Воспаление скелетных мышц, окислительный стресс и репарация ДНК при возрастной саркопении

В этом проекте мы продолжим изучать механизмы возрастной потери мышечной массы и максимально использовать ткани, которые мы ранее собирали (Центр независимости пожилых американцев Клода Д. Пеппера (OAIC); Апоптоз скелетных мышц и физическая работоспособность; Окислительная РНК). /Повреждение и восстановление ДНК в мышцах пожилого человека (исследование развития), IRB № 429-2005), и мы соберем мышечную ткань у дополнительных молодых субъектов. В рамках этого проекта будет специально проверено, изменяются ли воспалительные пути и механизмы репарации ДНК и / или участвуют ли они в развитии саркопении и связанного с этим снижения физической функции, наблюдаемого у пожилых людей.

Цель 1. В дальнейшем мы будем определять связь массы и функции скелетных мышц с внутримышечными медиаторами воспаления. Основное внимание будет уделено воспалительным белкам (например, TNF, TNFR1, pIkBα, pIKKb, CCL2, ZIP14, ZnT2) и генам (например, IL-6, TNFa, IL11β, IL-8, CCL2, CCR2, NFkB p50, NFkB p65, ZIP14) и металлы (например, медь, цинк и железо). Мы предполагаем, что большинство этих маркеров будет повышаться в мышцах у пожилых людей по сравнению с молодыми.

Цель 2. Впервые мы определим возрастное влияние повреждения ДНК на характер и динамику трансляции мРНК в мышечной ткани человека с помощью полногеномного анализа с использованием «профилирования рибосом». Недавно разработанные методы глубокого секвенирования РНК-секвенирования и «профилирования рибосом» будут реализованы на мышцах человека. Это позволит нам исследовать в геномном масштабе и с разрешением в один нуклеотид влияние возрастных повреждений ДНК на точность транскрипции и кинетику трансляции. Важно отметить, что впервые эти изменения фенотипа будут сравниваться с картированием генома повреждений ДНК, основного фактора, вызывающего старение млекопитающих. Мы предполагаем, что более старые мышцы имеют большую модификацию поступательных паттернов по сравнению с молодыми мышцами.

Образцы мышечной ткани, оставшиеся после завершения этого исследования, будут храниться и использоваться в будущем для изучения новых направлений исследований, связанных со старением.