Quase experimento de probióticos pré-natais contra a colonização por estreptococos do grupo B

Métodos

Um projeto quase experimental, não cego, aberto, foi aprovado pelos Conselhos de Revisão Institucional de três instituições (duas universidades e o centro de pesquisa clínica). O cenário do estudo foi uma grande prática clínica de enfermeira-parteira certificada (subseqüentemente chamada de parteira), atendendo a uma população urbana diversificada cultural e economicamente na região Centro-Oeste dos EUA.

Participantes As mulheres se auto-selecionaram para participar dos procedimentos de triagem e consentimento informado pelos dois primeiros autores. Os seguintes critérios de inclusão foram usados ​​na inscrição no estudo: baixo risco (sem fatores de risco obstétricos, fetais, médicos ou genéticos), adulto (≥18 anos de idade), grávida com 28 ± 2 semanas de gestação, capaz de falar e escrever inglês e expressando vontade de participar da intervenção do estudo (probiótico oral) e coleta de dados (swabs vaginais e retais, questionários).

Procurou-se uma amostra de conveniência de 20 participantes grávidas saudáveis. Após o consentimento informado, os primeiros 10 indivíduos foram designados para o grupo experimental. A atribuição não aleatória foi usada para garantir que os 10 participantes do grupo experimental fossem inscritos, permanecendo dentro do financiamento e das restrições de tempo. Depois de inscrever o grupo experimental, as próximas dez mulheres foram designadas para o grupo de controle.

Intervenção

A intervenção do estudo consistiu em uma cápsula de Florajen3 (descrito anteriormente) por via oral a cada dia. Florajen3 atende aos critérios probióticos estabelecidos internacionalmente (FAO/OMS, 2001). Os probióticos contidos no Florajen3 são bactérias não formadoras de esporos, produtoras de lactose e peróxido de hidrogênio. O fabricante recomenda refrigeração para manter a potência máxima. Como parte da preparação para este estudo, uma amostra de Florajen3 foi deixada sem refrigeração por um período de 6 semanas e as contagens apropriadas de colônias foram mantidas. Portanto, para o propósito do estudo, os participantes do grupo experimental foram autorizados a deixar o probiótico sem refrigeração em um esforço para melhorar a adesão diária. Os participantes do estudo do grupo experimental foram informados sobre a marca probiótica usada (rótulo aberto) como intervenção.

Além disso, o estado atual do conhecimento sobre probióticos pré-natais, incluindo efeitos colaterais potencialmente raros, foi amplamente discutido usando um documento de consentimento informado de 10 páginas. O Florajen3 foi colocado em um frasco de estudo equipado com um sistema de monitoramento de tampa eletrônica (MEMS ®AARDEX), projetado para registrar cada vez que o frasco foi aberto pelo participante. Cada abertura do frasco com tampa equipado com este sistema é registrada em um microchip. O número de aberturas é recuperável por meio de software de computador quando as tampas de garrafa são devolvidas. Pesquisadores, parteiras e participantes estavam cientes da designação do grupo. Os participantes do grupo controle não receberam placebo.

Procedimentos

As obstetrizes e a equipe de pré-natal foram orientadas sobre os procedimentos de coleta de dados do estudo. Os dados do estudo foram coletados em três pontos durante as consultas pré-natais de rotina com a parteira de cada participante (28±2 semanas, 32±2 semanas e 36±2 semanas de gestação). O estudo foi considerado concluído na visita de 36±2 semanas de gestação. Todos os participantes receberam compensação após a conclusão de 2 visitas do estudo; 25 USD às 32±2 semanas e 75 USD às 36±2 semanas de gestação. Os participantes do grupo de probióticos receberam um suprimento de probióticos para o restante da gravidez.

A parteira do pré-natal coletou informações demográficas (data de nascimento, raça e idade gestacional) e esfregaços vaginais e retais para GBS e útero úmido, usando critérios aceitos para identificar o pH vaginal e a presença de flora normal e/ou patógenos. As montagens úmidas foram examinadas microscopicamente por cada parteira usando procedimentos padronizados de diagnóstico de monta úmida com solução salina normal e hidróxido de potássio e documentados em um formato padrão. Os participantes preencheram um breve questionário em cada visita do estudo que lhes pedia para descrever a ingestão de iogurte, atividade sexual (frequência e tipo) e práticas de limpeza vaginal (se usadas) na última semana; estas foram consideradas potenciais variáveis ​​de confusão. Os participantes também foram questionados se essas práticas eram típicas para eles e, se não, como eram atípicas. As mulheres do grupo experimental foram solicitadas a relatar quaisquer efeitos colaterais que atribuíssem aos probióticos, notificando sua parteira imediatamente, se necessário, e anotando também as informações no questionário do estudo. Como parte do cuidado pré-natal de rotina, o esfregaço vaginal a retal de GBS exigido pelo CDC foi coletado pela parteira de cada participante e enviado ao laboratório do hospital entre a visita de 35 e 37 semanas. Este foi o único resultado que determinou a necessidade de IAP.

Os pesquisadores supervisionaram a coleta de dados e o empacotamento de amostras. Os participantes foram solicitados a devolver seus frascos de probióticos em cada visita do estudo e as cápsulas Florajen3 foram substituídas por um novo suprimento. Isso deu aos pesquisadores a oportunidade de notificar o laboratório para registrar a data para posterior avaliação dos resultados do monitoramento da tampa eletrônica e realizar a contagem de comprimidos como um meio adicional para monitorar as respostas das mulheres à participação no estudo, bem como a adesão ao probiótico em cada visita do estudo. Os swabs vaginais e retais foram colocados em gelo, embalados de acordo com os procedimentos aceitos para manuseio de espécimes humanos e enviados durante a noite para o laboratório do autor final, localizado a 80 milhas do local do estudo, para processamento e análise.

Análise laboratorial Ao serem recebidos no laboratório, os swabs vaginais e retais foram processados ​​para contagem quantitativa de colônias de GBS. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi realizada para determinar se as bactérias isoladas eram as mesmas de Florajen3. Se positivo para PCR, a eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE) seria realizada para confirmar a identidade da cepa.

Esses resultados foram apenas para fins de pesquisa e não estavam disponíveis para as parteiras praticantes.

Os swabs vaginais a retais de GBS pré-natal de rotina recomendados pelo CDC foram analisados ​​no laboratório do hospital, usando um método baseado em cultura no qual um limite para resultados positivos de GBS é considerado superior a 102 unidades formadoras de colônias (CFU) por swab. Esses resultados determinaram a necessidade de IAP e foram disponibilizados às parteiras para manejo durante o trabalho de parto.

Análise estatística

Os dados demográficos, as variáveis ​​do estudo e os dados laboratoriais foram inseridos e analisados ​​com um pacote de software estatístico. Estatísticas descritivas, intervalos de confiança, qui-quadrado, testes t e correlações foram usados ​​para análise. Os dados foram comparados entre os indivíduos em cada visita do estudo e entre os grupos em cada ponto de coleta de dados. Os resultados qualitativos da cultura GBS pré-natal (positivo ou negativo) do laboratório do hospital foram comparados com os resultados quantitativos do estudo GBS vaginal e retal, dados de adesão e variáveis ​​de confusão (ingestão de iogurte, atividade sexual e práticas de limpeza vaginal).