Wpływ leczenia antyoksydacyjnego na wskaźnik fragmentacji DNA (Androferti)

W świecie zachodnim około 15-20% par doświadcza problemów z niepłodnością w okresie rozrodczym. W tym kontekście „niepłodność” definiuje się jako 12 miesięcy współżycia bez zabezpieczenia bez zajścia w ciążę.

Mimo ograniczonego dostępu do wiarygodnych metod diagnostycznych przyjmuje się, że w co najmniej 50% wszystkich przypadków „męska niepłodność” jest przyczyną lub główną przyczyną niepłodności pary. Złotym standardem w ocenie funkcji rozrodczych samców jest standardowe badanie nasienia obejmujące ocenę liczby, ruchliwości i morfologii plemników. Chociaż podjęto wysiłki w celu udoskonalenia i ujednolicenia metodologii analizy nasienia, nie ma dobrze ustalonych poziomów granicznych stężenia, ruchliwości lub morfologii plemników, które dokładnie przewidywałyby prawdopodobieństwo zajścia w ciążę lub wskazywały, która technika wspomaganego rozrodu (ART) – najbardziej częsta terapia niepłodności – ostatecznie okaże się najskuteczniejsza. Ten brak narzędzi diagnostycznych nie tylko utrudnia właściwe leczenie niepłodności, ale także stanowi poważne ograniczenie w odniesieniu do zrozumienia biologicznych podstaw tego zaburzenia, aw konsekwencji rozwoju metod leczenia przyczynowo-skutkowego.

Chociaż opracowano różne nowe alternatywne metody oceny jakości nasienia, jak dotąd żadna nie przyczyniła się do ani nie zmieniła naszego podejścia klinicznego do leczenia niepłodnych par. W ciągu ostatnich dwóch dekad wiele uwagi poświęcono uszkodzeniu integralności DNA plemników jako możliwej przyczynie męskiej niepłodności. Obecnie dostępne są różne techniki oceny integralności DNA plemników, m.in. Test struktury chromatyny plemników (SCSA®), Comet, TUNEL i test dyspersji chromatyny plemników. Generalnie zastosowanie tych testów wykazało zwiększony odsetek plemników z pofragmentowaną strukturą DNA wśród mężczyzn z obniżoną płodnością w porównaniu z mężczyznami o potwierdzonej płodności lub z populacji ogólnej. Chociaż pomiar różnych cech statusu DNA plemników (np. obecność pęknięć pojedynczych i podwójnych nici, skłonność do uszkodzeń i prawdopodobna przyczyna fragmentacji), porównania wyników uzyskanych z dwóch lub więcej z tych testów wykazują współczynnik korelacji o wielkości od 0,4 do 0,6, co wskazuje, że chociaż niezupełnie się pokrywają, testy do pewnego stopnia oceniają niektóre z tych samych cech DNA plemników. Innym interesującym odkryciem jest to, że istnieje tylko słaba lub umiarkowana korelacja między standardowymi parametrami plemników a pomiarami integralności DNA, przy czym poziom powiązania (współczynnik korelacji ~ 0,6) jest najbardziej wyraźny dla ruchliwości. Oznacza to, że ocena integralności chromatyny plemników uzupełnia informacje uzyskane za pomocą standardowej analizy nasienia.

Najbardziej ocenianym, standaryzowanym i badanym testem nDNA plemników jest SCSA®, który opiera się na bardzo dobrze zdefiniowanym protokole postępowania z próbkami i późniejszej analizy danych. Solidność technik została zilustrowana przez porównanie wyników analizy SCSA® prawie 200 próbek wykonanych przez dwa niezależne laboratoria, które wykazały współczynnik korelacji 0,9 przy średniej różnicy między wynikami wskaźnika fragmentacji DNA (DFI) wynoszącej około 1%. Kolejną zaletą metody SCSA® w porównaniu z pozostałymi technikami oceny jest stosunkowo duża liczba badań, w których wykorzystano tę technikę w warunkach klinicznych, co stanowi znaczący zapis skuteczności tej metody w przewidywaniu płodności.

W skrócie, dane te wskazują, że prawdopodobieństwo samoistnej ciąży zmniejsza się przy poziomach DFI powyżej 20% i zbliża się do zera, jeśli DFI przekracza 30%. Dotyczy to również inseminacji domacicznej (IUI). Wydaje się jednak, że nawet plemniki z próbek o wysokim DFI można wykorzystać do zapłodnienia in vitro za pomocą standardowego IVF lub ICSI, a niektóre dane sugerują, że ICSI może być faktycznie bardziej wydajne przy użyciu próbek o wysokim (>30%) DFI. Odkrycie, które na pierwszy rzut oka może wydawać się paradoksalne, ale może być odzwierciedleniem względnego prawdopodobieństwa przypadkowego wybrania plemnika z nienaruszonym DNA. Dane dotyczące wskaźnika zapłodnień, jakości zarodków i ryzyka poronienia w odniesieniu do DFI są również sprzeczne.

Mechanizmy biologiczne odpowiedzialne za pęknięcia nici DNA i inne rodzaje upośledzenia integralności DNA plemników nie są do końca poznane. Jako możliwe opcje sugerowano między innymi niepełną naprawę DNA podczas spermiogenezy, nieudaną apoptozę i/lub zwiększony poziom stresu oksydacyjnego.

Ogólnym celem tego projektu jest ocena wpływu przywrócenia równowagi oksydacyjnej za pomocą Androferti, (Q Pharma Laboratories; Alicante, Hiszpania) na integralność DNA plemników u mężczyzn z obniżoną płodnością z wysokim poziomem DFI.