Efeitos do BCG na Resposta Imunológica

A sepse é um grande desafio médico associado a uma alta taxa de mortalidade. A liberação de mediadores pró-inflamatórios pode resultar em instabilidade hemodinâmica, anormalidades da coagulação e disfunção de órgãos-alvo. Estratégias anteriores visavam tratar a sepse por inibição de mediadores pró-inflamatórios, no entanto, a maioria dessas abordagens falhou. Isso pode ser devido ao fato de que a maioria dos pacientes sépticos não sucumbe ao "golpe" pró-inflamatório inicial, mas morre posteriormente em um estado imunossupressor pronunciado. Essa chamada 'imunoparalisia', que torna os pacientes extremamente vulneráveis ​​a infecções secundárias, resulta do desencadeamento de vias anti-inflamatórias contrarreguladoras juntamente com a resposta pró-inflamatória, já iniciada no início da sepse. A imunoparalisia está sendo cada vez mais reconhecida como a principal disfunção imunológica durante a sepse. Como consequência, a reconstituição da imunocompetência está emergindo como um novo e promissor alvo terapêutico para melhorar o resultado em pacientes com sepse.

Bacilo Calmette-Guérin (BCG) é uma das vacinas mais comumente administradas em todo o mundo. Além da proteção contra a tuberculose, as evidências sugerem que a imunização com BCG tem vários efeitos imunológicos não específicos benéficos adicionais, protegendo assim contra infecções por patógenos que não a tuberculose. Os mecanismos imunológicos subjacentes não estão totalmente elucidados. Recentemente, foi demonstrado que os monócitos podem ser reprogramados funcionalmente para um fenótipo aprimorado e duradouro após a vacinação com BCG. A produção de citocinas pró-inflamatórias por monócitos isolados de voluntários após a vacinação com BCG foi aumentada após estimulação ex vivo com patógenos não relacionados, mesmo meses após a vacinação com BCG. Supõe-se que os efeitos observados sejam devidos à modulação do sistema imunológico inato em um processo chamado "imunidade treinada". Após a estimulação com um patógeno, o sistema imunológico inato torna-se preparado e é capaz de reagir de forma mais rápida e eficiente a um estímulo secundário (e não relacionado), mesmo meses depois. Demonstrou-se que o "treinamento" de monócitos depende da reprogramação epigenética, ou seja, aumento da metilação da histona 3 na lisina 4 (H3K4me3) no nível das regiões promotoras do gene TLR4 e citocina.

Considerando esses efeitos potencializadores do BCG na defesa inata do hospedeiro, pode ser uma opção de tratamento viável para a imunoparalisia induzida por sepse. No entanto, os efeitos da vacinação com BCG na resposta imune inata em humanos até agora só foram demonstrados ex vivo. Ainda não foi estabelecido se esses achados podem ser extrapolados para a situação in vivo em humanos, porque dados anteriores de nosso grupo indicam que as medições ex vivo não refletem com precisão a situação in vivo. O modelo de endotoxemia humana, no qual voluntários saudáveis ​​recebem lipopolissacarídeo (LPS) derivado de Escherichia coli, é amplamente utilizado para estudar os efeitos da inflamação sistêmica em humanos in vivo e é considerado um método seguro e altamente reprodutível para investigar a resposta imune inata. Além disso, a administração de LPS resulta em um estado hiporresponsivo a uma segunda administração de LPS chamada "tolerância à endotoxina", que se assemelha à imunoparalisia induzida por sepse e pode, portanto, ser usada como modelo para investigar intervenções terapêuticas para reverter essa condição.

O grupo-alvo pretendido para esta nova terapia, pacientes com sepse, são imunocomprometidos. Portanto, o uso de uma vacina viva atenuada, como a BCG, pode apresentar um risco de infecção micobacteriana disseminada. Portanto, usaremos neste estudo a vacina BCG γ-irradiada (inativada). Resultados recentes, ainda não publicados, do grupo do Prof. Netea mostraram que os efeitos do BCG irradiado com γ no treinamento de monócitos são comparáveis ​​aos da vacina viva. Além disso, um estudo do grupo do Prof. Netea (CMO 2013/319) com este tipo e dose de BCG γ irradiado em voluntários saudáveis ​​para estudar as respostas ex vivo foi previamente aprovado pelo comitê de ética.

Design de estudo:

Um estudo piloto randomizado duplo-cego controlado por placebo em voluntários humanos saudáveis ​​durante a endotoxemia experimental.

Neste estudo piloto, vamos inscrever 20 indivíduos. No dia 1, 10 indivíduos receberão vacinação com BCG irradiada com γ e 10 indivíduos receberão placebo. No dia 6, todos os indivíduos serão submetidos a endotoxemia experimental.