Inflamação do músculo esquelético, estresse oxidativo e reparo do DNA na sarcopenia relacionada à idade

Para este projeto, continuaremos a obter informações mecanísticas sobre a perda muscular relacionada à idade e a maximizar a utilidade do tecido que coletamos anteriormente (Claude D. Pepper Older Americans Independence Center (OAIC); Apoptose muscular esquelética e desempenho físico; RNA oxidativo /DNA danificado e reparado em músculos humanos envelhecidos (Estudo de Desenvolvimento), IRB # 429-2005) e coletaremos tecido muscular de outros indivíduos jovens. Este projeto testará especificamente se as vias inflamatórias e os mecanismos de reparo do DNA estão alterados e/ou envolvidos no desenvolvimento da sarcopenia e no declínio relacionado na função física observada em idosos.

Objetivo 1. Determinaremos ainda a associação da massa e função do músculo esquelético com mediadores intramusculares da inflamação. O foco será em proteínas inflamatórias (por exemplo, TNF, TNFR1, pIkBα, pIKKb, CCL2, ZIP14, ZnT2) e genes (por exemplo, IL-6, TNFa, IL11β, IL-8, CCL2, CCR2, NFkB p50, NFkB p65, ZIP14) e metais (por exemplo, cobre, zinco e ferro). Nossa hipótese é que a maioria desses marcadores será regulada positivamente no músculo de indivíduos mais velhos quando comparados aos jovens.

Objetivo 2. Pela primeira vez, determinaremos o efeito relacionado à idade do dano ao DNA no padrão e na dinâmica da tradução do mRNA no tecido muscular humano por análise ampla do genoma usando "perfil de ribossomo". As técnicas de sequenciamento profundo recentemente desenvolvidas de RNA-seq e "perfil de ribossomo" serão implementadas no músculo humano. Isso nos permitirá explorar em escala genômica e na resolução de um único nucleotídeo, o efeito do dano ao DNA relacionado à idade na fidelidade transcricional e na cinética translacional. É importante ressaltar que, pela primeira vez, essas mudanças de fenótipo serão comparadas com o mapeamento do genoma de danos no DNA, um fator importante que impulsiona o envelhecimento dos mamíferos. Nossa hipótese é que o músculo mais velho tem maior modificação dos padrões translacionais em comparação com o músculo jovem.

As amostras de tecido muscular restantes após a conclusão desta pesquisa serão armazenadas e usadas no futuro para explorar novos caminhos de pesquisa relacionados ao envelhecimento.