Análise de biomarcadores moleculares em tumores anexiais perioculares

O objetivo desta pesquisa é coletar prospectiva e retrospectivamente carcinomas sebáceos da Fondazione Policlinico Gemelli, examiná-los imunopatologicamente e morfologicamente e estabelecer uma correlação entre essas características e fatores genéticos moleculares. A realização desta pesquisa contribuirá para a elucidação e avanço de uma via terapêutico-diagnóstica multidisciplinar. O estudo utilizará espécimes cirúrgicos, independentemente do estágio da doença, que foram fixados em formalina e embebidos em parafina. Essas amostras foram previamente coletadas para prática clínica na Oncologia Ocular da Fondazione Policlinico A. Gemelli IRCCS. O consentimento informado dos pacientes quanto ao uso dessas amostras para fins de pesquisa foi obtido previamente. por subclassificação precisa de acordo com a classificação da OMS e caracterização imunofenotípica. Uma coleção exaustiva de atributos prognósticos histopatológicos convencionalmente padronizados para carcinomas sebáceos será compilada. Em seguida, amostras de tecido são enviadas para IHC única e/ou múltipla. Os tecidos tumorais serão submetidos à quantificação digital automatizada em conjunto com avaliação multiparamétrica da linhagem celular. Integração de IHC com automação digital de análise. O sequenciamento do exoma será realizado em DNA extraído de cortes embebidos em parafina, a fim de detectar variantes específicas de tumores.

Para cada tumor, três a nove seções (10 micrômetros de espessura) serão utilizadas como fonte de DNA. Após a identificação e separação do tecido tumoral do tecido normal pelo patologista, os dois DNAs serão sequenciados de forma independente. Será feita uma comparação entre variantes derivadas de tumor e tecido normal, com resultados contrastantes. Os resultados esperados incluem 1) variantes somáticas ou específicas do tumor, que são inexistentes em tecidos saudáveis, e 2) variantes que são perdidas durante a evolução do tumor como resultado de deleção cromossômica segmentar ou outros mecanismos que induzem perda de heterozigosidade. Durante a fase prospectiva do projeto, os tumores recém-desenvolvidos serão preservados. Além disso, este recurso facilitará a análise do metiloma, que é um complemento à análise do exoma.