Impacto do tratamento antioxidante no índice de fragmentação do DNA (Androferti)

No mundo ocidental, aproximadamente 15-20% dos casais experimentam problemas de infertilidade durante sua vida reprodutiva. Neste contexto, ´'infertilidade' é definida como 12 meses de relações sexuais desprotegidas sem engravidar.

Embora haja acesso limitado a métodos diagnósticos confiáveis, assume-se que em pelo menos 50% de todos os casos a 'subfertilidade masculina' é uma contribuição ou a principal causa da infertilidade do casal. O padrão-ouro na avaliação da função reprodutiva masculina é a análise padrão do sêmen, incluindo a avaliação do número, motilidade e morfologia dos espermatozoides. Embora esforços tenham sido feitos para melhorar e padronizar a metodologia de análise de sêmen, não há níveis de corte bem estabelecidos para concentração, motilidade ou morfologia espermática que prevejam com precisão a chance de gravidez ou indiquem qual técnica de reprodução assistida (ART) - a mais terapia frequente para infertilidade - acabará por ser o mais eficaz. Essa falta de ferramentas diagnósticas não apenas dificulta o manejo adequado da infertilidade, mas também representa uma séria limitação em relação à compreensão das bases biológicas do distúrbio e, como consequência, ao desenvolvimento de modalidades de tratamento relacionadas à causa.

Embora vários novos métodos alternativos de avaliação da qualidade do sêmen tenham sido desenvolvidos, até agora nenhum contribuiu ou alterou nossa abordagem clínica para o tratamento de casais inférteis. Durante as últimas duas décadas, muita atenção foi dada ao comprometimento da integridade do DNA do esperma como uma possível causa de subfertilidade masculina. Existem diferentes técnicas atualmente disponíveis para a avaliação da integridade do DNA do esperma, por ex. Ensaio da estrutura da cromatina espermática (SCSA®), Cometa, TUNEL e teste de dispersão da cromatina espermática. Geralmente, o uso desses testes tem mostrado uma proporção aumentada de espermatozoides com estrutura de DNA fragmentada entre homens subférteis em comparação com homens comprovadamente férteis ou homens da população em geral. Embora medindo características diferentes do estado do DNA do esperma (por exemplo, presença de quebras de fita simples e dupla, propensão a danos e causa provável da fragmentação), comparações dos resultados obtidos com dois ou mais desses testes mostram um coeficiente de correlação de magnitude 0,4 a 0,6, indicando que, embora não totalmente sobrepostos, os testes, até certo ponto, avaliam algumas das mesmas características do DNA do esperma. Outra descoberta interessante é que existe apenas uma correlação fraca a moderada entre os parâmetros padrão do esperma e as medidas de integridade do DNA, sendo o nível de associação (coeficiente de correlação ~ 0,6) o mais pronunciado para a motilidade. Isso significa que a avaliação da integridade da cromatina espermática aumenta as informações obtidas pela análise padrão do sêmen.

O mais conceituado, padronizado e estudado dos testes de nDNA espermático é o SCSA® que se baseia em um protocolo muito bem definido para manipulação de amostras e posterior análise de dados. A robustez das técnicas foi exemplificada pela comparação dos resultados da análise SCSA® de quase 200 amostras realizada por dois laboratórios independentes que encontraram um coeficiente de correlação de 0,9 com diferença média entre os resultados do Índice de Fragmentação do DNA (DFI) de cerca de 1%. Outra vantagem do método SCSA® sobre as demais técnicas de avaliação é o número relativamente grande de estudos que utilizaram a técnica em ambientes clínicos, constituindo um registro considerável do desempenho do método na previsão do resultado da fertilidade.

Resumidamente, esses dados indicam que a chance de gravidez espontânea diminui em níveis de DFI acima de 20% e se aproxima de zero se DFI exceder 30%. Isso também é verdade para a inseminação intrauterina (IIU). No entanto, parece que mesmo espermatozóides de amostras com alto DFI podem ser usados ​​para fertilização in vitro por FIV padrão ou ICSI, com alguns dados sugerindo que o ICSI pode realmente ser mais eficiente usando amostras com alto (>30%) DFI. Uma descoberta que pode parecer paradoxal a princípio, mas pode ser um reflexo da probabilidade relativa de selecionar fortuitamente um espermatozoide com DNA intacto. Os dados referentes à taxa de fertilização, qualidade embrionária e risco de aborto em relação à DFI também são conflitantes.

Os mecanismos biológicos responsáveis ​​pelas quebras da cadeia de DNA e outros tipos de comprometimento da integridade do DNA do esperma não são completamente conhecidos. Entre outros reparos incompletos do DNA durante a espermiogênese, apoptose abortiva e/ou aumento do nível de estresse oxidativo têm sido sugeridos como possíveis opções.

O objetivo geral deste projeto é avaliar o efeito da restauração do equilíbrio oxidante usando Androferti, (Q Pharma Laboratories; Alicante, Espanha) na integridade do DNA espermático em homens subférteis com alto nível de DFI.