Indvirkning af antioxidantbehandling på DNA-fragmenteringsindeks (Androferti)

I den vestlige verden oplever cirka 15-20 % af parrene infertilitetsproblemer i løbet af deres reproduktive liv. I denne sammenhæng er ''infertilitet' defineret som 12 måneders ubeskyttet samleje uden at blive gravid.

Selvom der er begrænset adgang til pålidelige diagnostiske metoder, antages det, at 'mandlig subfertilitet' i mindst 50 % af alle tilfælde er en medvirkende eller hovedårsag til parrets infertilitet. Guldstandarden for vurdering af mandlig reproduktiv funktion er standard sædanalyse, herunder evaluering af sædtal, motilitet og morfologi. Selvom der er gjort en indsats for at forbedre og standardisere metoden til sædanalyse, er der ingen veletablerede afskæringsniveauer for sædkoncentration, motilitet eller morfologi, som præcist forudsiger chancen for graviditet eller angiver, hvilken assisteret reproduktionsteknik (ART) - den mest hyppig terapi for infertilitet- vil i sidste ende være den mest effektive. Denne mangel på diagnostiske værktøjer hæmmer ikke kun korrekt håndtering af infertilitet, men repræsenterer også en alvorlig begrænsning i forhold til forståelsen af ​​den biologiske underbygning af lidelsen og som følge heraf udviklingen af ​​årsagsrelaterede behandlingsmodaliteter.

Selvom der er udviklet forskellige nye alternative metoder til at vurdere sædkvaliteten, har ingen indtil videre bidraget til eller ændret vores kliniske tilgang til behandling af infertile par. I løbet af de sidste to årtier har der været meget opmærksomhed på svækkelse af sæd-DNA-integriteten som en mulig årsag til mandlig subfertilitet. Der findes i øjeblikket forskellige teknikker til vurdering af sæd-DNA-integritet, f.eks. Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA®), Comet, TUNEL og sperm chromatin dispersion test. Generelt har brugen af ​​disse test vist en øget andel af sædceller med fragmenteret DNA-struktur blandt subfertile mænd sammenlignet med bevist fertile eller mænd fra den generelle befolkning. Selvom man måler forskellige karakteristika af status for sæd-DNA (f.eks. tilstedeværelse af enkelt- og dobbeltstrengsbrud, tilbøjelighed til beskadigelse og sandsynlig årsag til fragmenteringen), sammenligninger af resultaterne opnået med to eller flere af disse test viser en korrelationskoefficient på størrelsesordenen 0,4 til 0,6, hvilket indikerer, at selvom det ikke er fuldstændig overlappende, testene vurderer til en vis grad nogle af de samme egenskaber ved sæd-DNA. Et andet interessant fund er, at der kun er en svag til moderat korrelation mellem standard sædparametre og mål for DNA-integritet, hvor associationsniveauet (korrelationskoefficient ~ 0,6) er det mest udtalte for motilitet. Dette betyder, at vurdering af spermkromatinintegritet tilføjer oplysningerne opnået ved standard sædanalyse.

Den mest vurderede, standardiserede og undersøgte af sperm-nDNA-testene er SCSA®, som er baseret på en meget veldefineret protokol til håndtering af prøver og efterfølgende dataanalyse. Robustheden af ​​teknikkerne blev eksemplificeret ved en sammenligning af SCSA®-analysen af ​​næsten 200 prøveresultater udført af to uafhængige laboratorier, som fandt en korrelationskoefficient på 0,9 med en gennemsnitlig forskel mellem DNA Fragmentation Index (DFI) resultaterne på omkring 1 %. En yderligere fordel ved SCSA®-metoden i forhold til de resterende vurderingsteknikker er det relativt store antal undersøgelser, der har brugt teknikken i kliniske omgivelser, hvilket udgør en betydelig registrering af metodens ydeevne til at forudsige fertilitetsresultater.

Kort fortalt indikerer disse data, at chancen for spontan graviditet falder ved DFI-niveauer over 20 % og nærmer sig nul, hvis DFI overstiger 30 %. Dette gælder også for intrauterin insemination (IUI). Det ser dog ud til, at selv spermatozoer fra prøver med høj DFI kan bruges til in vitro fertilisering ved standard IVF eller ICSI, med nogle data, der tyder på, at ICSI faktisk kan være mere effektiv ved at bruge prøver med høj (>30 %) DFI. Et fund, som i første omgang kan virke paradoksalt, men som kan være en afspejling af den relative sandsynlighed for tilfældigt at vælge en sædcelle med intakt DNA. Data vedrørende befrugtningsrate, embryokvalitet og risiko for abort i forhold til DFI er også modstridende.

De biologiske mekanismer, der er ansvarlige for DNA-strengbrud og andre former for svækkelse af sæd-DNA-integriteten, er ikke fuldstændigt kendte. Blandt andet er ufuldstændig DNA-reparation under spermiogenese, abortiv apoptose og/eller øget niveau af oxidativt stress blevet foreslået som mulige muligheder.

Det overordnede formål med dette projekt er at evaluere effekten af ​​at genoprette oxidantbalancen ved hjælp af Androferti (Q Pharma Laboratories; Alicante, Spanien) på sæd-DNA-integritet hos subfertile mænd med højt niveau af DFI.