Impatto del trattamento antiossidante sull'indice di frammentazione del DNA (Androferti)

Nel mondo occidentale, circa il 15-20% delle coppie sperimenta problemi di infertilità durante la loro vita riproduttiva. In questo contesto ´'infertilità' è definita come 12 mesi di rapporti non protetti senza rimanere incinta.

Sebbene l'accesso a metodi diagnostici affidabili sia limitato, si presume che in almeno il 50% di tutti i casi la "subfertilità maschile" sia una concausa o la causa principale dell'infertilità della coppia. Il gold standard nella valutazione della funzione riproduttiva maschile è l'analisi standard dello sperma che include la valutazione del numero, della motilità e della morfologia degli spermatozoi. Sebbene siano stati fatti sforzi per migliorare e standardizzare la metodologia per l'analisi del seme, non ci sono livelli ben stabiliti per la concentrazione, la motilità o la morfologia degli spermatozoi che predicano accuratamente la possibilità di gravidanza o indichino quale tecnica di riproduzione assistita (ART) - la più terapia frequente per l'infertilità, alla fine sarà la più efficace. Questa mancanza di strumenti diagnostici non solo ostacola una corretta gestione dell'infertilità, ma rappresenta anche un serio limite in relazione alla comprensione delle basi biologiche del disturbo e, di conseguenza, allo sviluppo di modalità di trattamento correlate alla causa.

Sebbene siano stati sviluppati vari nuovi metodi alternativi per valutare la qualità del seme, finora nessuno ha contribuito o alterato il nostro approccio clinico al trattamento delle coppie infertili. Negli ultimi due decenni è stata prestata molta attenzione alla compromissione dell'integrità del DNA spermatico come possibile causa di subfertilità maschile. Esistono diverse tecniche attualmente disponibili per la valutazione dell'integrità del DNA spermatico, ad es. Saggio della struttura della cromatina spermatica (SCSA®), Comet, TUNEL e test di dispersione della cromatina spermatica. In generale, l'uso di questi test ha mostrato un aumento della proporzione di spermatozoi con struttura del DNA frammentata tra gli uomini subfertili rispetto a quelli dimostrati fertili o agli uomini della popolazione generale. Sebbene si misurino diverse caratteristiche dello stato del DNA spermatico (ad es. presenza di rotture a singolo e doppio filamento, propensione al danneggiamento e probabile causa della frammentazione), il confronto dei risultati ottenuti con due o più di questi test mostra un coefficiente di correlazione di grandezza da 0,4 a 0,6, indicando che, sebbene non completamente sovrapponibile, i test in una certa misura valutano alcune delle stesse caratteristiche del DNA spermatico. Un'altra scoperta interessante è che esiste solo una correlazione da debole a moderata tra i parametri standard dello sperma e le misure dell'integrità del DNA, il livello di associazione (coefficiente di correlazione ~ 0,6) è il più pronunciato per la motilità. Ciò significa che la valutazione dell'integrità della cromatina spermatica si aggiunge alle informazioni ottenute dall'analisi standard del seme.

Il test nDNA dello sperma più apprezzato, standardizzato e studiato è l'SCSA® che si basa su un protocollo molto ben definito per la manipolazione dei campioni e la successiva analisi dei dati. La robustezza delle tecniche è stata esemplificata da un confronto dei risultati dell'analisi SCSA® di quasi 200 campioni eseguiti da due laboratori indipendenti che hanno trovato un coefficiente di correlazione di 0,9 con una differenza media tra i risultati dell'indice di frammentazione del DNA (DFI) di circa l'1%. Un ulteriore vantaggio del metodo SCSA® rispetto alle restanti tecniche di valutazione è il numero relativamente elevato di studi che hanno utilizzato la tecnica in contesti clinici, costituendo un record considerevole delle prestazioni del metodo nella previsione dell'esito della fertilità.

In breve, questi dati indicano che la probabilità di gravidanza spontanea diminuisce a livelli di DFI superiori al 20% e si avvicina allo zero se il DFI supera il 30%. Questo vale anche per l'inseminazione intrauterina (IUI). Tuttavia, sembra che anche gli spermatozoi provenienti da campioni con DFI elevato possano essere utilizzati per la fecondazione in vitro mediante fecondazione in vitro o ICSI standard, con alcuni dati che suggeriscono che l'ICSI potrebbe effettivamente essere più efficiente utilizzando campioni con DFI elevato (> 30%). Una scoperta che a prima vista può sembrare paradossale ma che potrebbe riflettere la relativa probabilità di selezionare fortuitamente uno spermatozoo con DNA intatto. Anche i dati relativi al tasso di fecondazione, alla qualità dell'embrione e al rischio di aborto spontaneo in relazione al DFI sono contrastanti.

I meccanismi biologici responsabili delle rotture del filamento di DNA e di altri tipi di compromissione dell'integrità del DNA spermatico non sono completamente noti. Tra gli altri, sono state suggerite come possibili opzioni la riparazione incompleta del DNA durante la spermiogenesi, l'apoptosi abortiva e/o l'aumento del livello di stress ossidativo .

Lo scopo generale di questo progetto è valutare l'effetto del ripristino dell'equilibrio ossidante utilizzando Androferti, (Q Pharma Laboratories; Alicante, Spagna) sull'integrità del DNA spermatico in uomini subfertili con alto livello di DFI.