas padrão. Sequenciamento de genes na via de sinalização do EGFR: EGFR, KRAS, ErbB2, ErbB3, MET, PI3K e BRAF, bem como FGFR4. Lâminas não coradas do tecido embebido em parafina serão obtidas e submetidas à hibridização in vitro fluorescente (FISH) para pontos de quebra nos genes EML4 e ALK conforme descrito anteriormente. Para os casos que foram congelados, o RNA será extraído e as fusões EML4-ALK serão confirmadas usando RT-PCR e primers pré-especificados. Analisar a expressão de proteínas de relevância putativa para a função de EGFR (como EGFR, ErbB2, ErbB3, AKT, MET, STAT, ERK, MAPK, ciclina D1, C/EBPa), efeitos a jusante de EGFR: proliferação celular (Ki-67 ), angiogênese (CD34, VEGF-A), apoptose (bcl-2), metástase e influência hormonal (receptores de estrogênio e progesterona, aromatase), a tecnologia TMA será utilizada. O estado dos genes supressores de tumor PTEN e C/EBPa será analisado.