SRT em comparação com ERT em aspectos imunológicos e envolvimento ósseo na doença de Gaucher

Introdução

Os lisossomos são pequenas organelas citoplasmáticas que contêm várias enzimas hidrolase ácidas. Essas enzimas quebram materiais estranhos e detritos celulares, permitindo que os lisossomos atuem como centros de reciclagem para as células. Após a transcrição do DNA, as enzimas lisossômicas são produzidas no retículo endoplasmático e direcionadas aos lisossomos por marcadores de reconhecimento específicos. Se uma das enzimas estiver ausente ou se sua função for diminuída devido a uma alteração na sequência de aminoácidos da proteína ou tráfego intracelular defeituoso, as macromoléculas metabolizadas pela enzima específica irão gradualmente se acumular nos lisossomos. O armazenamento anormal do substrato leva à disfunção celular seguida pela morte celular, manifestando-se, em última análise, como dano tecidual e falência de órgãos.

A doença de Gaucher (DG) é um distúrbio de armazenamento lisossômico causado por uma deficiência genética da enzima lisossômica glicocerebrosidase. A DG leva ao acúmulo de glicoesfingolipídios em vários sistemas teciduais, principalmente nas células do sistema fagocitário mononuclear, resultando em uma ampla gama de efeitos fenotípicos heterogêneos nos indivíduos afetados. As manifestações clínicas da DG afetam vários órgãos, desde desregulações imunológicas, esplenomegalia até crises ósseas e osteoporose. A frequência do portador é de 1 em 200 para a população em geral com uma incidência de 1 em 60.000. No entanto, em certas populações, como os judeus Ashkenazi, a incidência pode chegar a 1 em 1.000.

Antecedentes e Significado

A terapia de reposição enzimática (TRE) dirigida por macrófagos tem sido a forma mais aceita de tratamento para DG. No entanto, ainda existem necessidades não atendidas no tratamento de todos os aspectos da DG usando TRE. Como alternativa à TRE, a terapia de redução de substrato (SRT) foi desenvolvida usando inibidores da glucosilceramida sintase. Enquanto o ERT é projetado para atingir os macrófagos, que são os tipos de células mais afetados, o SRT destina-se a atingir tipos de células amplas. É vital saber como cada forma de terapia atua em diferentes tipos de células e tecidos ao escolher administrar qualquer forma de tratamento em pacientes individuais. Nossos resultados preliminares de fenotipagem imune revelam que pacientes com DG em tratamento manifestam vários tipos de desregulações imunes persistentes. Informações sobre qual tipo de terapia funciona melhor no controle dessas desregulações forneceriam informações valiosas sobre as opções de tratamento. Uma análise aprofundada do sangue periférico esclareceria como vários componentes do sistema imunológico estão sendo afetados com qualquer forma de tratamento.

Os investigadores irão abordar esta questão a partir de dois aspectos: a) Avaliar o perfil de citocinas do plasma para ver se a dor relatada se correlaciona com um perfil particular de citocinas. b) Avaliar se a extensão da doença óssea pode ser prevista ou explicada por meio de marcadores do sangue periférico em relação às vias envolvidas na remodelação óssea. Os achados de pacientes individuais com DG seriam comparados em paralelo com a gravidade da doença e os achados de densidade óssea.

Neste estudo, os efeitos da TRE vs SRT serão monitorados e comparados de perto, principalmente tendo em mente os aspectos imunológicos, bem como a remodelação óssea. Para isso, será realizada imunofenotipagem aprofundada de pacientes que recebem essas formas de terapia para avaliar vários tipos de células imunes, incluindo células T, B e NK, monócitos e frações de células dendríticas do sangue periférico usando citometria de fluxo multiparamétrica. Além disso, os investigadores gostariam de avaliar a ativação de macrófagos usando ensaios para CCL18 e quitotriosidase secretados, bem como estudar o perfil de citocinas do plasma para avaliar sua contribuição para a dor/crise óssea. A fim de investigar se a extensão da remodelação óssea poderia ser prevista ou explicada usando marcadores do sangue periférico, a expressão dos componentes da via RANK/RANKL seria avaliada em tipos de células imunes relevantes. Ensaios in vitro baseados em células seriam desenvolvidos e utilizados para estudar a diferenciação e a função dos macrófagos. Os resultados de pacientes individuais com DG seriam comparados em paralelo com a gravidade da doença e os achados de densidade óssea. Esta proposta é altamente significativa e inovadora, pois espera-se que este estudo forneça informações sobre como cada forma de terapia influencia as desregulações imunológicas, a função dos macrófagos e seus efeitos na crise óssea em pacientes de Gaucher submetidos a TRE versus SRT. O insight sobre qual tipo de terapia funciona melhor no controle dessas desregulações daria informações valiosas sobre as opções de tratamento.